分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量[整理版]

分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量[整理版] 分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量 (湖北中医药大学药学院 药学(2)班 ) 一、实验综述 摘要:以邻二氮菲为显色剂用分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量。研究明，在pH=2,9的溶液中，铁(?)可用盐酸羟胺还原至铁(?)，生成的铁(?)与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，，其最大吸收波长为506nm,铁浓度在0.31~16.00mg/L范围内与溶液吸收光度呈良好的线性关系，线性回归方程为A= ________________________ 相关系数r=______，检出限为_______ mg/L，相对差RSD=_____，表观摩尔吸收系数=, -1-1,___________L(molcm) 关键词:邻二氮菲;分光光度法;铁 铁元素是人体内重要的元素之一。人体缺铁容易导致一些贫血症状甚至一些疾病，所以适当补铁对人体健康有着非常重要的意义。如果人体缺铁，可影响血红蛋白、肌红蛋白的合成，使某些酶的活性降低，引起人体生理上的变化，从而导致免疫力降低，智力降低和机体抵抗力下降等引起的各种疾病的产生。测定新血宝胶囊中的铁含量对于人体的健康有着十分重要的意义。测定铁的含量由很多方法。本文采用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量，该法具有操作简单、灵敏度高等特点，结果令人满意。 二、实验目的 1.了解分光光度法侧铁的选择 2.熟悉显色反应条件与测量条件的选择方法 3.熟悉实验的基本内容与方法 4.掌握分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量 三、实验原理 2+ 2+ 亚铁离子与邻二氮菲反应生成橘红色络合物，其反应式为: 3Fe+ NNNN 3 Fe3 橘 红色 邻二氮菲 max , 四、实验仪器和试剂 仪器: 721(722)分光光度计、50ml容量瓶、刻度吸管(1ml、5ml)，pH精密试纸。 2+ 实验试剂:铁标准储备液(Fe=100.0 μg/ml). 0.15%邻二氮菲水溶液(显色剂). 10%盐酸羟胺溶液(还原剂) 醋酸缓冲溶液. 3mol/ml HCl. 1mol/ml NaOH. 五、实验设计 (一)测定波长的选择: 在50m L容量瓶中，准确加入0(40m L 铁标准溶液( I ) ，分别加入1 m L 10 ,盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2m i n后，再加入2m L 0(15,邻二氮菲溶液、5 m L1(0m o l ,L醋钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。用l c m 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，在不同波长( 从440一560nm ) 下测定一次吸光度。绘制吸收曲线。 表1 λ/nm 440 450 460 470 480 490 492 494 A λ/nm 496 498 500 502 504 506 508 510 A λ/nm 520 530 540 550 560 A 绘制A—λ曲线 A λ/nm 图1 由图1可以看出，随着波长的增加，吸光度值逐渐增加，在____nm处有最大吸收，此后随着波长的增加，吸光度值降低。因此选择_____nm为最佳吸收波长。 (二)邻二氮菲的用量对吸光度的影响 取6个50 m L 容量瓶，各加1 0- 3m ol ,L 标准铁溶液2 m L 及1 m L 10,N H 20H ?H C I 溶液，摇匀，放置2m i n后，再分别加入0(10 m L、0 (30 m L、0 (50 m L、1(0 m L、2 (0 m L 及4 (0 m LO (15,邻二氮菲溶液，和5 m L l m ol ,L C H 3C O O N a 溶液，以去离子水稀释至标线，摇匀。在722型分光光度计上用l c m 吸收池，在选定的波长_____nm ，测定溶液的吸光度( A ) 。绘制吸光度一显色剂用量曲线。 表2 邻二氮菲用量的不同对吸光度的影响 0.10 0.30 0.50 1.0 2.0 4.0 V 邻二氮菲 A 根据实验数据绘制A—V曲线 A λ/nm 图2 根据表2和图2可知邻二氮菲的用量在1.0, —4.0范围时，溶液的吸光度最大且恒定不变，故选2.0m L作为其最佳用量。 (三)显色反应的时间 取一个50 m L 容量瓶，加入2m L 10 qm o l ,L标准铁溶液，及l m L 10,N H 20H ?H C I 溶液，摇匀放置2m i n后，再加2 m L 0(1 5,邻二氮菲溶液，5 m L1.0mol/L 醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长____nm 下，用l c m 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，测定吸光度(以后每隔半小时再测定一次。 表3 不同显色时间对溶液吸光度的影响 时间 0h 0.5h 1h 1.5h 2.0h 2.5h 3.0h 3.5h 4.0h A 根据实验数据绘制A—t 曲线 A t/h 图3 根据实验结果，为了实现快速并且准确分析，本实验选择室温下最佳测定时间为显色后______h。 (四)溶液pH的选择 取6 个50m L 容量瓶，每个加入2 m L 10- 3mol/L标准铁溶液，及l m L 10,N H :O H ?H C I 溶液，摇匀放置2r a i n后，再加2 m L 0(15,邻二氮菲溶液，摇匀。分别从滴定管中加入10 m L 、12 m L 、14 m L、16m L、18 m L、20 m L 0(1m o l ,L N a O H 溶液，以去离子水稀释至标线，摇匀。在选定波长____nm 下，用1c m 吸收池。以去离子水为空白，测定各溶液的吸光。 表4 不同酸度对吸光度的影响 V/mL 10 12 14 16 18 20 A pH 根据实验数据绘制A—pH曲线 A pH 图4 由图4中可知，在pH 值为___________范围内吸光度最大并基本恒定，故本实验取pH 为_________作为最佳显色pH 。所以我们就可以得出加入____________m ol ,LN aO H 溶液时为最适宜用量。 (五)标准曲线的绘制 取5个50m L容量瓶，用刻度移液管分别加入0(00 m L 、0(40 m L、0 (80 1(20 m L、1 (60 m L 、1(80 m L ( I I ) 标准铁溶液注<3 >( 含铁100 ug,m L) 。m L 、 在分别加入1m L 10,N H 20 H ?H C l 溶液，摇匀放置2m i n后，再加2 m L 0(15,邻二氮菲溶液，5 m L 1 (0m o l ,L 醋酸钠溶液，以去离子水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长______nm 下，用l c m 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，测定各溶液吸光度。以含铁量为横坐标，相应吸光度为纵坐标，绘制出工作曲线。 表5 标准曲线 V/mL 0.40 0.80 1.2 1.60 1.80 A 由标准铁溶液( I I ) 在波长______nm 处测定吸光度，做标准曲线。数据见表5 和图5，其线性较好。回归方程为:A =_______________________，r =_______。 根据实验数据，以含铁量为横坐标，相应吸光度为纵坐标，绘制曲线 A C/ug/L 用移液管量取20mL新血宝样品溶液于5 0 m L容量瓶中，加入l m L 10,N H :O H ?H C l 溶液，摇匀放置2min后，再加2 m L0(15,邻二氮菲溶液，5m L 1(0m o l ,L 醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长______nm 下，用l cm 吸收池，去离子水为空白溶液作参比溶液，放置_____h后，测邻二氮菲的用量，图4不同显色时间对溶液吸光度的影响定吸光度。测得吸光度为A =________，由回归方程为:A=___________________________ ，得C = _____ug/m L，则自来水中铁的含量_____ug/m L: 六、实验结论: 本实验的最佳实验条件是: ?最大吸收波长为_____nm ， ?显色剂最佳用量为______m L ; ?选择在室温下_____h为最佳时间。 最适宜的pH值范围为__________; ? [参考文献] [1]胡小明，潘自红 分光光度法测定发样中的微量铁[J] 广州化工 2012,40(6):166~167 [2]李建雄 自来水中铁含量测定的实验研究[J] 内蒙古石油化工 2011，6:5~6 [3]李咏梅，施鹏飞，李人宇 双波长分光光度法测定饲料中铁的含量[J] 中国饲料 2012，23:33,34