37%~40%福尔马林液25m

37%~40%福尔马林液25m 37%~40%福尔马林液 25ml 冰醋酸 5ml 苦味酸饱和溶液的浓度为100ml水中加1g苦味酸。 (2)Mayer苏木精液 苏木精 1g 蒸馏水 1000 ml 铵矾或钾矾 50 g 碘酸钠 0.2g 柠檬酸 1g 水合氯醛 50 g 将苏木精溶于蒸馏水内(需要时可微热)，加入研细的明矾，摇震助溶(需要时再加温)，明矾溶解后，依次加入碘酸钠、柠檬酸、水合氯醛等试剂。配制后即可供使用。 (3)曙红 曙红 0.5~1g 蒸馏水 100ml 混匀后过滤 (二)组织取材 取舌、胸腺、脾、胃、肝、十二指肠等6种脏器。 (三)固定与修块 上午:取组织块入Bouin氏液中，组织块的直径应小于7mm。 下午:修块，用双面刀片将组织块修剪成3~5mm3大小。 若中午取材，则晚上修快。具体修块方法如下1: 表1 舌等6种组织修块及包埋方法 组织名称 修块方法包埋方法 舌在舌根隆起靠舌尖侧切断，分为四段，取前2/4段舌体近舌尖部朝下 肝截取4mm3大小方形块任一截面朝下 脾截取中间4mm3大小方形块截断面朝下 胃截取幽门部朝上长约5mm的胃胃窦部宽口朝下 十二指肠靠近幽门部截取长约5mm的肠截断面朝下 胸腺截取5mm3大小方形块任一截面朝下 (四)脱水与透明 在以下过程，要求经常晃动组织块，以保证组织块可以充分地与乙醇或二甲苯接触，在每一步骤之后，要充分滤干组织块，一般用筒纸吸干组织块上的液体，以免影响其他液体的浓度，但要防止组织块干燥。全过程约需要4.5h(270min)。 1(75%乙醇 50min 2(85%乙醇 50min 3(95%乙醇 (I) 30min 4(95%乙醇 (II) 30min 5(100%乙醇(I) 30min 6(100%乙醇(II) 30min 7 1/2 二甲苯(乙醇与二甲苯等体积) 20min 8(二甲苯(I) 20min 9(二甲苯(II) 10min(可依据透明效果而定) 透明效果的判断:如组织块颜色加深透明，二甲苯溶液颜色透明，即表明脱水效果很好;如脱水不好，二甲苯溶液颜色会变混浊。使用过的酒精或二甲苯倒入烧杯里以便回收。 (五)浸蜡、包埋与修蜡块 1(浸蜡:可在脱水与透明进行时，将60?恒温箱打开，使大烧杯内的石蜡充分溶解，待脱水与透明结束后，可将脱水篮整个或包裹在纱布内的组织块转入充分溶解的石蜡里，于60?恒温箱放置120分钟。 2(包埋:包埋有多种器具，比较简洁廉价的方法是采用纸盒。可在浸蜡的同时将纸盒做好，包埋时将60?的石蜡倒入纸盒内，然后用小镊子将各组织块按一定的顺序排列好，使切面朝下。我们建议，不同组别的同一组织包埋于一个蜡块中，以保证切片和染色条件一致，且以便读片和比较。为防止倒入纸盒内的石蜡底部立刻凝固，可将纸盒置于一玻璃板上(或大培养皿内)，然后将玻璃板置于80-90?左右热水上，包埋时蜡盒底部要放平，做蜡块的蜡要反复冻融较好。组织包埋方法可参见表2。 3(修蜡块:待纸盒内蜡凝固后(若需要使蜡块迅速凝固，可将包埋好的蜡块置于4?冰水混和物中)。将蜡块取出，用刀片将其修成梯形，通常蜡块大小视组织多少而定，为保证切片顺利，组织块与蜡块边缘之间的距离不得小于2mm。修剪下来的残蜡应回收，以便再用。 (六)切片 在载玻片上擦少量甘油蛋白。可滴半滴甘油蛋白于载玻片上，用手指充分抹匀，呈半干状为佳。 切片厚约4~8μm，通常厚约6μm，细胞小而密的组织如胸腺，可以切4~5μm，而细胞疏的组织，如下丘脑可切10μm。将切片在55?左右水浴中展开，展开程度以带黄颜色的组织完全摊平为准。 用涂有甘油蛋白的载玻片从水浴中捞取切片，斜放在木架上，立即放入37?烘箱中过夜，一般时间越长效果越好，以切片紧贴于载玻片上呈半透明状为佳。每个组织块捞片2张。 过夜后，将载玻片置于玻片架上，进行下面的实验。