[doc格式] 复方益肝灵滴丸质量标准研究

[doc格式] 复方益肝灵滴丸质量标准研究 复方益肝灵滴丸质量标准研究 复方益肝灵滴丸质量标准研究 梁其冰,洪金波,黄守良(海南省药物研究所,海口市570216) 中图分类号R283.64;R927.1文献标识码A文章编号 1001—0408(2008)21—1641—02 摘要目的:建立复方益肝灵滴丸的质量标准.方法:采用薄层色谱法对 水飞蓟,五味子进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对水 飞蓟宾进行含量测定.结果:定,tgg,~’l阴性无干扰,分离度高;水飞蓟 宾检测浓度在0.09-0.54mg?mL范围内与峰面积积分值 呈良好的线性关系;平均回收率为97.38%,RSD一1.19%(tl一6)结论: 所建标准可用于复方益肝灵滴丸的质量控制. 关键词复方益肝灵滴丸;质量标;位;薄层色谱法;高效液相色谱法 QualityStandardofCompoundYiganlingDroppingPills LIANGQi—bing,HONGJin, bo,HUANGShou—liang(HainanInstituteofPharmaceuticalResearch,Haikou 570216,China) ABSTRACTOBJEC’I,IVE:ToestablishthequailtystandardOfCompoundYiganlingdroppingpills.METHODS:Fructus SilybiandFructusSchisandraeChinensiswereidentifledbvTLC.Theconten tofSilybinwasdeterminedbyHPlC.RE— SULTS:Thequalitativeidentificationwasofhighresolutionandfreeofinterf erenceofnegativesubstance.Thelinearranges ofSilybinwas0.09, 0.54mg-mL,andtheaveragerecoverywab97.38%(RSD=1.19%,”一 6).CONCLUSION:The methodcanbeusedforthequalitycontrolofCompoundYiganlingdroppingpi lls. KEYWORDSCompoundYiganlingdroppingpills;Qualitystandard;TLC; HtIC 复方益肝灵滴丸处方出自《生部药品怀准中药成方制 剂》(第l2册)复方益肝灵片项,主要由益肝灵粉和五仁醇浸膏 加工研制而成,具有益肝滋肾,解毒祛湿等作用.原剂型质量标 准设有一项理化鉴别,一项溥层(TLC)鉴别,一项总黄酮的含 量测定(采用分光光度法):本研究原质量标准的基础卜,删 除了专属性不强的理化鉴别项,增设了一项TIc鉴男Ij;并且, 考虑到分光光度法在中药制剂的含量测定中准确性和专属性 均不强的弱点,改为采用高效液相色谱(HPLC)法对方中有效 成分——水飞蓟宾进行含量测定.结果明,所建标准叮用于 本制剂的质量控制. 1仪器与试药 10一AD犁HPIC仪(日本岛津公司);2010型液相色谱 工作站(浙江人学);BI211D电子天平(德国赛多利斯公 司).硅胶G,硅胶GF一(青岛海洋化工』一);复方益肝灵滴丸 (海南省药物研究所自制,批号:031201,031202,031203);水 蓟宾对照品(批号:0856—200203),血味子甲素对照品(批号: 0764—200107),五味子乙素对照品(批:110765—200205)均 购自中国药^生物制品检定所;甲醇为色潜纯,水为蒸馏水,其 余试剂均为分析纯. 2定性鉴别 2.1水飞蓟的TLC鉴别 取奉品物0.1g,加甲醇10mL,加热回流提取30 min,过滤,滤液作为供试品溶液.取缺水飞蓟的阴性样品,同 法制得阴性对照溶液.另取水蓟宾埘照品,加甲醇制成每1 mI含0.5mg的溶液,作为对照品溶液.照薄层色谱法试 验,吸取述3种溶液各5L,分别点于加1%氢氧化钠的 0.5%羧甲基纤维素钠溶液制成的硅胶(溥层饭上,以氯仿一 ?助理研究员.研究方向:约I5_llI质量标准及1艺.电话:0898 66803563 中阏药房2008,q-第19卷第21期 醋酸乙酯,甲醇一水(30:40:20:10)10?以下放置过夜的 下层溶液作为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nn1) 下检视.结果,供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上显相 同颜色的斑点;阴性对照无f 扰.水飞蓟的TIc见图1. 2.2五味子的TIc鉴别 取本品内容物0.3g,加甲 醇20m1,加热回流提取45 nfin,放冷,过滤,蒸干,残渣加甲 醇1m1使溶解,作为供试品溶 液.取缺五味子的阴性样品,同 法制得阴性对照溶液.另取五味 子甲素与五味子乙素对照品,加 甲醇制成每lm1各含0.2mg 的混合对照品溶液.吸取1述3 种溶液各10L,分别点于同一 硅胶(F薄层板上,以石油醚 (60,90?)一醋酸乙酯一甲酸 (15:5:1)作为展开剂,展开, 取出,晾干,置紫外光灯(254 11i’II)下检视.结果,供试品色谱在 l2j4 图1水飞蓟的TIc 1.对照晶;2,4,供试品;5阴 性对照 FiglTLCofFructusSi- lybi 1.referencesubstance;2,4. samples;5.negativesamples 对照晶色谱相应的位置上显相同颜色的斑点;阴性对照无 干扰.五味子的TIc见图2. 3含量测定 3.1对照品溶液的制备 精密称取水飞蓟宾对照品适量,加甲醇制备成浓度为0.4 mg?ml的对照品溶液. 3.2供试品溶液的制备 取供试品0.3g,置于烧瓶中,精密称定,加入20mI甲 醇,精密称定,回流提取6【) rain,精密称定,加醇补足 损耗的重量,过滤,精密量 取续滤液5mL,置于25 mL容量瓶中,加甲醇定 容,即得. 3.3阴性对照溶液的制 备 按处方比例制备缺水 蓟素的阴性样品,按 “3,2”项下方法制成阴性埘 照溶液 3.4色谱条件与系统适 应性试验 色谱柱:十八烷基硅胶 键合硅胶柱(150mrll×4.5 mm,5/xm);流动相:甲醇 水一0.1%磷酸二氧钾溶液 12345 图2五味子的TLC 1混合划照I:2,4洪试I”IW:5阴性 刈照 Fig2FLCofFructusSchisa? ndraeChinensis 1.i’lliXturc()froferencesubstances: 2,-1.samples:5.negativesamples (10:10:3,用磷酸凋pH4);检测波长:288nm;忙温:30?; 流速:1.0ml?rain;进样量:20I*L理沦塔板数按水蓟宾 峰计算应不低于5000.在述色谱条什卜,取对照品溶液,供 试品溶液及刚性对照溶液各2()tL进样,测定.结果表明,样品 中其它成分对水飞蓟宾的测定无干扰色谱见图3 2 7.51522.53037.51”1I1n 4 fi. 上|,,一 l-... 7.5I522.53U37.5n1I『l7.5I522.53037.5【l1In B(, 图3高效液相色谱 A.对照品;B.阴性对照;C.供试品;1.水蓟宾;2.肄水蓟宾 Fig3HPLC A.referenceSLlbslanee:B.negativesample:(,.sample:1.Silybin: 2.1sosilybin 3.5标准曲线的绘制 精密吸取浓度为0.09,0.18,0.24,0.36,0.54rng?mL’ 的对照品溶液各20L,按述色谱条件进样渊定以浓度(X) 对峰面积积分值(Y)进行线性lJl{,汁算,得同IH程为Y 10X-3×10(r=0.9996)结果表明,水蓟宾愉删浓吱在 0.09—0.54nag?【11I范围内峰面积积分值呈良好的线性 关系. 3.6精密度试验 精密吸取对照品溶液,按f述色谱条什连续进仟5次,记 录峰面积.结果,RSD一0.467/~,,表明仪器精密发良好.. 3.7重现性试验 分别取同--4tL样6份,依法处,_-!i!lJ定其含蛙,结果,样 品平均含量为40.8mg?g,RSD=1.26%,衷明万法再现性 良好. 3.8稳定性试验 精密吸取供试品溶液,分别在0,2,4,6,12h按上述色谱 条件进样,测定峰面积j结果,RSD一1.02%,表明供试品溶液 在12h内稳定性良好 3.9加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批样品6份,每份约0.2g,分别 精密加入水飞蓟宾对旦{{品20mg,按”3.2”项厅法制备供试 品溶液,依法处理,测定其含量,计算加样回收率,结果见表l. 表1加样回收率试验结果(=6) Tab1Resultofrecoverytests(6) 3.10样品含量测定 分别取6批样品适量,精密称取0.4g,置f烧瓶中,加入 2OmL甲醇,精密称定,回流提取60min,精密称定,加甲醇补 足损耗的重量,过滤,精密量取续滤液5mL,置f25mL容量 瓶中,加醇定容,以水蓟宾和异水飞蓟宾双峰之和按外标 法计算样品含量.结果,3批样品含量(标永鞋)分别为40.8, 41.5,38.1mg?g1 4讨论 4.1提取溶剂的选择 原剂型质量标准中设有一项理化鉴别和一项五味子的 TLC鉴别,本研究仅保留了味子的鉴别,并将提取溶剂由氯 仿改为甲醇,取得满意的效果. 4.2提取方法的选择 由于水蓟宾在热溶剂巾溶解性较好,因此选用同流法作 为提取方法.经过试验,同流60min即能满足试验要求 4.3展开剂的选择 在水飞蓟宾的TLC鉴别研究过程中,分别试用r氯仿 醋酸乙酯甲醇…水(30:40:20:10),氯仿丙酮一水(5: 3:0.5),丙酮,甲醇(3:1),氯仿醋酸乙酯(1:1)等展开系 统,结果表明,氯仿醋酸乙酯甲醇水(30:40:20: 10)的Rf值较合适,效果较好,因此纳入正文 4.4流动相的选择 水飞蓟宾含有一对非对映体,在包谱图中表现为双峰, 故在研究过程中还选Hj了甲醇水(45:55),甲醇乙腈 0.05mo[.I磷酸盐缓冲液(29:20:51)等流动卡目结果表 明,以甲醇一水0.1%磷酸二氧钾溶液(10:10:3,用磷酸调 pH4)作为流动相,水蓟宾和异水蓟寅的分离效果,峰肜均 为最佳,冈此最终采纳其为本研究含量测定的流动相 参考文献 【1】国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)【S】.2005 年版.北京:化学T业出版社,2005:附求31. [2】谢景文,李茂晕.新新肝康片的质量标准研究[J】.中国 药房,2000,11(3):116. 【3】林海,肖艳萍,黄云,等.复方月t皎囊中水飞蓟 宾的含量测定研究【J】.湖南中医杂志,2004,20(3):72. (收稿臼期:20080310修州}1期:20080611) 中同药房2008年第l9卷第2l期