肿瘤生物治疗孙秀华

肿瘤生物治疗孙秀华 第一节:肿瘤疫苗 第二节:肿瘤的基因治疗 第三节:抗血管生成的生物治疗 1.肿瘤疫苗的种类。 2.肿瘤基因治疗的策略。 3.抗肿瘤血管生成的肿瘤治疗策略。 了解: 1.不同类型肿瘤疫苗的来源、优缺点及临床应 用情况。 2.肿瘤基因治疗的发展史、存在的问题与发 展方向。 3.肿瘤血管形成及特点、肿瘤血管的生成调 节。 1.肿瘤疫苗的基本策略。 2.肿瘤定向基因治疗及旁观者效应。 1.不同类型肿瘤疫苗的作用。 2.载体构建与目的基因调控。 3.肿瘤血管的生成调节。 Cancer patient Surgery Chemotherapy Radiation Gene therapy Cancer Vaccine HER/EGFR-TK Inhibitors Angiogenesis Inhibitors ? 肿瘤分子生物学 ? 肿瘤细胞生物学 ? 分子生物学技术 ? 肿瘤免疫学 ? 高级生化中的信号传递通路 ? 病毒学 生物治疗的概念 疫苗:是一种能刺激机体免疫系统产生抗特 异性靶物质的免疫反应物质。 1796年—1893年—1980年—20世纪90年代。 Edward Jenner ; William B.Coley 2001年底，全世界共有100多个肿瘤疫苗方 案正在进行临床试验。 1. 2. 3. / 4.DNA 5. 6. 肿瘤疫苗的基本策略 1.人类肿瘤抗原的免疫原性弱，需要应用免疫佐剂增 强肿瘤疫苗的效应。 2.并非所有肿瘤相关抗原都是疫苗治疗的理想靶子。 3.大多数肿瘤疫苗是诱导产生细胞毒性,细胞(,, ,)，但也可诱导体液免疫。 4.肿瘤疫苗的目的是治疗肿瘤而不是预防肿瘤。 5.肿瘤疫苗同样存在接种方式、最佳剂量、强化、免 疫常规计划以及安全性等问题。 细胞疫苗是目前使用最多、效果最好的 肿瘤疫苗，包括:肿瘤细胞疫苗、基因修 饰疫苗、树突状细胞疫苗及融合疫苗等。 肿瘤细胞疫苗 ? 优点:包含全部潜在的肿瘤抗原。 ? 缺点:耗时，肿瘤抗原免疫原性弱，并不能总是 有效递呈，可导致自身免疫。 ? 应用:Vermorken等用手术切除的肿瘤与BCG的 混合物治疗?期结肠癌患者，能减少61%的复发 率。 基因修饰疫苗 基因修饰疫苗或称基因工程疫苗:应用基因重组技 术将目的基因导入肿瘤细胞制备而成的肿瘤细胞 疫苗。 目的:1.增强免疫原性 2.提高抗瘤能力 3.直接杀伤肿瘤细胞 种类:1.MHC修饰的肿瘤细胞疫苗;2.共刺激分子修饰 的肿瘤细胞疫苗;3.细胞因子修饰的肿瘤细胞疫 苗;4.编码特定产物癌基因修饰的肿瘤细胞疫苗. 树突状细胞疫苗 优点:能有效递呈肿瘤抗原;通过树突状细胞 大多数疫苗都能发挥作用。 缺点:可导致自身免疫;树突状细胞是一群 异质性细胞，没有国际公认的分类;制备 过程复杂。 分类:肿瘤抗原致敏的树突状细胞疫苗; 基因修饰的树突状细胞疫苗。 树突状细胞—— 当前肿瘤免疫治疗中的最大热点之一 DCs细胞是最强的抗原递呈细胞 DCs细胞能够加工处理无限多种抗原 DCs内吞功能强大 DCs细胞能够高水平表达MHC抗原和共刺激分子 DCs可以通过MHC-I以及MHC-II类途径递呈外源性抗原 DCs 启动抗原特异性免疫反应 DCs 对自身抗原具有耐受性 融合疫苗 是一种极有希望的肿瘤疫苗。采用 APC细胞与肿瘤细胞融合，相当于多基因 转导，可弥补肿瘤细胞中抗原呈递功能的 缺陷，补充共刺激分子。 病毒疫苗 优点:一种有效的可信赖的基因导入方法; 病毒的免疫原性可相当于佐剂。 缺点:机体可能产生抗病毒的中和抗体; 会削弱疫苗的吸收和作用; 安全问题;制备耗时，费用较高。 蛋白/多肽疫苗 蛋白疫苗 优点:包括I类和II类抗原表位，适合于所有HLA类型。 缺点:免疫原性较差，常需要佐剂;蛋白疫苗的纯化较困难。 多肽疫苗 优点:能诱导肽特异的免疫反应;安全;费用较低。 缺点:II类抗原表位很少;只对某种特定的HLA类型的患者 有作用;可能选择标为阴性的变异体。 优点:安全;制备简单;费用低; cDNA的大小没有限制。 缺点:转染和表达效率较低; 可能诱导免疫耐受。 优点:安全;特异性强; 可模拟碳水化合物抗原决定簇。 缺点:制备复杂，耗时，费用高。 就是利用异种生物的细胞、蛋白、多肽或 基因等作为抗原制备的疫苗。 优点:抗原来源广泛; 诱导有效的交叉免疫。 缺点:安全性问题值得深入研究; 很多理论问题有待于进一步探讨。 基因治疗与重组DNA技术密切相关，现 在已告别了婴儿时代正在走向成熟。 70年代提出了基因治疗的概念:即通过 对人体遗传物质进行修正、补充或改造来达 到治疗疾病的目的。以基因作为靶点、以基 因作为手段进行治疗。 依据给药途径和方法可分为离体基因治 疗、原位基因治疗和体内基因治疗。原位 基因治疗是目前应用最多的一种方法。 基因治疗本质上也就是一个目的基因、 载体与转染的问题。 目的基因及其作用 根据作用机制可将基因治疗的目的基因分为两 大类: 1.调节机体免疫系统 实质是免疫治疗加上基因转染技术。 2.肿瘤细胞与正常细胞差异表达基因 (1)抑癌基因治疗。(2)E1B缺陷的腺病毒基因 治疗。(3)抗血管生成基因治疗。(4)“自 杀”基因治疗。(5)“修饰”基因治疗。 1.物理/化学方法 a 裸露DNA直接注射;b 脂质体共转化; c 受体介导的基因导入。 2. 病毒载体系统 a 逆转录病毒载体; b 腺病毒载体; c 其他病毒 反义核苷酸技术 是一种能有效调节肿瘤细胞中基因表达的手 段，其基本原理是根据核酸碱基互补配对的规律 出能与靶基因特定区域结合的RNA或DNA， 以影响靶基因的表达，抑制其功能。途径:一是 利用质粒载体或病毒载体转化或转染肿瘤细胞， 在细胞内转录出能与目的基因正义RNA相互补的 反义RNA，从而阻断目的基因蛋白质的表达。二 是体外人工合成反义核苷酸。 具有剪切能力的RNA。利用核酶来破 坏肿瘤细胞中因突变而高表达的癌基因。 如ras、Myc等。应用受限制的原因:分子 比较大，难以进入细胞达到足够的作用浓 度;不能区分正常的RNA序列和突变的癌 基因序列。 肿瘤定向基因治疗及旁观者效应 1.给药途径:最多见的是向肿瘤组织直接注射，值 得推荐的是以介入治疗为基础的基因治疗。 2.载体构建 a 病毒载体 b 细胞特异性受体 c 重组噬菌体系统是近年来发展起来 的基因治疗的新载体。 肿瘤定向基因治疗及旁观者效应 3.目的基因的调控AFP的研究最为透彻，应用也 最多。 4.旁观者效应:最初应用TK基因时观察到，即表 达TK基因的肿瘤细胞周边的一些不表达TK基因 的肿瘤组织也能对GCV做出反应而受到杀伤。 1.组织和细胞特异性。 2.高效率载体系统。 3.新的目的基因。 4.与其他治疗手段有机结合。