人免疫球蛋白E

人免疫球蛋白E 人免疫球蛋白E Fc段受体?(FcεR?/CD23) ELISA Kit实验原理 本试剂仅供研究使用目的,本试剂盒用于测定人的血清,血浆及相关液体样本中免疫球蛋白E Fc段受体?(FcεR?/CD23)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白E Fc段受体?(FcεR?/CD23)水平。用纯化的人免疫球蛋白E Fc段受体?(FcεR?/CD23)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白A Fc段受体?(FcαR?/CD89)，再与HRP标记的免疫球蛋白E Fc段受体?(FcεR?/CD23)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E Fc段受体?(FcεR?/CD23)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过曲线计算样品中人免疫球蛋白E Fc段受体?(FcεR?/CD23)浓度。 样本处理及要求: 1.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8?的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待，其余冷冻备用。 2.尿液:用无菌管收集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 3.血清:室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 注意事项: a .试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用 完，板条应装入密封袋中保存。 B . 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 C .各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好 控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 D .请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值 大于标准品孔第一孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 E .封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 如有需要请索要说明书:www.fengxiangbio.com 有问题请联系:上海丰翔生物科技有限公司～