【doc】新鲜芦荟与干粉芦荟在细菌培养基中作用比较研究

【doc】新鲜芦荟与干粉芦荟在细菌培养基中作用比较研究 新鲜芦荟与干粉芦荟在细菌培养基中作用 比较研究 新鲜芦荟与干粉芦荟在细菌培养基中作用比较研究 四川省攀枝花市妇幼保健院检验科f6171100)夏云温沙洛张利军张强张家华 摘要目的为探讨新鲜芦荟与于粉芦荟在细菌培养基中的作用比较,为芦荟的开发应用和检验技术的更 新提供有力的科学依据.方法用常规方法配制营养琼脂培养基,在培养基中加入一定量的各种芦荟成分,再 接种一定量的细菌进行培养,现察细菌生长状况进行比较研究.结果新鲜芦荟与干粉芦荟浸液在细菌培养基 中作用一致.干粉芦荟通过120~C高压灭菌20rnin后就失去全部作用. 美麓词芦荟细菌培养基 近年来芦荟产业的形成将芦 荟的用途太大增加,我们将芦荟 用于体外细菌培养基中,同样收 到意想不到的效果,为深入掌握 干粉芦荟与新鲜芦荟在细菌培养 基中的作用情况及差异,为芦荟 的产品开发和检验技术的更新提 供科学依据,我们进行了以下实 验. 1材料和方法 1.1材料 1.1.1芦荟来源:元江芦荟 (中国云南元江芦荟),美国芦荟 (为美国库拉索芦荟)均来自我 市林业科研所引进种植. 1.1.2细菌株来源:致病性金 黄色葡萄球菌,大肠埃希氏菌为 我科室保存标准菌株,四联球菌 从空气中获得. 1.1.3试剂:营养琼脂为杭州 天和微生物试剂公司产品. 1.2方法 1.2.1新鲜芦荟的处理:将2 种芦荟用无菌蒸馏水洗净3次, 在净化台上用无菌的小型粉碎机 将其磨为浆状原液备用,整个操 作严格无菌. 1.2.2干粉芦荟的处理:称取 一 定量的新鲜芦荟切碎晾干后用 小型粉碎机将其磨为粉,称其重 量通过计算得到lg干粉美国芦 荟相当于41.66g新鲜美国芦荟; 354 lg干粉元江芦荟相当于41.47g 新鲜元江芦荟 1.3培养基的配制 1.3.1新鲜芦荟培养基的配制: 每瓶称取营养琼脂粉7.2g,加 入200ml蒸馏水中溶解,共配8 瓶营养琼脂培养基液,120oC高 压灭菌20nfin,待冷至80?时加 入新鲜芦荟原液,加入元江芦荟 20g的培养基为I号培养基.加 入元江芦荟40g的培养基为2号 培养基,加入美国芦荟20g,40g 的培养基为3,4号培养基,加 入元江芦荟5g,lOOg的培养基 为5,6号培养基,加入美国芦 荟5g,lOOg的培养基为7,8号 培养基,每个培养皿倒2Oral培 养基冷后备用. 1.3.2干粉芦荟培养基的配制: 先将芦荟用三种灭菌方法进行处 理,一种加入培养基中与营养琼 脂一起120?高压灭菌20m111, 待冷至8O?时制备培养皿;另 一 种是将芦荟干粉放人嗅氧箱中 铺开,消毒灭菌30min后无菌操 作加入至冷至80?的营养琼脂 培养基中制备培养皿;再一种是 将一定量的芦荟加入lOOml无菌 蒸馏水中放入冰箱4~C24h制备 援液用G6玻砂漏斗抽滤灭菌后 加入已冷至80?的营养琼脂培 养基(先少加90m2水)中制备 培养皿.加入美国干粉芦荟 0.12g(相当于鲜芦荟5g)的培 养基为Al号培养基;加入美国 干粉芦荟0.48g(相当于鲜芦荟 20g)的培养基为A2号培养基; 加入美国干粉芦荟0.96g(相当 于鲜芦荟40g)的培养基为3号 培养基;加入美国干粉芦荟 2.4g(相当于鲜芦荟lOOg)的培 养基为A4号培养基;加入元江 芦荟0.12g,O.48g,0.96g,2.4g 的培养基分别为A5,A6,A7, A8号培养基. 1.4菌液配制 将三种细菌各挑取分纯菌落 在无菌生理盐水中稀释混匀后与 0.5个单位的麦氏比浊管一起在 722分析仪上用53Ohm波长进行 比浊,使其浊度的吸收值均为 0.1,此时菌液的含菌量相当于 5×107du/ml(此为1液).取 1液0.1ml+生理盐水4.9ml稀 释=1×lo6,cfu/(此为2 液).取2液0.1ml+生理盐水 4.9ml稀释=2×lO40du/ml(此 为3液).取3液0.1+生理盐 水4.9ml稀释=4×102..efu/ml (此为4液).留稀释菌液4液 (含菌量4×lO2du/m1)备用. 1.5接种培养 取三种细菌的稀释菌液(4 ×lO2.du/m1)4液1l接种于 中国民族民间医药杂志2001年总舄期 各自不同芦荟标本的培养基中, 同时接种一个营养琼脂培养皿作 对照,在37?恒温培养箱中培 养18小时观察结果. 2结果 (1)在芦荟含量为20g,dog (相当于干芦荟0.48g,0.96g) 的范围内新鲜芦荟与干粉芦荟浸 液用c6玻砂漏斗抽滤灭菌后加 入已冷至8O?的营养琼脂培养 基中制备的培养基培养细菌效果 完全一样,细菌生长快且多,三 种细菌菌落直径都大于2rrma,菌 落数量都大于l5个;而营养琼 脂培养基上细菌菌落直径都小于 2rnm,细菌苗落数都小于15个 (2)在20Oral培养基中加入 新鲜芦荟量低于或等于5g(干 粉芦荟0.12g)时培养细菌效果 与营养琼脂无差异. (3)在200ml培养基中加入 新鲜芦荟量高于或等于100g (干粉芦荟2.4E)时培养细菌效 果与营养琼脂相比明显细菌生长 受抑制. (4)干粉芦荟加入营养琼脂 培养基中与营养琼脂一起120% 高压灭菌20rain,将失去芦荟的 全部作用,培养结果与营养琼脂 完全一样. (5)将芦荟干粉放人嗅氧箱 中铺开,消毒灭菌30min后无菌 操作加入已冷至80%的营养琼 脂培养其中制备堵养皿,结果培 养皿全被污染. (6)元江芦荟与美国芦荟品 种之间无明显差异. 3讨论 芦荟(Bartcadenisisaloe)是 一 个古老的植物,属百合科多肉 质的草本植物,由于其神奇般的 药效,世界各地人们给予它很高 的评价,民间冠以"万应良药", "天然美容师","家庭医生"等 美称,我们将芦荟应用于体外细 菌培养,同样收到很好的效果, 实验结果表明:新鲜芦荟与干粉 芦荟浸液用G6玻砂漏斗抽滤灭 菌后加入培养基中制备的培养基 有利于细菌的生长,在同等条件 下细菌生长快且多,菌落直径都 大于2rnm,而营养琼脂培养基上 细菌菌落都小于2mm,说明细菌 生长在含芦荟的培养基中明显加 快;菌落数量大于15个,而营 养琼脂培养基上细菌菌落数都小 于15个,说明一定量的芦荟在 体外具有促进细菌生长的作用. 当芦荟量不够时也不能发辉作 用.如21Xh~培养基中加入新鲜 芦荟量高于或等于lO0g(干粉 芦荟2.4g)时培养细菌将被重 毒.干粉芦荟不能高压灭菌,嗅 氧箱不能对干粉芦荟进行有效灭 菌.元江芦荟与美国芦荟品种之 间无明显差异. 我们的研究结果将芦荟产品 的开发又带入了一条新思路中, 同时在检验技术上也是一次创 新,具有进一步研究的价值 参考文献 1诸淑琴.我国芦荟产业发展现状及 前景中国民族民间医药杂志,2O0O,43: 107一l0吕 2董银卯张灿坤.加强国际交流 但进芦荟产业发展中国民族民间医药杂 志,2O0O,43:102—104 3王林.王茂起.芦荽产品的开发与 申报.中国民族民问医药杂志,2O0O,44; 17.一172. 4吕佳,代云兰传统芦荟的应用 中国民族民间医药杂志.2O0O,44:177— 178 (收祷13期:21301年9月3日) 反相高效液相色谱法测定蒙药大栀子中栀子苷的含量 内蒙古通辽市药检所{028000)关金凤于淑华刘玉琴 内蒙古民族大学附属医院倪世荣 摘要目的:建立反相高嫂液相色谱法测定蒙药大栀子苷的音量方法:采用十八烷基键合硅胶为填料的 色谱柱(5珊,4.6mm×20帅),己腈一水(15:85)为流动相,检测波长238ran.结果:该法能很好地分离栀 子苷与其他相关杂质,测定的线性范围7.5一l50?rid..,r=O.9996,检测限为0l,平均加样回收率为 100.28%,精密度RSD为3.19%(n=5).结论:该法简便,快速,专属性强,可以用来控制大栀子的内在质量. 美蕾词反相高效液相色谱法大栀子栀子苷 大栀子为茜草科植物长果栀 子Ganderdam打Ellisf. L0ngiCfltl'l~tZ.W.XieelOkada的 中国民蕨民问医药杂志00们年总53期 干燥成熟果实.蒙语名"朱如 拉",为蒙医常用药材,具有清 血热,明目,祛"巴达干协日", 生津,调元之功效.采用反相 高效液相色谱法对大栀子中栀子 苷进行测定.该法简便,快速, 355