姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损伤的保护作用
姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损
伤的保护作用
?
666?JournalofQiq~harMedicalCollege,2009,Vo1.30,No.6
姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损伤的
保护作用
赵学梅崔红霞张冬梅
【摘要】目的研究姬松茸多糖(ABP)对放疗荷瘤小鼠造血系统损伤的保护作用.方法构建移
植性动物肿瘤模型,以高,中,低刺量腹腔注射姬松茸多糖第5d,进行.co7照射,观察ABP对荷
瘤小鼠
放疗后外周血白细胞数量和骨髓DNA含量的影响.结果ABP减轻放疗引起的外周血白细
胞数量的
下降,增加骨髓DNA含量.结论ABP对荷瘤小鼠的放疗后造血系统损伤具有一定的保护作
用.
【关键词】姬松茸多糖(ABP)保护作用造血系统放疗
近年来,恶性肿瘤的发病率逐年上升,严重威胁人类健
康.放射诊疗技术在肿瘤的治疗方面发挥积极作用的同时,
也导致人体白细胞显着降低,骨髓损伤等严重的造血系统损
伤.近年来,人们发现多糖类成份对放射所致的造血系统损
伤具有明显的保护作用目前已有300多种多糖具有抗辐射
的作用,是非常有前景的天然辐射防护剂『】].我们研究ABP
对放疗荷瘤小鼠造血系统损伤的保护作用,现将结果报道如下.
1材料
1.1实验动物健康成年昆明系小鼠,体重l8,22g,均为
雄性.由齐齐哈尔医学院实验动物中心提供.Hzz荷瘤小鼠:
黑龙江省肿瘤研究所提供.
1.2药品姬松茸子实体多糖(ABP)购于江苏省张家港市
微生物研究所.ABP采用酶和三氯乙酸/正丁醇结合法除蛋
白,苯酚一浓硫酸法紫外分光光度计测定多糖含量为82.9%,
NaC1溶解,微孔滤膜除菌,4?冰箱保存;氨磷汀注射液
(WR一2721):购于南京康海药业有限公司.
1.3主要器材uV一2550紫外分光光度计为日本岛津产
品;生物安全柜BHC一1360II~为北京东联哈尔仪器制造有
限公司产品;0.2ptm灭菌针头式滤器为美国Pall—Gelman公
司产品.
2方法
2.1建立荷瘤鼠模型取腹腔接种约8d的荷瘤小鼠,在无
菌条件下抽取该荷瘤小鼠腹水,调整细胞浓度为4.0×10
个/ml,在无菌条件下接种于各组小鼠右前肢腋窝皮下(正常
对照组除外),每只小鼠接种0.2ml瘤细胞悬液.
2.2动物分组将动物随机分为6组,分别为:c07+ABP
(.Co7单纯照射组),正常对照组.
2.3给药接瘤24h后,每目腹腔注射给药,给药容积均为
0.2ml/10g..Coy+ABP高,中,低组给药剂量分别为0.2g/
kg,0.1g/kg,0.05g/kg;阳性对照组给药剂量为0.05g/kg;
阴性对照组,正常对照组给等容的0.9生理盐水.
2.4照射条件除正常组外均于接瘤后第5d对小鼠进行.
Co7射线5.0Gy全身一次性照射.
2.5观察指标
2.5.1放射损伤小鼠外周血WBC计数.Co7照射后连续
给药第5,10,15d分别由尾静脉采血2O1,用白细胞稀释液
稀释2O倍,采用血细胞计数板在显微镜下观察计数.
2.5.2骨髓DNA含量的测定照射后连续给药第8d,取小
鼠股骨,精密天平上称重,剪开股骨头,镊子夹住骨髓,1oml
注射器抽取0.005mol/L氯化钙10ml将全部骨髓冲人离心
管中,置4?冰箱30min,500rpm/min离心15rain,弃去上清
液,将沉淀物中加0.2mol/L高氯酸5ml充分混合,恒温水浴
箱9O?加热15rain冷却,过滤,滤液用紫外分光光度计.于
260llm处测定A26.,计算DNA系数(A26o/股骨重g)
2.6统计学方法计量资料采用(士),P<0.05有统计
学意义.
3结果
3.1ABt,对外周血中白细胞数量的影响放疗后外周血中
自细胞数量影响结果如表1.放疗后各组小鼠的WBC均低
于正常组.随着用药时间的延长,各组的wBc均有回升,而
放疗合用ABP中,低组能明显促进WBC的恢复,与阴性对照
组相比有显着性差异(P<0.05),其中以低剂量效果最明
高,中,低剂量组,阳性对照组(WR一2721组),阴性对照组显,与阳性对照组比较没有明显差
异.
衰1ABP对待曩小鼠放疗后外周血中自细胞数量影响{?s.一10)
注:*P<0.05VS阴性对照组;**P<0.01VS阴性对照组;zlP<0.05VS阳性对照
组;??P<0.01VS阳性对照组}#P<0.05VS
正常对照组;##P<0.01VS正常对照组
3.2ABP对骨髓DNA含量的影响由表2可知,放疗
作者单位:齐齐哈尔医学院
邮编161006收稿日期2009—02—01
后荷瘤小鼠骨髓DNA含量急剧下降,而ABP可提高骨髓
DNA含量,中,低剂量组与阳性对照组比较,无显着性差异.
齐齐哈尔医学院学报2009年第3O卷第6期
肺耐药蛋白在宫颈癌组织中的表达
杨杰韩世愈
【摘要】目的探讨肺耐药蛋白(IRP)在宫颈癌组织中的表达.方法运用免疫组织化学方法检
测36例官颈癌组织和12例正常宫颈组织中IRP蛋白的表达情况,并分析相关的临床病理
因素.结
果LRP表达阳性率宫颈癌组(83.33)显着高于正常宫颈组织组(16.67).LRP蛋白的表达与宫
颈
癌的临床病理特征不相关.结论宫颈癌组织中LRP的高表达可能与宫颈癌的耐药性有关,该
特性可
能独立于病理特征之外.
【关键词】肺耐药蛋白宫颈癌免疫组织化学
宫颈癌是严重威胁广大妇女生殖健康的恶性肿瘤n],占
女性生殖系统恶性肿瘤半数以上.随着化疗药物的不断开发
及给药途径和方法的改进,辅助化疗对晚期,复发和转移宫颈
癌患者的治疗起着越来越重要的作用.但是宫颈癌的化疗效
果一直不理想,多药耐药(MDR)是主要原因.肺耐药相关蛋
白(LRP)是新发现的一种与肿瘤MDR有关的蛋白质【].
目前有关LRP表达与宫颈癌相关性研究的报道甚少为了
解LRP在官颈癌耐药现象中的作用情况.本研究采用免疫组
织化学技术对LRP的表达与宫颈癌病理特征之间的关系进
行了初步研究.
1资料与方法
1.1研究对象收集我院2004年1月~2007年6月活检或
手术切除的宫颈癌组织及正常宫颈组织的存档蜡块.宫颈癌
患者36例,患者年龄26,76岁.平均年龄49.73岁,其中高
分化(G)4例,中分化(G)11例,低分化(G.)21例;鳞癌29
例,腺癌7例;临床分期采用国际妇产科联盟(FIGO)1995年
修订的临床分期
:I期9例,?期19例,?期8例.其中8
例有盆腔淋巴结转移,所有患者取材前均未接受过放射治疗
及化学治疗.另选同期正常宫颈组织12例,取自同期因子宫
肌瘤行子宫全切除术的患者,年龄分布与宫颈癌组无显着差
异,所有标本均经病理诊断证实.
1.2试荆鼠抗人LRP单克隆抗体,s,P免疫组化试剂盒,
DAB显色试剂盒,均购自福州迈新生物技术开发有限公司.
作者单位:哈尔滨医科大学在读研究生,现工作单位是黑龙江农垦职
业学院,哈尔滨(杨杰)
哈尔滨医科大学第四附属医院妇产科(韩世愈)
邮编150025收稿日期2008—12一l9
?667?
lI3方法采用S—P免疫组织化学染色法,操作步骤严格
按说明书进行.并用已知的阳性切片作为阳性对照,用PBS
代替一抗作为阴性对照,每次实验均设阳性对照及阴性对照
1.4结果判断LRP阳性标记位于细胞浆中,呈棕黄色颗
粒.胞浆着色呈棕黄色者为阳性(+);不着色者为阴性(一).
1.5统计学方法采用检验,检验水平以P<0.05为差
异有显着性.
2结果
2.1LRP在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的表达I.RP定
位于细胞浆,12例正常宫颈组织中有2例表达,阳性表达率
为16.67;36例宫颈癌组织中,LRP高表达3O例,阳性表达
率为83.33.统计学分析表明:正常宫颈组织与宫颈癌组
织LRP蛋白表达有显着性差异(P<0.05).
2.2LRP阳性表达与宫颈癌临床病理特征的关系见表1.
LRP的表达与宫颈癌的组织学类型,临床分期,分化程度及
淋巴结转移无明显相关性(P>0.05).
3讨论
肿瘤的多药耐药性(MDR)是指肿瘤细胞接触一种抗肿
瘤药物并产生耐药后,同时对结构和作用机理不同的多种天
然来源的抗肿瘤药物具有交叉耐药性.MDR是恶性肿瘤存
在的普遍现象,其耐药机制是复杂的,与多种因素有关,其中
生物膜表面蛋白系统,DNA拓扑异构酶系统,细胞凋亡,谷胱
甘肽活性,药物代谢酶类等为常见的因素].而LRP是于
1993年被新发现的耐药蛋白,它作为重要的耐药原因已被公
认.
LRP基因定位于人16号染色体p13区1带与pll区2
带问,编码一相对分质量为110000的蛋白.LRP基因与
襄2ABP对荷瘤小飘放疗后骨?DNA含量影响(;?.n一10)
注:*P<o.05VS阴性对照组;**P<0.01VS阴性对照组;
?P<0.05VS阳性对照组;??P<0.01VS阳性对照组;#P<
0.05VS正常对照组l##P<0.01VS正常对照组.
4讨论
保护骨髓,防止白细胞降低是提高放疗效果的重要因素.
本实验研究结果显示,荷瘤小鼠放疗后的白细胞数及骨髓
DNA含量急剧下降,放疗合用ABP组的外周血白细胞数及
骨髓DNA含量均显着高于阴性对照组.其中以低剂量组提
升效果最明显,与阳性对照组无明显差异.表明ABP对造血
有一定的保护作用.ABP对放疗荷瘤小鼠的造血功能保护
作用的机制还需要进一步研究.
参考文献
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