运动生物化学教案 实验五血乳酸的测定运动生物化学教案 实验五血乳酸的测定
教 案
日期:2009.6.22—25 课节: 7、8 教室:生化实验室1 教学对象:运动训练 第5次课 教学主题:血乳酸的测定
教学目标:掌握血乳酸的测定方法,了解运动时解运动时血乳酸水平的影响因素及该指标在运动实践中的应用和意义。
教学重点:血乳酸的测定方法
教学难点:血乳酸测定方法的实验原理
教 学 过 程 设 计
教学内容
第一:引导(10分钟左右 )
点名,讲解上节实验报告完成情况。然后复习理论课所讲的关于血乳酸在运动
实践中的应用和意义。
第二:实验过程 (...
运动生物化学
实验五血乳酸的测定
教 案
日期:2009.6.22—25 课节: 7、8 教室:生化实验室1 教学对象:运动训练 第5次课 教学主题:血乳酸的测定
教学目标:掌握血乳酸的测定方法,了解运动时解运动时血乳酸水平的影响因素及该指标在运动实践中的应用和意义。
教学重点:血乳酸的测定方法
教学难点:血乳酸测定方法的实验原理
教 学 过 程 设 计
教学内容
第一:引导(10分钟左右 )
点名,讲解上节实验报告完成情况。然后复习理论课所讲的关于血乳酸在运动
实践中的应用和意义。
第二:实验过程 (75分钟左右)
一 实验原理
乳酸与浓硫酸共热生成乙醛,在铜离子存在时乙醛与对羟基联苯作用生成紫色
化合物,其颜色的深浅与乳酸浓度成正比,通过比色测定其含量。
二 实验器材与试剂
10%三氯乙酸,1%氰化钠溶液,浓硫酸,对羟基联苯试剂,4%硫酸铜溶液,乳
酸空白夜,乳酸
储存液,乳酸标准应用液,水浴锅,721分光光度计,离心机,
移液管等。
三 实验指导
时(一)、实验步骤
间1、运动方式和取血方式
(9 受试者进行1分钟原地高抬腿跑,在运动前、运动后3分钟分别取耳垂血200微升,吹人预先存有0.48毫升l,NaF溶液的离心试管中,立即摇匀。再加入1.5毫分) 升的10%三氯乙酸溶液,混匀,以3500转的速度离心5分钟,取上清液,弃沉淀。
2。无蛋白血滤液制备
教师演示示范操作,并提示操作过程中可能出现的错误。
(单位:毫升)
步骤 测定管1(运动前) 测定管2(运动后)
l,NaF 0.48 0.48
耳垂血 0.02 0.02
10%三氯乙酸 1.5 1.5
混均匀,离心(3500转×5分钟),取上清液分别倒入做好标记的两个离心管中,
备用。
2、测定血乳酸步骤
(单位:毫升)
样品或试剂 空白管 测管1 测管2 测管3
空白液 0.5 —— —— ——
标准应用液 —— —— —— 0.5
(0.01毫克/毫升)
上清液 —— 0.5 0.5 ——
4%硫酸铜溶液 1滴 1滴 1滴 1滴
浓硫酸 3.0 3.0 3.0 3.0
沸水浴5分,在冰水中冷却
对羟基联二苯 2滴 2滴 2滴 2滴
混匀,37?水浴保温15分钟,每5分钟振摇一次;
100?沸水浴90秒,用冷水冷却至室温;
倒入1厘米光径比色皿,空白管调零,560纳米波长比色。
(二)、实验结果计算
血乳酸浓度(毫克%)=OD/OD*100毫克%
=
血乳酸浓度(毫摩尔/升)=血乳酸浓度(毫克%)?9
=
四、注意事项
1、水浴保温时温度和时间一定要准确。
2、滴加对羟基联苯时防止其附着于试管壁上,并充分摇匀。 3、滴加浓硫酸时,要边加边振荡,滴加速度要慢,防止产生的乙醛挥发。 七、思考题
1、测定血乳住时应如何控制来血样的时间,
2、如何运用血乳酸指标监控运动强度,
3、如何运用血乳酸指标评定运动员有氧、无氧运动能力, 第三、实验结果
与分析(5分钟左右)
总结实验、分析实验数据、如何写实验报告
第 次课
课后小结:
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