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姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损伤的保护作用

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姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损伤的保护作用姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损伤的保护作用 姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损 伤的保护作用 ? 666?JournalofQiq~harMedicalCollege,2009,Vo1.30,No.6 姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损伤的 保护作用 赵学梅崔红霞张冬梅 【摘要】目的研究姬松茸多糖(ABP)对放疗荷瘤小鼠造血系统损伤的保护作用.方法构建移 植性动物肿瘤模型,以高,中,低刺量腹腔注射姬松茸多糖第5d,进行.co7照射,观察ABP对荷 瘤小鼠 放疗后外周血白细胞数量和骨髓DNA含量的影响...
姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损伤的保护作用
姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损伤的保护作用 姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损 伤的保护作用 ? 666?JournalofQiq~harMedicalCollege,2009,Vo1.30,No.6 姬松茸多糖对荷瘤小鼠放疗后造血系统损伤的 保护作用 赵学梅崔红霞张冬梅 【摘要】目的研究姬松茸多糖(ABP)对放疗荷瘤小鼠造血系统损伤的保护作用.方法构建移 植性动物肿瘤模型,以高,中,低刺量腹腔注射姬松茸多糖第5d,进行.co7照射,观察ABP对荷 瘤小鼠 放疗后外周血白细胞数量和骨髓DNA含量的影响.结果ABP减轻放疗引起的外周血白细 胞数量的 下降,增加骨髓DNA含量.结论ABP对荷瘤小鼠的放疗后造血系统损伤具有一定的保护作 用. 【关键词】姬松茸多糖(ABP)保护作用造血系统放疗 近年来,恶性肿瘤的发病率逐年上升,严重威胁人类健 康.放射诊疗技术在肿瘤的治疗方面发挥积极作用的同时, 也导致人体白细胞显着降低,骨髓损伤等严重的造血系统损 伤.近年来,人们发现多糖类成份对放射所致的造血系统损 伤具有明显的保护作用目前已有300多种多糖具有抗辐射 的作用,是非常有前景的天然辐射防护剂『】].我们研究ABP 对放疗荷瘤小鼠造血系统损伤的保护作用,现将结果报道如下. 1材料 1.1实验动物健康成年昆明系小鼠,体重l8,22g,均为 雄性.由齐齐哈尔医学院实验动物中心提供.Hzz荷瘤小鼠: 黑龙江省肿瘤研究所提供. 1.2药品姬松茸子实体多糖(ABP)购于江苏省张家港市 微生物研究所.ABP采用酶和三氯乙酸/正丁醇结合法除蛋 白,苯酚一浓硫酸法紫外分光光度计测定多糖含量为82.9%, NaC1溶解,微孔滤膜除菌,4?冰箱保存;氨磷汀注射液 (WR一2721):购于南京康海药业有限公司. 1.3主要器材uV一2550紫外分光光度计为日本岛津产 品;生物安全柜BHC一1360II~为北京东联哈尔仪器制造有 限公司产品;0.2ptm灭菌针头式滤器为美国Pall—Gelman公 司产品. 2方法 2.1建立荷瘤鼠模型取腹腔接种约8d的荷瘤小鼠,在无 菌条件下抽取该荷瘤小鼠腹水,调整细胞浓度为4.0×10 个/ml,在无菌条件下接种于各组小鼠右前肢腋窝皮下(正常 对照组除外),每只小鼠接种0.2ml瘤细胞悬液. 2.2动物分组将动物随机分为6组,分别为:c07+ABP (.Co7单纯照射组),正常对照组. 2.3给药接瘤24h后,每目腹腔注射给药,给药容积均为 0.2ml/10g..Coy+ABP高,中,低组给药剂量分别为0.2g/ kg,0.1g/kg,0.05g/kg;阳性对照组给药剂量为0.05g/kg; 阴性对照组,正常对照组给等容的0.9生理盐水. 2.4照射条件除正常组外均于接瘤后第5d对小鼠进行. Co7射线5.0Gy全身一次性照射. 2.5观察指标 2.5.1放射损伤小鼠外周血WBC计数.Co7照射后连续 给药第5,10,15d分别由尾静脉采血2O1,用白细胞稀释液 稀释2O倍,采用血细胞计数板在显微镜下观察计数. 2.5.2骨髓DNA含量的测定照射后连续给药第8d,取小 鼠股骨,精密天平上称重,剪开股骨头,镊子夹住骨髓,1oml 注射器抽取0.005mol/L氯化钙10ml将全部骨髓冲人离心 管中,置4?冰箱30min,500rpm/min离心15rain,弃去上清 液,将沉淀物中加0.2mol/L高氯酸5ml充分混合,恒温水浴 箱9O?加热15rain冷却,过滤,滤液用紫外分光光度计.于 260llm处测定A26.,计算DNA系数(A26o/股骨重g) 2.6统计学方法计量资料采用(士),P<0.05有统计 学意义. 3结果 3.1ABt,对外周血中白细胞数量的影响放疗后外周血中 自细胞数量影响结果如表1.放疗后各组小鼠的WBC均低 于正常组.随着用药时间的延长,各组的wBc均有回升,而 放疗合用ABP中,低组能明显促进WBC的恢复,与阴性对照 组相比有显着性差异(P<0.05),其中以低剂量效果最明 高,中,低剂量组,阳性对照组(WR一2721组),阴性对照组显,与阳性对照组比较没有明显差 异. 衰1ABP对待曩小鼠放疗后外周血中自细胞数量影响{?s.一10) 注:*P<0.05VS阴性对照组;**P<0.01VS阴性对照组;zlP<0.05VS阳性对照 组;??P<0.01VS阳性对照组}#P<0.05VS 正常对照组;##P<0.01VS正常对照组 3.2ABP对骨髓DNA含量的影响由表2可知,放疗 作者单位:齐齐哈尔医学院 邮编161006收稿日期2009—02—01 后荷瘤小鼠骨髓DNA含量急剧下降,而ABP可提高骨髓 DNA含量,中,低剂量组与阳性对照组比较,无显着性差异. 齐齐哈尔医学院学报2009年第3O卷第6期 肺耐药蛋白在宫颈癌组织中的表达 杨杰韩世愈 【摘要】目的探讨肺耐药蛋白(IRP)在宫颈癌组织中的表达.方法运用免疫组织化学方法检 测36例官颈癌组织和12例正常宫颈组织中IRP蛋白的表达情况,并分析相关的临床病理 因素.结 果LRP表达阳性率宫颈癌组(83.33)显着高于正常宫颈组织组(16.67).LRP蛋白的表达与宫 颈 癌的临床病理特征不相关.结论宫颈癌组织中LRP的高表达可能与宫颈癌的耐药性有关,该 特性可 能独立于病理特征之外. 【关键词】肺耐药蛋白宫颈癌免疫组织化学 宫颈癌是严重威胁广大妇女生殖健康的恶性肿瘤n],占 女性生殖系统恶性肿瘤半数以上.随着化疗药物的不断开发 及给药途径和方法的改进,辅助化疗对晚期,复发和转移宫颈 癌患者的治疗起着越来越重要的作用.但是宫颈癌的化疗效 果一直不理想,多药耐药(MDR)是主要原因.肺耐药相关蛋 白(LRP)是新发现的一种与肿瘤MDR有关的蛋白质【]. 目前有关LRP表达与宫颈癌相关性研究的报道甚少为了 解LRP在官颈癌耐药现象中的作用情况.本研究采用免疫组 织化学技术对LRP的表达与宫颈癌病理特征之间的关系进 行了初步研究. 1资料与方法 1.1研究对象收集我院2004年1月~2007年6月活检或 手术切除的宫颈癌组织及正常宫颈组织的存档蜡块.宫颈癌 患者36例,患者年龄26,76岁.平均年龄49.73岁,其中高 分化(G)4例,中分化(G)11例,低分化(G.)21例;鳞癌29 例,腺癌7例;临床分期采用国际妇产科联盟(FIGO)1995年 修订的临床分期:I期9例,?期19例,?期8例.其中8 例有盆腔淋巴结转移,所有患者取材前均未接受过放射治疗 及化学治疗.另选同期正常宫颈组织12例,取自同期因子宫 肌瘤行子宫全切除术的患者,年龄分布与宫颈癌组无显着差 异,所有标本均经病理诊断证实. 1.2试荆鼠抗人LRP单克隆抗体,s,P免疫组化试剂盒, DAB显色试剂盒,均购自福州迈新生物技术开发有限公司. 作者单位:哈尔滨医科大学在读研究生,现工作单位是黑龙江农垦职 业学院,哈尔滨(杨杰) 哈尔滨医科大学第四附属医院妇产科(韩世愈) 邮编150025收稿日期2008—12一l9 ?667? lI3方法采用S—P免疫组织化学染色法,操作步骤严格 按说明书进行.并用已知的阳性切片作为阳性对照,用PBS 代替一抗作为阴性对照,每次实验均设阳性对照及阴性对照 1.4结果判断LRP阳性标记位于细胞浆中,呈棕黄色颗 粒.胞浆着色呈棕黄色者为阳性(+);不着色者为阴性(一). 1.5统计学方法采用检验,检验水平以P<0.05为差 异有显着性. 2结果 2.1LRP在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的表达I.RP定 位于细胞浆,12例正常宫颈组织中有2例表达,阳性表达率 为16.67;36例宫颈癌组织中,LRP高表达3O例,阳性表达 率为83.33.统计学分析表明:正常宫颈组织与宫颈癌组 织LRP蛋白表达有显着性差异(P<0.05). 2.2LRP阳性表达与宫颈癌临床病理特征的关系见表1. LRP的表达与宫颈癌的组织学类型,临床分期,分化程度及 淋巴结转移无明显相关性(P>0.05). 3讨论 肿瘤的多药耐药性(MDR)是指肿瘤细胞接触一种抗肿 瘤药物并产生耐药后,同时对结构和作用机理不同的多种天 然来源的抗肿瘤药物具有交叉耐药性.MDR是恶性肿瘤存 在的普遍现象,其耐药机制是复杂的,与多种因素有关,其中 生物膜表面蛋白系统,DNA拓扑异构酶系统,细胞凋亡,谷胱 甘肽活性,药物代谢酶类等为常见的因素].而LRP是于 1993年被新发现的耐药蛋白,它作为重要的耐药原因已被公 认. LRP基因定位于人16号染色体p13区1带与pll区2 带问,编码一相对分质量为110000的蛋白.LRP基因与 襄2ABP对荷瘤小飘放疗后骨?DNA含量影响(;?.n一10) 注:*P<o.05VS阴性对照组;**P<0.01VS阴性对照组; ?P<0.05VS阳性对照组;??P<0.01VS阳性对照组;#P< 0.05VS正常对照组l##P<0.01VS正常对照组. 4讨论 保护骨髓,防止白细胞降低是提高放疗效果的重要因素. 本实验研究结果显示,荷瘤小鼠放疗后的白细胞数及骨髓 DNA含量急剧下降,放疗合用ABP组的外周血白细胞数及 骨髓DNA含量均显着高于阴性对照组.其中以低剂量组提 升效果最明显,与阳性对照组无明显差异.表明ABP对造血 有一定的保护作用.ABP对放疗荷瘤小鼠的造血功能保护 作用的机制还需要进一步研究. 参考文献 [1]刘志辉,孟庆勇.多糖抗辐射研究现状[J].中华放射医学与防护 杂志,2003,23(1):7O一7z [23徐向毅,唐丽华,梁中琴.珍珠莱提取物抗肿瘤作用的初步研究 [J].中国野生植物资源,2003.22(2):31—34 [33陈建济,张瑜,王秀敏.灵芝多糖(polysaccharideofGanoder- malucidum)的药效学研究,防辐射及升高白细胞的作用[J].海 峡药学,2000,12(4):15—17
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