卵巢上皮性癌患者血清TK1浓度的检测及临床意义

卵巢上皮性癌患者血清TK1浓度的检测及临床意义 【摘要】 目的 观察卵巢癌患者血清细胞质胸苷激酶(TK1)浓度的变化，初步探讨其 临床意义。 免疫印迹增强发光法检测30例卵巢良性上皮性肿瘤、75例卵巢上皮性癌、 40名健康妇女血清TK1浓度。结果 41.33%(31/75)宫颈癌患者患者血清TK1为阳性，平均浓 度为(2.99?1.09) pM，显著高于卵巢良性肿瘤组或健康对照组(,,P,<,0.05);宫颈癌 患者TK1浓度随临床分期的进展而增高，?-?患者的血清浓度出率高于?、?期患者，差异 有统计学意义(,P,<0.05);术后宫颈癌患者血清TK1浓度为(1.09?0.31) pM，与术前相 比显著降低(,P,<0.05)。结,论 ,血清TK1浓度对宫颈癌患者的诊断、预后及疗效的评 价具有潜在的应用价值。, 【关键词】 卵巢癌; 细胞质胸苷激酶; 临床意义,, Study on patients with ovarian epithelial carcinoma and serum TK1 concentration detection and its clinical significance ,ZHOU Huan,CHEN Min,FAN Li,et al.The 4th People,s Hospital of Wuxi City,Wuxi 215006,China,, 【Abstract】 Objective To study the concentration and clinical significance of Cytosolic Thymidine Kinase (TK1) in patients with ovarian cancer.Methods A chemiluminescent dot blot assay was employed to determine the serum concentration of TK1 in healthy women,patients with benign ovarian tumor,or epithelial ovarian carcinoma.Results The serum concentration of TK1 in patients with ovarian cancer was (2.99?1.09) pM which was significantly higher than that in patients with benign ovarian tumor or health donors(,P,<0.05).The serum concentration of TK1 in patients with epithelial ovarian carcinoma increased with advance of the clinical stages.The concentration in ?- ? patients was significant higher than that in ?,?patients(,P,<0.05).Furthermore,the serum concentration of TK1 in patients was significantly decreased to (1.09?0.31) pM after surgical resection.Conclusion There was potentially clinical application value of Cytosolic Thymidine Kinase for diagnosis，prognosis and evaluation or curative effecting for epithelial ovarian carcinoma., 【Key words】 Cytosolic Thymidine Kinase; Ovarian Cancer; Clinical significance ,, 卵巢上皮性癌是妇科恶性肿瘤中病死率最高的肿瘤，其5年生存率大约为39%,,,1,,。虽然包括肿瘤细胞减灭术以及随后系统的紫杉醇加铂类化疗的标准治疗已经部分改善了患者的生存时间,,,2,,，但美国癌症协会2006年美国恶性肿瘤发病率、死亡率的数据明，目前为止卵巢上皮性癌的死亡率仍远远超过其他任何一种妇科生殖系统恶性肿瘤。胸苷激酶(TK)是DNA合成的关键酶，与细胞的增殖、分裂密切相关，细胞内胸苷激酶浓度在细胞周期中呈周期性变化。TK1在多种恶性肿瘤中异常升高，并且血清中TK1浓度可作为肿瘤恶性程度、复发或预后的指标。本研究通过免疫印迹增强发光检测了卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤、卵巢上皮性癌及健康妇女血清TK1浓度，并对其临床意义进行了初步探讨。, 1 资料与方法, 1.1 一般资料 选择2007年12月~2011年5月期间无锡市第四人民医院收治、经病理检查确诊的30例卵巢良性上皮性肿瘤(浆液性囊腺瘤9例、黏液性囊腺瘤21例)，75例卵巢上皮性癌(浆液性囊腺癌60例、黏液性囊腺癌15例)患者为研究对象。健康对照组(40例)为同期经无锡市第四人民医院健康体检中心体检的健康女性。卵巢癌患者年龄45~74岁，平均 (57.1?12.9)岁，;非卵巢癌患者年龄45~77岁，平均(53.6?10.8)岁。卵巢上皮性癌患者均为首发病例，术前 3个月内均未应用任何激素类药物治疗，未行化疗或放疗。手术病理分期按国际妇产科联盟(FIGO)2000年标准:?期 11例，?期14例，?期41例，?期9例。高分化18例，中分化15例，低分化42例。, 1.2 主要试剂、仪器 血清TK1检测试剂盒、TK1标准品及CIS-1型化学发光成像系统均购自深圳华瑞(深圳华瑞同康，深圳)。, 1.3 标本收集及处理 卵巢患者分别于手术前、术后一周采集外周血。患者或健康对照组清晨空腹采集静脉血2 ml，2 h内分离血清，分装于Eppendorf管中，-80 ?冰箱冻存，备用。, 1.4 血清TK1测定 TK1浓度测定参照试剂盒说明书，简要如下。冰冻血清于37 ?水浴箱充分溶解，将3 μl的血清标本或标准品点样于硝酸纤维素膜上(Hyband-C，购于Amersham公司)，10%小牛血清封闭30 min后，加入抗-TK1 IgY抗体(华瑞同康，深圳，中国)，并孵育2 h;洗涤后加生物素化的二抗并在常温下孵育40 min;接着将膜浸泡于含链菌亲和素-辣根过氧化酶的TBS缓冲液反应1 h;洗涤后再加入ECL发光试剂;斑点的强度采用CIS-1型化学发光成像分析系统检测。, 1.5 统计学处理 采用SPSS统计软件分析，两组间差异采用,t,检验，两组以上采用方差分析。以,P,<0.05为差异有统计学意义。, 2 结果, 2.1 卵巢上皮性癌患者与良性患者、正常人血清TK1浓度的比较 对75例卵巢上皮性癌患者、30例卵巢良性患者及40名健康妇女血清测定发现，41.33%(31/75)宫颈癌患者血清TK1高于参考值(2 pM)，平均浓度为(2.99?1.09) pM，显著高于其他两组(,P,<0.05)。良性肿瘤组或健康对照组血清TK1浓度分别为(0.46?0.13) pM、(0.40?0.10) pM，两组间无显著差异(,P,>0.05)。见表1。, 2.2 卵巢上皮性癌患者手术前后血清TK1浓度的比较 分别测定卵巢上皮性癌患者术前、术后1周血清TK1浓度，结果显示，术后1周患者平均TK1浓度为(1.01?0.29) pM，与术前(2.99?1.09) pM比较差异具有统计学意义(,P,<0.05)。见表1。, 2.3 卵巢上皮性癌不同分期血清TK1浓度的比较 对不同分期的宫颈癌患者血清TK1浓度分别统计发现，卵巢上皮性癌?期、?期、?~?期患者TK1浓度分别为(0.84?0.26) pM、 (3.62?1.34) pM，三组间比较，差异均有统计学意义(,P,<0.05)。见(2.41?0.62) pM、 表2。, 3 讨论, 卵巢上皮性癌是妇科恶性肿瘤中病死率最高的肿瘤，虽然治疗不断改进，但疗效仍不甚理想。合理使用肿瘤标记物对卵巢癌的早期诊断、早期治疗，预后和转归及治疗疗效的监测等方面具有重要临床意义。胸苷激酶(TK)是DNA合成的关键酶，存在细胞质胸苷激酶(TK1)、线粒体胸苷激酶(TK2)两种同工酶。其中TK1与细胞的增殖、分裂密切相关，肿瘤组织中或患者外周血中TK1浓度不但反映了消化道肺癌,,,3,,、肿瘤,,,4,,、膀胱癌,,,5,,、乳腺癌,,,6,,等多种肿瘤生长、增值的程度，而且作为肿瘤复发或者疗效评估的重要指标备受关注。, 本研究分别检测了75例卵巢上皮性癌患者、30例卵巢良性患者及40名健康妇女血清TK1浓度。结果显示41.33%(31/75)宫颈癌患者血清TK1高于参考值2 pM，平均浓度为(2.99?1.09) pM，显著高于良性病变或正常对照组(,P,<0.05)。良性肿瘤组与健康对照组血清TK1浓度无显著差异(,P,>0.05)。统计卵巢上皮性癌?期、?期、?~?期患血清TK1浓度发现，三组间均有显著性差异(,P,<0.05)，浓度分别为(0.84?0.26) pM、(2.41?0.62) pM、(3.62?1.34) pM。分别测定卵巢上皮性癌患者术前、术后一周血清TK1浓度，结果显示，术后一周患者平均TK1浓度为(1.01?0.29) pM，与术前(2.99?1.09) pM比较，差异有统计学意义(,P,<0.05)。, 总之，本试验通过对卵巢良、恶性病变患者、不同分期卵巢上皮性癌患以及卵巢癌患者术前、术后血清TK1浓度的比较分析，提示血清TK1浓度的检测对卵巢上皮性癌的诊断、疗 效观察具有潜在的应用价值。, 参 考 文 献, ,1, Jemal A,Murray T,Samuels A,et al.Cancer statistics.CA Cancer J Clin,2003,53:5-26., ,2, Ozols RF,Bundy BN,Greer BE,et al.Phase ? trial of carboplatin and paclitaxel compared with cisplatin and paclitaxel in patients with optimally resected stage ? ovarian cancer:a Gynecologic Oncology Group study.J Clin Oncol,2003,21:3194-3200., ,3, Li HX,Zhang S,Lei DS,et al.Serum thymidine kinase 1 is a prognostic and monitoring factor in patients with non-small cell lung cancer.Oncol Rep,2005,13:145-149., ,4, Zou L,Zhang PG,Zou S,et al.The half-life of thymidine kinase 1 in serum measured by ECL dot blot:a potential marker for monitoring the response to surgery of patients with gastric cancer.Int J Biol Marker,2002,17:135-140., ,5, Zhang J,Jia Q,Zou S,et al.Thymidine kinase 1: a proliferation marker for determining prognosis and monitoring the surgical outcome of primary bladder carcinoma patients.Oncol Rep,2006,15:,455-,461., ,6, He Q,Zou L,Zhang PA,et al.The clinical significance of thymidine kinase 1 measurement in serum of breast cancer patients using anti-TK 1 antibody.Int J Biol Marker,2000,15:139-146., (收稿日期:2011-07-29), (本文编辑:郎威)