本实验课程内容包括工业微生物菌种的种子培

本实验课程内容包括工业微生物菌种的种子培 本实验课程内容包括工业微生物菌种的种子培养、发酵罐的放大培养、发酵的机理、发酵过程的检测与控制、发酵产品的分离与冷冻干燥、发酵产品提取工艺的评价等。 本实验课程的任务是使学生在已学过微生物、生物化学、化工原理等课程的基础上，把发酵工程的理论和实践结合起来，实现对生物反应器和生物化学产品纯化与分离的操作。深入理解生产过程的工艺原理，进一步深化和提高所学的基本知识，从而使学生具有选育新菌种，探求新工艺、新设备、从事生物产品研发和对生物产品下游技术操作的基本的能力并能够应用基本理论去分析和解决生产过程中的具体问题，改造原有不合理的生产过程，使之更符合客观规律。 本实验以轮枝链霉菌(Streptoverticillium mobaraense)为对象，经过发酵生产谷氨酰胺转胺酶，并经过进一步的分离提取，得到商品用酶。通过这一过程学习生物工程中的中游和下游技术。 我们只希望通过这些实验，让同学们获得生物工艺学最基本的实验技术训练，为今后独立工作打下扎实的基础。 作者 2006.9 1. 相关基础知识 1.1培养基的制备 培养基是按照微生物生长发育的需要，用不同组分的营养物质调制而成的营养基质。人工制备培养基的目的，在于给微生物创造一个良好的营养条件。把一定的培养基放入一定的器皿中，就提供了人工繁殖微生物的环境和场所。自然界中，微生物种类繁多，由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的也各不相同，加之实验和研究上的目的不同，所以培养基在组成原料上也各有差异。但是，不同种类和不同组成的培养基中，均应含有满足微生物生长发育的水分、碳源、氮源、无机盐和生长素以及某些特需的微量元素等。此外，培养基还应具有适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力及一定的氧化还原电位和合适的渗透压。 根据制备培养基对所选用的营养物质的来源，可将培养基分为天然培养基、半合成培养基和合成培养基三类。按照培养基的形态可将培养基分为液体培养基和固体培养基。根据培养基使用目的，可将培养基分为选择培养基、加富培养基及鉴别培养基等。 培养基的类型和种类是多种多样的，必须根据不同的微生物和不同的目的进行选择配制，本实验分别配制常用培养细菌、放线菌和真菌的牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号合成培养基和马铃薯蔗糖培养基等固体培养基。 固体培养基是在液体培养基中添加凝固剂制成的，常用的凝固剂有琼脂、明胶和硅酸钠，其中以琼脂最为常用，其主要成份为多糖类物质，性质较稳定，一般微生物不能分解，故用凝固剂而不致引起化学成份变化。琼脂在95?的热水中才开始融化，融化后的琼脂冷却到45?才重新凝固。因此用琼脂制成的固体培养基在一般微生物的培养温度范围内(25?-37?)不会融化而保持固体状态。 1.2 灭菌 灭菌是用物理或化学的来杀死或除去物品上或环境中的所有微生物。消毒是用物理或化学的方法杀死物体上绝大部分微生物(主要是病原微生物和有害微生物)。消毒实际上是 部分灭菌。