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金刚鹦鹉多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

2017-09-27 5页 doc 17KB 22阅读

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金刚鹦鹉多杀性巴氏杆菌的分离鉴定金刚鹦鹉多杀性巴氏杆菌的分离鉴定 ChineseJournalofVeterinaryMedicine中国兽医杂志2012年(第48卷)第1期73 30.0,冰片10.0,滑石粉30.0,共研细末),尽量将药 末填入患部的沟缝内,并盖过创面2,3mm厚,然后 覆以灭菌纱布,装钉铁板蹄铁,并塞紧铁板与蹄叉的 空隙.每隔2,3d换药1次,见病情好转后,可适当 延长换药时间,待全部形成正常角质时,即可停药. 对较重的病例,用手术疗法效果较好,并可缩短 疗程. 首先对蹄形进行修整,按蹄形做好铁板蹄铁,准 备好手术用的蹄铲,手术刀...
金刚鹦鹉多杀性巴氏杆菌的分离鉴定
金刚鹦鹉多杀性巴氏杆菌的分离鉴定 ChineseJournalofVeterinaryMedicine中国兽医杂志2012年(第48卷)第1期73 30.0,冰片10.0,滑石粉30.0,共研细末),尽量将药 末填入患部的沟缝内,并盖过创面2,3mm厚,然后 覆以灭菌纱布,装钉铁板蹄铁,并塞紧铁板与蹄叉的 空隙.每隔2,3d换药1次,见病情好转后,可适当 延长换药时间,待全部形成正常角质时,即可停药. 对较重的病例,用手术疗法效果较好,并可缩短 疗程. 首先对蹄形进行修整,按蹄形做好铁板蹄铁,准 备好手术用的蹄铲,手术刀,手术剪,止血带等物品. 然后将患畜在二柱栏内站立保定,系好吊绳围绳, 提举固定患蹄,剪除部分距毛,对患蹄部清洗,消毒. 于掌(跖)部施行神经传导麻醉,用保定宁注射液3 mL作皮下注射.以保证手术的顺利进行,于掌 (跖)中部结扎止血带. 手术方法是:用双刃刮削刀或柳叶刀,对病变组 织全部切除,有时尚需切除部分皮下组织,如在蹄底 部蹄骨露出时,亦应用锐匙将骨面刮净,直达健康组 织为止.最后撒布较厚的碘仿磺胺粉或5:1的磺 胺水杨酸合剂,垫以灭菌纱布块,装钉铁板蹄铁.装 钉铁板蹄铁后,一定要将铁板蹄铁与蹄底,蹄叉之间 的空隙用纱布条或麻丝填满塞紧,并灌注少量松馏 油,以达到压迫止血和防止污染的目的.术后解除 止血带.系于清洁,干燥处.经5,7d换药1次, 换药时若发现仍有生长不良的赘生肉芽,要用锐匙 刮掉,经敷药后,再继续按上法装订铁板蹄铁.一般 经5,6周新角质即可形成.此时可进行轻度使役, 跛行完全消失后即可进行正常使役. 马厩,系马场地面保持清洁,平坦,干燥.15, 2Od换药处理1次,除去腐烂组织,处理时注意保 护新生组织.作适当牵蹈运动,促进角质生长. 4典型病例 深圳赛马会365号赛马,两后蹄患蹄叉真皮疣 状增生,以上述手术方法治疗,术后26d换药处理 时,跛行减轻,蹄踵腐烂停止,创面干燥.术后48d 第2次换药时,跛行消失,两后蹄蹄踵空洞基本长 平,角质呈灰白色,又护理32d两患蹄痊愈. 金刚鹦鹉多杀性 巴氏杆菌的分离鉴定 贺青梅,张红见,文英 (1.青海省天峻县动物疫病控制中心,青海天峻817200; 2.青海大学农牧学院,青海西宁810003) 2009年5月底,青藏高原野生动物园送检病死 金刚鹦鹉1只.金刚鹦鹉属大型攀禽,为国家级保 护动物.通过询问饲养员了解其临床症状为:发病 病程短,发病急,鼻流褐色分泌物,继而突然倒地,抽 搐而死亡.剖检观察病理变化:口腔,气管内有较多 黏液,整个右侧肺发黑,微肿,肝脏微肿,有点状出 血,心冠脂肪有散在出血点,其他脏器病变不明显. 笔者对病死金刚鹦鹉病料进行了病原的分离鉴定, 分离出1株多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultoci— n,PM),暂命名为金刚鹦鹉株,报告如下. 1材料与方法 1.1病料无菌采取病死金刚鹦鹉心,肝,脾,肺, 肾等脏器,置4?冰箱待检. 1.2培养基鲜血琼脂平板,血清琼脂平板由青海 大学农牧学院预防实验室自制;5犊牛血清肉汤, 购自北京燕生政博生物技术有限责任公司,批号: 081102;MH培养基,购自北京奥博星生物技术责任 有限公司,批号:0081206;各种生化培养基购自北京 路桥生物技术有限责任公司,批号:080606. 1.3实验动物健康昆明系小鼠4只(16,20g), 购于青海省地方病研究所. 1.4药敏纸片购自北京天坛药物生物技术开发 公司,批号:0903ll. 1.5病料制片染色镜检将病料进行触片,分别革 兰,瑞特染色,镜检. 1.6分离培养将病料无菌接种于5犊牛血清 营养肉汤,血清琼脂平板,血液琼脂平板,37?培养 18~24h,尔后进行纯化培养. 1.7生化试验用灭菌接种环勾取少许纯培养物 接种于各种生化培养基中,37?培养18,24h后 观察结果. 1.8动物试验将纯培养物制成菌悬液注射小鼠 4只,0.2mI/只.另取小鼠2只,腹腔注射0.1mL 生理盐水(对照). 1.9药敏试验参照美国临床实验室标准化委员 会(NCCLS)推荐的操作程序进行.同时用大肠杆 菌ATCC25922作为质控菌株.以NCCLS的标准 判断耐药(R),敏感(S)及中介(I)判定结果.用灭 菌生理盐水将纯化好的培养物洗下,稀释后与麦氏 比浊管对比后,选取3×10个活菌/mL量的浓度. 用灭菌棉拭子蘸取菌液均匀涂布到整个MH培养 基上,经温箱干燥3,5min后贴上各种药敏纸片, 每块贴3种,37?倒置培养18~24h后判定结果. 2结果 2.1触片染色镜检革兰染色镜检见革兰阴性,散 在的小杆菌;瑞氏染色见到大量两极浓染的蓝色小 杆菌. 74中国兽医杂志2012年(第48卷)第1期ChineseJournalofVeterinaryMedicine 2.2菌落形态及培养特性血清肉汤培养24h轻 度浑浊,连续培养4,6d,有菌膜产生,液体清朗,管 底有黏稠液体;在鲜血琼脂平板上形成灰白色,圆 形,微隆起,半透明,湿润,表面光滑,边缘整齐露珠 样的小菌落,不溶血. 2.3生化试验将纯培养物接种各种生化培养基, 37?培养24~48h,结果见表1. 表1金刚鹦鹉株巴氏杆菌生化试验结果 +:阴性;一:阴性 从表1可以看出,金刚鹦鹉株发酵葡萄糖,乳 糖,甘露醇,蔗糖,鼠李糖,棉子糖,阿拉伯糖,蕈糖产 酸,不分解麦芽糖,木糖,卫矛醇,山梨醇,肌醇;水杨 苷阳性;M.R.阳性,V_P阴性;吲哚阳性;明胶液化 阳性;鸟氨酸脱羧酶阴性;硫化氢阴性;能利用枸橼 酸盐;硝酸盐还原试验阳性;无运动力,氧化酶阴性; 尿素酶阴性. 2.4动物试验试验组4只小鼠在24h内均死 亡,从小鼠体内脏器中分离到与注射菌株一致的革 兰阴性小杆菌,对照组小鼠未死亡. 2.5药敏试验结果见表2. 3结语与讨论 3.1结语根据实验室分离鉴定,确定为禽多杀性 巴氏杆菌. 3.2讨论此次发病是由于青藏高原野生动物园 2009年4月乔迁新址,此时正处于冬春交替之际, 珍禽应激造成机体抵抗力下降,而巴氏杆菌为条件 性致病菌,当机体抵抗力下降后,病原菌侵入机体, 发生内源性感染.因此,加强预防对于疾病的防控 尤其重要.除发病后要迅速隔离,严格消毒,以防病 原扩散外,平时应做好饲养管理工作,避免珍禽受 寒,减少应激,保持圈舍清洁并作好消毒工作,接种 疫苗,以减少本病的发生. 从生化试验看,分离的PM能发酵乳糖,鼠李糖 产酸,卫矛醇,HS阴性,水杨苷阳性,这与有些报 道不符.其主要原因是:PM有不同的血清型,不同 血清型的生化差异很大,即使是同一血清型不同分 离株的生化反应也不尽相同.本次分离到的PM为 何种血清型,尚需进一步的鉴定. 根据药敏试验结果可见,此巴氏杆菌对所测试 的药物敏感率为88.1,这与青藏高原野生动物园 的珍禽未滥用抗生素,细菌未对大部分抗生素产生 耐药性有关.菌株对所测试的喹诺酮类抗菌药,磺 胺类抗菌药敏感;对大部分头孢菌素类抗生素,氯霉 素,万古霉素,磷霉素和阿奇霉素等敏感;而对大部 分青霉素类抗生素,红霉素,克林霉素,利福平等耐 药.此结果可为以后的珍禽防治提供参考. 表2金刚鹦鹉株巴氏杆菌药敏试验结果 ;S:敏感;I:中介 R:耐药 **:抗生素种类为环丙沙星(CIP),罗美沙星(LMF),左氧氟沙星 (LVF),氧氟沙星(OFh)氟罗沙星(FLE),依诺沙星(ENO),哌拉西林(PIP), 美洛西林(MEZ)阿奠西林(AMX),羧苄西林(CB),氨苄西林(AM),头孢美 唑(CMZ),头孢唑肟(CTZ),头孢曲松(CRO),头孢哌酮(CFP),头孢他美 (CTM),头孢他啶(CAZ),头孢呋辛钠(CXM),头孢吡肟(FEP),头孢克罗 (CEC),头孢唑啉(cZ),对头孢噻肟(CTX),头孢拉定(CED),磺胺(SMX),复 方新诺明(SXT),妥布霉素(TM),链霉素(s30O)链霉素(S1o),庆大霉素 (GMlO),卡那霉素(K),四环素(TE),多西环素(D0),克林霉素(cM),红霉 素(E),氯霉素(c),阿奇霉素(AZI),磷霉素(FOS),阿米卡星(AN),万古霉 素(vA),奈替米星(NET),呋喃妥因(FT),利福平(RA)
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