观察鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响

观察鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响 观察鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)对小鼠单核 吞噬细胞吞噬功能的影响 临床研究中国保健杂志ChineseHealthCare 观察鸡卵黄免疫球蛋白(IgY) 对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响 中图分类号:R318.5 付柏绿 (深圳市宝安区中医院,广东深圳518133) 文献标识码:A文章编号:1005—2720(2006)01—0048—02 【摘要】目的:观察鸡蛋卵黄免疫球蛋白IgY对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响.方法:用鸡卵黄免疫球蛋白IgY经口灌胃,观察小 鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力.结果: 鸡卵黄免疫球蛋白IgY具有提高小鼠单核吞噬细胞 碳粒廓清率及增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力.结论:鸡卵黄免疫球蛋白IgY能提高小鼠单核吞噬细胞吞噬功能,具有 增强小鼠免疫功能的作用. 【关键词】鸡卵黄免疫球蛋白;吞噬细胞;免疫功能;调节作用 小鼠肝,脾血管内固定的吞噬细胞能吞噬碳粒,如静脉注入 碳粒,吞噬细胞可将碳粒从血流巾除去,从定量静脉注入墨汁起 计时,间隔一定时问取静脉血.测定血中碳粒浓度.根据血流中 碳粒被廓清速度,可明单核吞噬细胞的功能.巨噬细胞是一类 参与免疫反应的细胞,在调节淋巴细胞和免疫应答上起着重要作 用.当外来生物大分子或有害异物进入机体时,巨噬细胞就会向 异物存在处集结,进行吞噬活动,吞噬后形成吞噬泡,在细胞内与 初级溶酶体结合,将吞噬物消化分解,发挥细胞免疫作用.根据碳 粒的廓清率及吞噬百分率反映单核吞噬细胞吞噬功能的变化,从 而可以反映免疫功能的增强与否.本实验通过用鸡卵黄免疫球 蛋白IgY灌胃,测定小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率和小鼠腹腔巨 噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬百分率,方法和结果如下: 1资料与方法 1.1一般资料 1.1.1动物:健康昆明种小鼠40只(由广东省实验动物中心提 供),体质量(20?2)g,雌雄各半. 1.1.2试药:印度墨汁(北京中西化工厂生产),用生理盐水稀释 5倍(实验临用前配制),使用时反复摇匀,使全部碳粒均匀散于液 体中.0.1%碳酸钠溶液(临用前配制). 1.1.3仪器:微量取血器(烟台黎明医用器材厂);721型分光光 度计(上海光谱仪器厂);PA1104型电子天平(卜海天平仪器厂); 秒表;Nikon光学显微镜. 1.1.40.3%台盼蓝淀粉肉汤:牛肉膏0.3g,蛋白胨1g,NaCL0. 5台盼蓝0.3g,可溶性淀粉6.0g,加蒸馏水至100ml,高压灭菌, 置冰箱保存备用. 1.1.5鸡红细胞悬液:用肝素抗凝从鸡翼取静脉血置于Alserver 保存液中,用PBS液调整鸡红细胞数为5,6×10个/ml,置冰箱 保存备用. 1.1.6鸡卵黄免疫球篮白(IgY):广东药学院药物研究室研制, 质最浓度10mg/ml. 1.2方法 1.2.1碳粒廓清试验 ? 48? 取体质量约(20?2)g的健康昆明小鼠l0只,雌雄各半,随机 分成两组,第一组为对照组,每只小鼠经口灌胃灭菌生理盐水 lml;第二组为实验组,每只小鼠灌胃鸡卵黄免疫球蛋白IgY1ml, 连续7d.第8大,2组小鼠均尾静脉注射印度黑汁(按l:5稀释), 剂量0.2ml/20g体霞,立即计时.注射后1min,l0min用微量取血 器分别从眼眶内呲静脉丛准确取I札20ul. 将取得的血液加到2ml的0.1%碳酸钠注射液中(盛于比色 管中).用721型分光光度计,在650nm波长处测定光密度(OD) 值,取0.1%碳酸钠溶液校正零点.取『f?完毕,用颈椎脱臼法处死 小鼠.剖开小鼠腹腔,取其H十脏,脾脏,用滤纸吸脏器血污,称 重,按下式计算廓清指数K和吞噬指数_3j: 廓清指数K=(1gOD1一lgOD2)/(t2一t1) 吞噬指数a:3×k×w×(w1.S)(W:体蕈w1.S:肝重+脾 重) 所有数据用?s表示,各组问差异显着用t检验,P<0. 05表示差异有着性. 1.2.2鸡蛋黄免疫球蛋白(]gY)对小鼠L三噬细胞吞噬鸡红蛋细 胞功能的影响:取体质量约(20?2)g的健康昆明小鼠l0只,雌雄 各,,随机分成两组,第一组为正常对照组,给f常饲料和饮水, 连续7d.第二组为实验组,给小鼠经口灌胃鸡卵黄免疫球蛋白 IgYlml,连续7d.第8天后二组均给予正常饲料和饮水,且给小 鼠腹腔注射0.3%台盼蓝淀粉肉汤1ml,每天1次,连续2d,第1O 天,2组小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液1ml,注射后轻揉小鼠腹部,使 鸡红细胞分散均匀.25min后,用颈椎脱门法处死小鼠.剖开小 鼠腹腔,用小带'头的沣射器吸取腹腔液,进行涂片,自然凉干后, 用甲醇固定20min,用吉姆萨染液染色l5rain,晾:r后在高倍镜下 观察计数.结果见表2. 2结果 2.1碳粒廓清率试验:碳粒廓清试验结见表1.从表1可见, IgY组与正常对照组比较,其廓清率指数差异有着性. 2.2鸡卵黄免疫球蛋白IgY刈-/J,鼠乒吞噬细胞吞噬鸡红细胞功 能的影响.鸡卵黄免疫球蛋白IgY对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细 2006年第l4卷第2期 中国保健杂志ChineseHealthCare 胞功能结果见表2.从表2可见,IgY组与正常对照组比较,其吞噬指数差异有显着性. 表1鸡卵黄免疫球蛋白IgY对小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清试验的影响 临床研究 组别吞有鸡红细胞的巨噬细胞数巨噬细胞数内吞噬的鸡红细胞数吞噬百分率/%吞噬指数 与对照组比较:*P<0.01 3讨论【参考文献】 单核巨噬细胞系统被激活,需要持续每天给药1至数次,连续[1]沈玉清.免疫学与免疫检验学[M].北京:中国医药科技出版 数日.单核巨噬细胞系统一旦被激活,常伴有肝,脾等巨噬细胞的社,1989.138 增生,因而被激活的巨噬细胞可持续数日.在廓清试验中,印度墨[2]黄清松.HBV—STF对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的 汁的质量是实验结果准确的基础.单核巨噬细胞对于被吞噬的颗影响[J].广东药学院,1997,13(2):129 粒异物大小有严格的要求.颗粒过大则不被吞噬,过小则被其他[3]陈奇,邓文龙,张世玮.中药药理研究方法[M].北京:人民卫 吞噬细胞(如小吞噬细胞)所吞噬.IgY抗体安全环保,来源丰富,生出版社,2000.757 造价低,抗体含量高,热稳定性好[]又能增强免疫力,如应用于食[4]林元藻,黄清松,李春梅,等.抗加特纳杆茵卵黄免疫球蛋白 品添加剂,具有广阔的前景.(IgY)的研究[J].广东药学院,2004,20(5):517 , -,::,:I,-,-,-,::,:I,:I,:,-,-,:I,:I,:I,-,-,',:I,:I;,-,',',:?,',:I,:I,',',:},',:I,:?',:?,生,!I,生,!I,生,生,,,生,生,!I',,,自,生,,,!I,, 中图分类号:R595.4 氨茶碱中毒1例 张烨,张学霞,李学梅 (淄博矿业集团昆仑医院,山东淄博255129) 文献标识码:B文章编号:1005—2720(2006}01—0049一O1 1临床资料 患儿,男,6岁,住院号96051,体重26kg.因咳喘1周,长叹气, 腹疼,腹泻,胡言乱语1d入院.患儿1周前因支气管哮喘并感染, 在个体诊所静脉滴注氨茶碱4d后,咳喘加重,并出现长叹气,腹疼, 腹泻,烦燥小安,胡言乱语,多动.既往有支气管哮喘病史1年半. 查体:神志清,精神不振,舣肺呼吸音粗,闻及广泛哮呜音,双肺底闻 及小水泡音.心率142次/min,律齐,无杂音.腹软,上腹正中压 疼,肝脾不大.腹部彩超尤异常.钡餐尔胃炎表现.胸片示:双肺 小片状阴影.心肌酶谱:AST86U/L.LDH489U/LHBDH447U/L CK—M44U/L.心电图:部分导联sT段抬高.j大常规及肝功无 明垃异常.追问病史后得知:患儿家长因图方便,带医院处方去附 近个体诊所进行静脉输液,因个体诊所医生不懂氨茶碱的剂量和 儿童用药常规,误将70rag氨茶碱当成700mg(0.25/支,一次用近 3支),给予静脉滴注,并连用4d,当天晚上患儿出现上述症状,并 2006年第14卷第2期 逐渐加重,大便淋漓不断,睡眠不安.第2天入院后给予镇静,抗 炎,营养心肌,保护胃粘膜及思密达保留灌肠等对症支持治疗,住 院24d,治愈出院.门诊随防3个月各项检查均正常. 2讨论 氨茶碱为支气管扩张剂,在临床常用于支气管哮喘急性发作 的治疗,其作用机制为多环节松弛义气管平滑肌和抗炎作用,并 有强心.利尿的作用,但其副作用较大,在儿科临床用药中常不作 为首选.特别是儿童对本药较敏感,易敛惊厥,严重时叮造成心跳 骤停或猝死,应慎用.本患儿平时常静脉用此药治疗哮喘,故本人 认为可能对其敏感性降低,虽然对多个脏器造成损害,但未造成 严重的不良后果. 笔者在此提醒广大的同仁在家长带静脉用氨茶碱回家治疗 时,一定要谨慎,并提醒广大的患儿家长,切勿图便宜及方便到个 体诊所就医,以免后悔莫及. ? 49?