【doc】用顺行溃变法对大鼠脊髓小脑吻侧束投射的研究

【doc】用顺行溃变法对大鼠脊髓小脑吻侧束投射的研究 用顺行溃变法对大鼠脊髓小脑吻侧束投射 的研究 1993拒 第14卷第2期 首都医学院 Journal0fCapitalInstituteofMedicine Vo1.14No.2 1993 用顺行溃变法对大鼠脊髓小脑吻侧束投射的研究 /;.2_-2.,, 首都医学院解剖学教研室王达良徐群渊刘娜杨家鐾罗英瑾\ 提要:将12只成年大鼠一倔脊髓C一.段灰质行电损毁后用渍变法追踪脊髓小睹吻棚柬纤维在脊 髓,脑干内的走行及在小脑内的分布.结果显示,起源于颈膨大损毁部位的脊髓小脑吻侧柬的赍变纤维 上行于同倔脊髓外侧素中部,经过小脑上脚和下脚入小脑.纤维双侧分布于小脑前叶及后叶的?,?小 叶,其中以1,V小叶和?小叶最密桌.渍变纤维分布于以上叶片的白质及颗粒层,并以同侧(掼毁佣) 最为密桌.此外,在双侧小脑的顶棱和间位榜内也有溃变鲆维分布. 关键词脊髓小脑吻侧柬-小脑渍变法f1 分类号;R322.81 脊髓小脑吻侧束(rostralspimxerebe1. 1artract,RSCT)自发现"后,已引起了人 们的广泛注意,一般认为0],RSCT在功 能上与传导后肢感觉信息的脊髓小脑前束 (ventralspinocerehellartract,VScT)相应, 将前肢的本体感觉和外感觉传入小脑,在 小脑控制协调前肢运动方面有重要作用. 应用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪 技术分别对猴[,家犬"]松鼠猴],猫, 家兔进行的研究表明,这些动物的 RSCT主要起源于脊髓颈膨大(c,.)部灰 质后角V,?层及?层中央部的细胞. 应用麦芽凝集素结合辣根过氧化物酶 (WGA?HRP)顺行追踪技术[",镀银及 自显影技术"与连续溃变技术…对猫的 研究表明,RSCT在猫小脑内的末梢主要 分布于前叶和后叶的VI,?小叶.然而,由 于所用动物的局限,人们对RSCT在小脑 皮质的确切投射部位并未取得一致意 见对RSCT束梢是否止于小脑核也有 不同说法",对大鼠的RSCT投射则尚未 见报道.据此,本研究拟损毁大鼠脊髓颈膨 大灰质,以显示在脊髓脑干,小脑内的神经 纤维顺行性溃变,从而分析RScT在大鼠 收稿日期:1992年4月3日 小脑内的投射特点. 1材料和方法 用Wistar种系大鼠12只,雌雄不限, 术时体重24O,280g. 实验动物经水合氯醛(0.5g/kg体重) 腹腔麻醉后偏卧位固定在立体定位仅上. 切开项部皮肤,钝性分离肌肉,打开第5至 第7颈椎一侧椎板,撕开硬脊膜,暴露包有 软脊膜的c,段脊髓.对此以脊髓背动脉 为中心,旁开500m,垂直刺入电极,一般 取Cs一.中间水平,于距脊髓表面1475p.m 探处进行电损毁.损毁电极直径60~80 m,使用直流电,强度为4A×15s,术后 将创口缝合. 动物术后存活2,7d后,在同样麻醉 下灌注固定.即先用生理盐水150ml快速 冲洗,后注入10的中性福尔马林500 m】,灌注后立即取出颈段脊髓,脑干和小 脑,置于同样的固定液中(4?)固定4h,再 入含2O蔗糖的0.1mol/L的磷酸缓冲液 中<pH7.4),待组织块下沉后即取出切片. 固定好的组织用恒冷箱切片机(Leitz 1720)切片.脊髓做连续横切片.切片分3 ? 83? 组,分别进行NissI,VanGieson和Fink— Heimeri染色;脑干和小脑分别做矢状面 和额状面切片(做此两切面的动物各为6 只),隔3张取1张,用Fink—HeimerI染 色.各标本的切片厚度均为25ban.染色后 按常规脱水,透明,封片. 切片在光学显微镜(Olympus,BH一2) 下观察,井在绘图管下描绘.参照大鼠脑定 位图谱和Larse~对大鼠小脑形态结构描 述m].记录溃变纤维的形态,走行及 分布.同时,描记脊髓损毁部位,其长度根 据含损伤部位脊髓切片的数量和切片厚度 来确定,横向范围则根据Nissl染色,Van Giesson染色和Fink—HeimerI染色的结果 综合确定. 此外.将描绘下来的各小脑矢状切面 上的溃变束梢按不同小叶叠加在一起,按 比例地绘制于大鼠小脑平面图上,以研究 束梢在全小脑皮质的分布情况. 2结果 2.1损毁部位 各例动物颈髓(c)切片均可见一侧 头侧 _AB尾僵IC 圉1损毁部位 A为动物RWl的甄5掼毁部位B为RW—t的孽8损毁部位, C为RWI1的甄5损毁部位.熏色部为扭孽中心区.点扶舔为周暗区 ?84? ? ? 固?? 灰质内有损毁区域.以RW为例,c,各 节横断面上均可见左侧灰质内部有一连续 并近似圆形的损毁区,所见各段损毁区位 置大致相似,如图1所示该例G的损毁 部位在灰质中问带并偏向前角,涉及后角 基部,最大直径O.6mm,与周围组织分界 清楚.损毁部位可大致分成中心区和周围 区,中心区内有大量血细胞和组织坏死,未 见神经元存在;周围区内血细胞较少,有胶 质细胞浸润,可见少量神经细胞. 2.2溃变纤维在脊髓内的位置 在2例存活期为2,3d(RW.,RW) 动物的颈髓切片中,损毁同侧索内未见任 何溃变纤维在其它存活期为4d以上的 10例动物的FinkHelmerI染色切片中,其 颈髓外侧内有溃变纤维出现,它们所占据 的部位在各例大体相同仍以RW为例: 自C以上在脊髓损毁侧外侧索中1/3部 位可见大量的溃变嗜银纤维(图2),这些横 断纤维在颈3水平最密集并汇集成一新月 形,几乎占据整个外侧索外侧部. 2.3溃变纤维在脑干内的走行 在动物RW延髓的横切面上,溃变纤 维呈前后分布的扁带状,行于损毁同侧的 延髓背侧部并渐进入小脑下脚.在脑桥头 侧还可见溃变纤维位于小脑中脚内侧,并 向背内侧弯曲到达结合臂背侧.在矢状切 片上,也可见一些掼变纤维分别进入小脑 下脚和上脚,但以进入下脚的为多. 2.4溃变纤维和末梢在小脑内的分布 在存活期为4,7d的动物小脑Fink HeimerI染色切片上,主要可见溃变纤维. 以RW矢状切片为例:溃变纤维分布于双 侧小脑,集中在髓质相邻皮质的颗粒层内, 以损毁同侧为主在前叶,遍及I,V小 叶,以?,V小叶最多;在后叶,分布于? , ?小叶,以?小叶最多(图3).在RW.的 矢状切片上未见溃变纤维分布于?a亚小 叶;在RW的矢状切片中有极少溃变纤维 分布于x小叶 圈2溃变纤维在动物RW,.脊髓颈7外便I索内的位置400x 圈3溃变纤维在动物RW小脑后叶?小叶皮质颗粒层400× 2.5溃变纤维在小脑核团的分布在损毁范围累及后角颈部动物的 在RW,等存活期较长的动物中,其小Fink—Heimer1染色的额状及矢状切片上, 脑切片上常见有溃变纤维分布于双侧顶核溃变纤维的走行和分布与RW等未损 及 和间位棱,这些纤维较细小.未见齿状核内后角部动物的切片相比,无明显不同之 处. 有纤维分布.短存活期的2例动物的小脑 棱团中,未见溃变纤维.3讨论 ? 85? 3.1关于RscT投射的研究 现有脊髓小脑前,后束在小脑内投射 特点的资料不少是应用顺行溃变技术获得 的,即切断不同脊髓节段的外侧索或做脊 髓半横断术使小脑内纤维产生溃变"这 种方法对起始细胞位于颈髓的RSCT不适 用,因为颈髓外侧索内除RSCT的纤维外, 还混杂有大量其它脊髓小脑束纤维,在颈 部行半横断或切断一侧外侧索不能单独显 示RSCT的投射途径wGA—HRP顺行输 送技术也曾被用作对脊髓小脑吻侧柬【" 的研究,但仍有较大的局限性.首先,应用 此法难以确认有效注射范围,常可波及到 上颈髓或上胸髓的脊髓小脑束神经元.其 次,注射范围内的过路纤维可摄取wGA— HRP.因此,在颈部注射势必可波及除 RSCT以外的其它上行的脊髓小脑柬. 除此之外,WGA—HRP还存在着跨神 囝'溃变末梢在小脑皮质近正中矢状切面上的分布(切片厚25Ir--lDD×) 经元输送的现象,这可能造成小脑内出髓灰质内是连续的细胞柱,而损毁范围只 现其它来自脑干网状结构的标记末梢不过是这一细胞柱上若干个直径为O.6 本实验表明,电损毁技术对造成顺行mm的球形区,所以产生的溃变纤维应只 溃变显然是一种简单易行而可靠的方法代表损毁侧RSCT的部分纤维,而非全部. 从损毁部位切片看,一般损毁部位均局限3.2RSCT在脊髓内的走行 于一侧脊髓灰质范围内,覆盖了RSCT在本研究发现RSCT纤维在脊髓内是不 此部的起始细胞,同时,此范围内无其交叉的,上升于外侧索的中部,在C水平 它脊髓小脑束的起始细胞存在损毁范围纤维最密集.这与猫的RSCT在脊髓内的 并未累及侧索内的白质纤维故小脑内的行程很相似但大鼠RSCT在外侧 溃变纤维只能代表RSCT的投射.索所占的范围看来比猫大. 由于RSCT的起始细胞在颈膨大的脊3.3RSCT在脑干和小脑脚内的走行 ? 86? 本研究证明RSCT行于脑干外侧,可 由小脑下脚和上脚背部进入小脑.在数量 上,进入下脚的纤维比进入上脚的多.这一 观察与生理学技术对猫的生理研究结 果略有差异,即猫的RSCT大部分经小 脑上脚连入小脑除种系差异外.这可能是 因为本研究对RSCT起源细胞损毁不全所 致. 图5溃变末梢(黑点)在动物RWt小脑皮质上分布的平面模式图 黑点密度代表{量变束梢在小脑皮质上的分布密度,cP;锥体叶;cru一『:脚『; CrusII脚liFL城球叶;Parafl:旁城球叶;PMI旁正中叶ISialplex1单叶 3.4RSCT在小脑皮质的分布似的结果(图5),本实验的损毁范围较小, 本实验见到的RSCT分布于双侧小浈变法不够敏感显示来梢数量较少可能是 脑,包括前叶(以?,V小叶最多)和后叶出现这一差别的原固. 的?,IX小叶(以?小叶最多)(图4).猫3.5RSCT在小脑中央核的分布 的RSCT终止于前叶及后叶的?,?小近来对脊髓小脑纤维是通过还是止于 叶,但以?小叶占优势"造成这一差小脑核团存在争论'.本研究看到有溃变 异的原因如上所述.纤维分布于双侧顶核和间位核,但不能确 一 些研究表明,RSCT纤维末梢在猫定是否是来梢而齿状核则无纾维通过或 小脑是呈纵带分布的..本研究未显示相终止.这与对猫的研究结果'是一致的. 参考文献 1O~rsson0,UddenbergN.Identificationofasplnocerebe[1artractactivatedfrom - 87? forelimbafferentsincat.ActaPhysio] Scand.1964.62:125,136 2HiraiN.Heterogeneouscompositionofthe spinocerebellartractoriginatingfromthe cervicalenlargementinthecatBrainRes, 1976-109}387,391 3OscaYsson0.Integrati~organizationof therostra]spinoce~ebellartractinthe cat.ActaPhysiolScand-1965.64:154, 166 4Oscarss口n0-UddenbergNPropertiesof affeTentconnectionstotherostra] splnocerebellartractinthecat.ActaPhy一 o】Scand.1965.64l143,l53 5PetrasJM.St)inoeerebe]larneufoflsEnthe monkey.BrainRes—l977,130:146,151 6PetrasJM-CummingsJF.Theoriginof spinocerebe1]arpathway:-:Thenucleus centralisofthecervicalenlargementand nucleusdorsalisofthethoracolumber spinalcord.JCompNeuro].1977t173I 693,716 7SnyderRI,Fau]lLM-MehierWR. 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Keyword5jro~tralspinoeerebdlartractIcerebellumIdegeneration 外伤诱发十二指肠平滑肌瘤大出血1例 首都医学院宣武医院内科袁爱东 患者女,5l岁.于1991年2月13日不慎从 三轮车上摔下,背臀部着地.当时感背腹部和双 下肢持续疼痛,约1h后逐渐缓解.即来我院外科 急诊.腰椎正侧位片示第一腰椎椎体压缩性骨 折,给予口服三七伤药片.外喷好得快,卧束休息 等治疗.患者5日未解大便.除感腰背部疼痛外 余无不适.18日晚和次日晨解柏油样便各1次+ 量共约800g.但无明显腹痛和呕吐.故又来我院 急诊.查体;神清+精神稍差+轻度贫血貌,血压 17.3/10.6kPa(130/80mmHg),双肺呼吸音清. 未两及罗音,心率92次/m[n,律齐,无杂音,腹平 坦,未见隆起及肿物.腹软,中上腹轻压痛+无反 跳痛,肝脾未及,叩呈鼓音+腹水征阴性+肠呜音 活跃.双下肢不肿. 辅助检查:大便潜血(),血小板计数58× 1O'/L.1ib96g/L.HCT27.1.WBC7.3×10'/ L,Sugar5.5mmol/L.Bun3.57mmol/L,COCP 56mmo]/L.K4.39mmo]/L,Na137gmmo]/ L,CI一106.8mmoi,L.尿常规,ECG和肝功能均 正常.患者既往患原发性血小板减步性觜瘴病2 a,每日口服泼尼松2.5mg.出血和凝血时间正 常. 胃镜和十二指肠镜检查胃内及十二指肠球 部未见出血灶,但有鲜血.十二指肠降部鲜血眸 阵涌出.予乳头对删可见直径2cm之圆形隆起, 隆起端有挢皱襞.隆起表面可见溃疡直径0.5 CY~1.故行全麻下剖腹探查术,于十二指肠降部左 侧前壁显露肿物直径约2cm.呈枣仁形.质软,边 界清楚.位于牯膜下.局部切除送病理报告为平 滑肌瘤.术后大便恢复正常.痊愈出院. ? 89?