健脾复肝丸质量标准研究[权威资料]

健脾复肝丸质量研究[权威资料] 健脾复肝丸质量标准研究 本文档为WORD,感谢你的阅读。 摘要:目的 建立健脾复肝丸的质量标准。 采用薄层色谱法对当归、白术进行定性鉴别。采用高效液相色谱法测定阿魏酸含量。色谱柱:TIANHE C18 (250 mm×4.6 mm，5 ?m);流动相:乙腈-0.085%磷酸(17?83);流速:1.0 mL/min;柱温:25 ?;检测波长:323 nm。结果 健脾复肝丸中当归、白术的供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色斑点。阿魏酸对照品在0.114,1.482 ?g范围内线性关系良好，平均加样回收率为98.36%， RSD=1.16%。结论 本方法简便准确、灵敏度高，可用于健脾复肝丸的质量控制。 关键词:健脾复肝丸;阿魏酸;薄层色谱法;高效液相色谱法 DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2013.11.017 R284.1 A 1005-5304(2013)11-0047-03 健脾复肝丸(浓缩丸)为本院感染科临床经验方，具有疏肝理气、健脾和胃功效，用于治疗慢性乙型病毒性肝炎辨证属肝郁气滞者。本试验对其质量标准进行研究。本方以白术、柴胡为君药，由于白术含量无标准，柴胡的薄层色谱和高效液相色谱在试验中未得到较好重复性，故选取方中另一主药当归作为研究对象。本制剂工艺中未收集当归挥发油，因此选择阿魏酸含量作为质量控制指标。现报道如下。 1 仪器与试药 LC-2010C HT高效液相色谱仪(日本岛津)，包括UV可变波长检测器(美国惠普);UV-240紫外分光光度计(日本岛津)，梅特勒-托利多Excellence XP205天平。 白术对照药材(批号110925-200206)、当归对照药材(批号120922-200304)、阿魏酸对照品(批号110765-200613)均来自中国药品生物制品检定所，健脾复肝丸(鄂药制字Z20110548，批号20120224、20120623、20121120)及各阴性样品来自本院中药制剂室，所有试剂均为分析纯。 2 处方与制备 处方:当归175 g，陈皮175 g，枳壳175 g，黄芪219 g， 通讯作者:宋宏安，E-mail:an6945@163.com 青皮175 g，砂仁145 g，紫草292 g，虎杖292 g，丹参230 g，白芍219 g，郁金219 g，夏枯草219 g，柴胡131 g，白术175 g，法半夏100 g，赤芍219 g，山楂(焦)219 g。当归、陈皮、枳壳、白术烘干(80 ?，12 h)，粉碎，过筛(100目)，其余13味药常温常压下加水浸泡1 h，加水煎煮提取3次，第1次2 h，第2次1.5 h，第3次1 h，合并煎液，滤过，滤液浓缩得稠膏，取蜂蜜适量117 ?炼制成中蜜与稠膏混合均匀，趁热与上细粉混合制成软材，经中药制丸机制成每粒0.3 g的小蜜丸，打光，干燥(80 ?，12 h)，灭菌，分装(60粒每瓶)，即得。 3 质量标准 3.1 性状 本品为棕褐色至黑褐色的浓缩水蜜丸;气微，味微辛、涩。 3.2 薄层色谱 3.2.1 当归 取健脾复肝丸5 g研粉，加乙醚20 mL，超声处理15 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取缺当归的健脾复肝丸5 g，同法制成阴性对照品溶液。另取当归对照药材1 g，同法制成对照药材 溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》(一部)附录?B]试验，吸取上述3种溶液各10 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(4?1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照品无干扰。 3.2.2 白术 取健脾复肝丸5 g研粉，加正己烷20 mL，超声处理15 min，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取缺白术的健脾复肝丸5 g、白术对照药材1 g，同法制成阴性对照品溶液和对照药材溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》(一部)附录?B]试验，吸取上述3种溶液各20 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板，以石油醚(60,90 ?)-乙酸乙酯(20?0.1)为展开剂展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置，显相同颜色斑点，阴性对照品无此特征。 3.3 阿魏酸含量测定 3.3.1 色谱条件 色谱柱:TIANHE C18(250 mm×4.6 mm，5 ?m);流动相:乙腈-0.085%磷酸(17?83);流速:1.0 mL/min;柱温:25 ?，检测波长:323 nm;进样量:10 ?L。理论塔板数以阿魏酸计不低于3000。 3.3.2 对照品溶液的制备 取阿魏酸对照品适量，精密称定，用甲醇制成每1 mL含阿魏酸228 ?g的对照品溶液。 3.3.3 供试品溶液的制备 取本品10 g，精密称定，加甲醇-甲酸(85?15)溶液50 mL，超声处理(功率200 W，频率40 kHz) 25 min，滤过，70 ?水浴蒸干，残渣加水40 mL溶解，加盐酸调pH值2,3，用乙醚提取5次，每次40 mL，合并乙醚液，挥干，残渣用甲醇溶解，移至20 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得。 3.3.4 阴性对照品溶液的制备 取缺当归的阴性对照品1 g，按“3.3.3”项下方法制备，即得。 3.3.5 阴性干扰试验 分别取供试品、对照品、阴性对照品溶液10 ?L，注入色谱仪，测定，阴性样品在对照品位置无干扰峰。色谱图见图1。 3.3.6 线性关系考察 分别精密吸取上述对照品溶液1、4、6、10、12、13 mL，分别置于20 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，分别进样10 ?L，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，得回归方程Y=69.37X+16.95，r2=0.999 7，阿魏酸在0.114,1.482 ?g范围内线性关系良好。 3.3.7 精密度试验 取同一份阿魏酸对照品溶液连续重复进样6次，测定峰面积，RSD=1.25%(n=6)。 3.3.8 稳定性试验及重复性试验 取供试品溶液(批号20110623)分别于制备后0、2、4、6、8、12 h重复进样，测得阿魏酸峰面积积分值的RSD=2.36%(n=6)，表明供试品溶液12 h内稳定。取该批次样品供试溶液6份，分别进样测定，计算含量RSD=1.23%，表明重复性良好。 3.3.9 加样回收率试验 精密量取同一批次(批号20111120)已知含量的供试品2 g，共6份，按“3.3.3”项下方法制备供试品溶液，分别精密加入“3.2.2”项下阿魏酸对照品溶液1 mL，按上述色谱条件测定，结果见表1。阿魏酸平均加样回收率为98.36%，RSD=1.16%。 3.3.10 样品含量测定 取3个批次(20120224、20120623、20121120)健脾复肝丸样品，按“3.3.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件及测定方法进行含量测定，3批样品平行测定3次，测定结果见表2。 4 讨论 本试验参考文献[1-4]对色谱条件进行了选择，通过比较，最终选择乙腈-0.085%磷酸(17?83)为流动相，使待测成份分离效果好，峰型佳，检测波长323 nm处有最大吸收。 选择提取溶媒时，对甲醇、甲醇-甲酸(85?15)、甲醇-甲酸(90?10)、甲醇-甲酸(95?5)、水饱和乙酸乙酯、水进行比较，水提取，乙醚萃取乳化现象严重，干扰测 定，其余5种以甲醇-甲酸(85?15)提取效率最高，因此，选择甲醇-甲酸(85?15)作为提取溶剂。结合阿魏酸的理化性质，进行了初步纯化，以乙醚萃取。通过对萃取次数及超声提取时间15,45 min结果进行比较，结果表明，超声提取25 min，萃取5次，阿魏酸即可提取完全。由于当归不同药用部位、不同产地中阿魏酸含量差别较大[5-6]，暂定本制剂每克含阿魏酸不低于87.5 ?g作为质控标准。 本试验采用高效液相色谱法测定制剂中阿魏酸含量，回收率好、重复性好、稳定性好、专属性高，能够更有效控制该制剂的质量。 参考文献: [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S].北京:中国医药科技出版社，2010:124. [2] 申强，陈燕忠，吕竹芬，等.HPLC法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸的含量[J].长治医学院学报，2008，22(4):253. [3] 石上梅.HPLC法测定当归康妇胶囊中阿魏酸的含量[J].中国药事，2004， 18(1):37. [4] 仲开德，付泽华，熊文碧.HPLC测定骨炎灵颗粒中阿魏酸的含量[J].成都中医药大学学报，2009，32(2):85. [5] 乔明，向纯明.HPLC对当归不同药用部位中阿魏酸含量测定[J].中医药学刊，2005，23(10):1892. [6] 李琰，徐丽珍，林佳，等.不同产地当归中阿魏酸的含量比较[J].中国药学杂志，2003，38(11):839-840. (收稿日期:2013-04-22，编辑:陈静) 文档资料:健脾复肝丸质量标准研究 完整下载 完整阅读 全文下载 全文阅读 免费阅读及下载 阅读相关文档:胡黄连苷?在大鼠脑缺血损伤中的抗氧化作用及其最佳治疗剂量和时间窗 康欣胶囊对兔动脉粥样硬化斑块稳定性的影响 中医脾系问诊信息采集系统研制与评价 防治阿尔茨海默病药食同源类中药配伍规律研 究 医保总额预付制下徐州市中医院的实践与思考 生肌象皮膏治疗慢性难愈性溃疡临床疗效及初步机制 阳虚质者基因组拷贝数变异小样本研究 基于双向聚类方法的中医治疗中风病方剂配伍规律知识发现 初中数学课堂教学中存在的几个误区 子宫内膜异位症性不孕患者腹腔液中细胞因子与中医证候相关性分析 浅谈初中语文教学如何培养学习兴趣 初中英语教学中如何激发和培养学生的兴趣 臌胀片在HBeAg阳性慢性乙型病毒性肝 最新最全【学术论文】【总结报告】 【演讲致辞】【领导讲话】 【心得体会】 【党建】 【常用范文】【分析报告】 【应用文档】 免费阅读下载 *本文收集于因特网，所有权为原作者所有。若侵犯了您的权益，请留言。我将尽快处理，多谢。*