日本开发新型溶于油但不溶于水的酶
※
检测艮品科学2007,Vo1.28,No.07449
料
10
5
O
O51O152O
时问(min)
图5银耳多糖水解物色谱图
Fig.5ChromatogramofhydrolyzeTreme//apolysaccharide
有鼠李糖,木糖,果糖和葡萄糖.这与我们的TLC 分析结果一致(见参考文献【4】).此外,在HPLC分析 中果糖和葡萄糖间有一小峰未能确定是什么物质.在 我们的实验条件下还不能确定银耳多糖水解样中是否含 有半乳糖.
2.4.2银耳多糖中单糖的摩尔比
由于检测器对不同单糖的响应值不同,且不同次操 作也会造成误差.所以,样品的测定需随行内标物对 照,求出校正因子.在单糖组成分析中由于只需求得 单糖间的摩尔比,并不需要知道各单糖的具体量.所 以,我们采用1.2.4.2的数据处理
,求出各单糖的 比例.这样在消除误差方面更有利.根据分析和计算 方法,求得银耳多糖中鼠李糖,木糖,果糖,葡萄 糖的摩尔比为0.29:1.00:1.01:1.78.各单糖测定的RSD均 低于3.4%,测定结果重复性好.
3结论
3.1采用非衍生化高效液相色谱法,以分离度与峰形
两个因素作为评价指标,确定了单糖的最佳分析条件.
即,采用suger.D糖柱,RI检测器,以80%的乙腈作
为流动相,流速为0.8ml/min进行色谱分析.
3.2在确定的最佳分析条件下,对五种混合单糖进行
分析,由结果可知鼠李糖,木糖,果糖三种单糖可彼
此分离,这三种单糖也可和葡萄糖或半乳糖分开.但
在该分析条件下,葡萄糖和半乳糖不能分开.
3.3在确定的最佳分析条件下,我们初步确定银耳多
糖水解样中有鼠李糖,木糖,果糖和葡萄糖.银耳多
糖中鼠李糖,木糖,果糖,葡萄糖的摩尔比为0.29:
1.00:1.O1:1.78.为此法在多糖的单糖组成测定中能更好
运用提供了依据.
参考文献:
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日本开发出耘型溶于油坦不溶于水的酶
日本研究人员以一种水溶性酶为基础,开发出一种溶于油但不溶于水的酶.利用这种人造酶可实现蛋白质等高
分子化合物的高效分离.
据《日经产业新闻》6月19日报道,东京农工大学副教授中村畅文等人在水溶性酶"P450"的基础上开发
出了新型酶,这项新技术解决了采用传统合成法不易分离生成物的缺点,有助于药品材料的研发工作.
水溶性酶"P450"可在诸多物质的反应过程中起催化作用.反应结束后,水中溶解有"P450"和生成物,
在水中使生成物与酶相互分离需要大量时间.因此,尽管"P450"这种酶理论上可以催化多种反应,但是在实
际工业生产中却难以应用.
日本研究人员对"P450"进行了特殊处理,并在此基础上开发出一种溶于油但不溶于水的酶.在上层是油,
下层是水的溶剂中,新研制的酶和原料物质在油层反应,完成催化作用的酶停留在油中,而不溶于油的生成物会
沉入水中并被溶解,省去了人工分离生成物和酶的工序.此外,生产这种酶可以继续利用现有设备,不会造成生
产成本的增加.