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皮肤创伤实验

2017-10-31 6页 doc 20KB 33阅读

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皮肤创伤实验皮肤创伤实验 土党参多糖促进小鼠皮肤创伤愈合作用影响 1 实验分组及其给药 实验设计5个组,一个模型组,一个阳性对照组(给予初元),三个给药组(100 mg/kg、200mg/kg、400 mg/kg)。每组20只。模型组给予CMCNa(0.2ml/10g).每天一次。小鼠适应性饲养3d后开始造模。 试剂:羟脯氨酸试剂盒(南京建成,批号:20110303);红细胞稀释液(安徽省巢湖市弘慈医疗器械有限公司,批号:20100702);白细胞稀释液(自制)。 2材仪器料 仪器:JA2003-精密电子天平(上海恒平科技有限公司...
皮肤创伤实验
皮肤创伤实验 土党参多糖促进小鼠皮肤创伤愈合作用影响 1 实验分组及其给药 实验设计5个组,一个模型组,一个阳性对照组(给予初元),三个给药组(100 mg/kg、200mg/kg、400 mg/kg)。每组20只。模型组给予CMCNa(0.2ml/10g).每天一次。小鼠适应性饲养3d后开始造模。 试剂:羟脯氨酸试剂盒(南京建成,批号:20110303);红细胞稀释液(安徽省巢湖市弘慈医疗器械有限公司,批号:20100702);白细胞稀释液(自制)。 2材仪器料 仪器:JA2003-精密电子天平(上海恒平科技有限公司生产),连续波长酶标仪(MAX-190,美国MD公司生产),Centrifg 5418-离心机(Germany生产)。JNOEC XS-212-202型显微镜(南京江南光电股份有限公司)。手术刀一套,细胞计数板。数码相机,病理图文分析系统v3.0版。 2手术 小鼠空腹给药后30min,用10%水合氯醛麻醉小鼠,剪去背部毛发,与脊柱两侧各做0.8cm*0.8cm的两个创面,创面要求剪去小鼠全层皮肤,创面不给予缝合,不给予抗生素。术后小鼠5饲养,没笼4只。 指标检测: 2(1创面愈合率计算 于术后1d 、4d 、7d 、10d、12d 、15d对小鼠创面进行拍摄,用病理图文系统v3.0版进行创面面积大小计算。其结果如下表所示。表1看出,术后4 d,多糖组小鼠及阳性对照组小鼠愈合两比空白组高,低剂量组小鼠与空白组比较,愈合率具有显著性差异,其余三组与空白组比较,差异极其显著(P<0.01)。与阳性对照组比较,低剂量组差异显著,(P<0.05),中剂量组及高剂量组无差异性。 术后7d,与空白组相比。低剂量组小鼠愈合率具有统计学意义(P<0.05),其余三组小鼠与空白组比较,统计学意义极其显著(P<0.01)。与阳性对照组比较,三个给药组无统计学意义。术后10d,与空白组小鼠相比,阳性对照组小鼠和低剂量组小鼠愈合率具有差异显著性(P<0.05),中剂量组小鼠和高剂量组小鼠具有较显著性差异(P<0.01)。与阳性对照组相比,低剂量组和中剂量组小鼠差异显著(P<0.05),高剂量组小鼠差异及其显著(P<0.01)。术后12d,与空白组小鼠比较,阳性对照 组小鼠和低剂量组小鼠愈合率具有差异显著性(P<0.05),中剂量组小鼠和高剂量组小鼠差异极其显著(P<0.01)。术后15d,给药组小鼠创面基本愈合。与空白组小鼠比较,土党参低剂量组小鼠愈合率具有显著性差异(P<0.05),阳性对照组、土党参中剂量组及高剂量组小鼠愈合率具有及其显著性差异(P<0.01)与阳性对照组比较,给药组小鼠愈合率无统计学差异。表1 说明土党参多糖能提高小鼠皮肤创伤愈合率。,并且愈合率与给药剂量之间存在一定的量效关系。 表1 各组小鼠创面愈合百分率(%) 组别 空白组 阳性对照组 CJP-L CJP-M CJP-H 4d 10(54?0.74 13.86?0.36** 11.10?0.89*Δ 12.84?1.29** 13.44?1.46** 7d 27(51?0.56 45.44?0.94** 42.96?5.83* 46.82?7.11** 48.46?9.73** 57.68?0.56 65.47?3.05* 66.21? 1.16*Δ 71.72?2.78**ΔΔ 73.81?0.89**ΔΔ 10d 70.46?1.39 12d 75.94?0.38* 76.56?1.6* 82.79?2.57**ΔΔ 86.75?1.63**ΔΔ 90.91?0.42 15d 96.40?1.17** 92.75?1.66* 98.00?0.71** 99.80?0.89** 与空白组比较 *表示 P<0.05; ** P<0.001; 与阳性对照组比较 Δ表示P<0.05;ΔΔP<0.001 2(2 羟脯氨酸含量检测 羟脯氨酸在胶原蛋白中所占13.4%,在弹性蛋白中占量极少,在其他蛋白中不存在,而胶原蛋白主要分布在皮肤、软骨、血管、腱等处,因此羟脯氨酸能反映结缔组织疾病的胶原蛋白代谢情况。测定羟脯氨酸含量可以判断纤维化程度。 具体方法;4d、7d、10d、15d取术后小鼠创面表皮作羟脯氨酸含量检测。具体操作参照试剂盒说明。其结果如表2所示。从表二可以看出,各剂量组小鼠羟脯氨酸含量都高于空白组小鼠。术后4d,阳性对照组小鼠及其低剂量组小鼠与空白组小鼠相比,羟脯氨酸含量差异有显著性水平(P<0.05),中剂量组及高剂量组小鼠与空白组相比,差异及其显著(P<0.01)。与阳性对照组相比,高剂量组具有显著性差异(P<0.05),术后7 d,与空白组小鼠相比,中剂量组小鼠羟脯氨酸含量具有显著性差异,高剂量组及阳性对照组小鼠羟脯氨酸含量具有极显著性差异(P<0.01),与阳性对照组小鼠比较,三个剂量组小鼠羟脯氨酸含量低于阳性对照组,低剂量组小鼠及中剂量组小鼠羟脯氨酸含量与阳性对照组相比有显著性差异(P<0.05)。术后12d,与空白组小鼠相比,低剂量组小鼠羟脯氨酸含量有显著性差异,(P<0.05),阳性对组组及中剂量组、高剂量组小鼠羟脯氨酸含量具有极显著性差异(P<0.01)。与阳性对照组相比,低剂量组小鼠和羟脯氨酸含量低与阳性对照组,中剂量组小鼠及高级组小鼠羟脯氨酸含量高于阳性对照 组,高剂量组小鼠羟脯氨酸含量和阳性对照组有统计学意义(P<0.05)。术后15d,与空白组小鼠相比,低剂量组小鼠羟脯氨酸含量具有显著性差异(P<0.05),其余3个组小鼠羟脯氨酸含量与空白组相比差异及其显著(P<0.01)。与阳性对照组相比,低剂量组和高剂量组小鼠羟脯氨酸含量低于阳性对照组,低剂量组小鼠羟脯氨酸含量与阳性对照组比较差异有显著性(P<0.05),高剂量组小鼠羟脯氨酸含量高于阳性对照组。说明土党参多糖能够提高小鼠羟脯氨酸含量、促进小鼠术后恢复的功能。 表2术后小鼠羟脯氨酸含量变化(μg/mg) 组织 组别 空白组 阳性对照组 CJP-L CJP-M CJP-H 4d 0(3124?0.69?0.05* 0.52?0.07* 0.69?0.03** 0.97?0.07** 0.04 Δ 7d 0.43?0.06 1.40?0.22** 0.63?0.03Δ0.77?0.12*1.07?0.03** Δ ΔΔ Δ 1.01?0.05 12d 1.21?0.17* 1.61?0.19** 1.89?0.10** 2.00?0.14** Δ 1.79?0.43 15d 2.69?0.74** 2.29?0.14*2.57?0.19** 2.74?0.22** Δ CJP-L CJP-M CJP-H 组别 空白组 阳性对照组 与空白组比较 *表示 P<0.05; ** P<0.001; 与阳性对照组比较 Δ表示P<0.05;ΔΔP<0.001 2(3白细胞含量检测 手术过后,因炎症反应,白细胞数目会增加,白细胞数量升降体现了免疫功能的变化。 具体方法:于术后1d 、7 d、10d、15d小鼠眼眶取外周血20ul至于0.38ml 3%的醋酸美蓝溶液中,用于白细胞计数。 表3说明,术后1d,小鼠白细胞都急剧上升,给药组小鼠上升比空白组高,切有极显著性差异(P<0.01),土党参三个剂量组小鼠白细胞含量都比阳性对照组高,切差异及其显著(P<0.01)。7 d后,小鼠白细胞数量有所下降,表现为空白组小鼠白细胞高于给药组小鼠,切有极显著性差异(P<0.01),阳性对照组相比,土党参三个剂量组小鼠白细胞比阳性对照组低,中剂量和高剂量组具有显著性差异。术后10d,各组小鼠白细胞仍然在下降,给药组小鼠下降得比空白组低, 高剂量组具有显著性差异。15d以后,各组小鼠白细胞恢复到正常水平。无统计 学意义。 表3小鼠术后白细胞数量变化表 CJP-L CJP-M CJP-H 组别 空白组 阳性对照组 155.67?7.21 217.00?11.36** 265.00?12.42**299.00?343.40?4.18**ΔΔ 1d ΔΔ 18.58**ΔΔ 124.25?8.01 108.80?8.014** 105.25?3.843* 87.75?4.15**92.20?1.66**Δ 7d Δ 65.00?0.71 61.25?12.60 10d 60(00?4.71 58.12?6.30 51.25?05.76* 36.50?2.10 38.20?0.74 33.50?1.93 39.60?2.25 41.00?2.20 15d 与空白组比较 *表示 P<0.05; ** P<0.001; 与阳性对照组比较 Δ表示P<0.05;ΔΔP<0.001 2(4 土党参多糖对小鼠红细胞数量变化影响 小鼠手术后失血,红细胞数量会有下降,因此检测小鼠红细胞数量变化可反映造血功能的变化。 方法:于术后1d 、7 d、10d、15d小鼠眼眶取外周血10ul与2ml红细胞稀释液中,显微镜先计数红细胞数目。其结果如表4所示。 术后1d,小鼠术后失血,由于应激反应,小鼠红细胞会稍微升高,但低于正常值,从表4可以看出,,各组小鼠红细胞比空白组高,且小鼠红细胞数量与空白组相比差异及其显著(P<0.01),土党参低剂量组和中剂量组小鼠有极显著性差异(P<0.01)。术后7d,应激反应过后,给药组小鼠红细胞开始下降,而空白组小鼠红细胞升高,但空白组小鼠红细胞数量任然低于给药组,且阳性对照组、中剂量组、高剂量组小鼠红细胞与空白组小鼠相比具有极显著性差异(P<0.01)。中剂量组、低剂量组小鼠红细胞数目低于阳性对照组,且有极显著性差异(P<0.01)。高剂量组小鼠红细胞数量高于洋相对照组小鼠。10d后,各组小鼠红细胞数量开始升高,与空白组小鼠相比,各给药组小鼠红细胞数量较空白组高,差异及其显著(P<0.01),与阳性对照组相比,低剂量、中剂量组小鼠红细胞数量低于阳性对照组,且差异极其显著(P<0.01),高剂量组小 鼠红细胞数量高于阳性对照组。术后15d,各组小鼠红细胞数量恢复到正常水平,个给药组小鼠红细胞数量任然高于空白组,阳性对照组、中剂量组、高剂量组小鼠红细胞数量与空白组相比差异及其显著(P<0.01)。低剂量组、中剂量组小鼠红细胞数量低于阳性对照组小鼠,且具有极显著性这一,高剂量组小鼠红细胞数量高于阳性对照。表4说明土党参多糖能够提高术后小鼠红细胞数量,增加造血功能的作用。 表4 术后小鼠红细胞数量变化 组别 空白组 阳性对照组 CJP-L CJP-M CJP-H 191.50?13.22 379.67?12.39** 273.00?12.39**294.00?345.20?18.95** 1d ΔΔ 7.73**ΔΔ 221.75?13.46 314.40?4.12** 231.75?9.313Δ262.40?335.40?6.61** 7d 10.30**ΔΔ Δ 286.25?2.78 373.00?8.72** 344.75?2.17**Δ345.75?10d 375.75?5.16** Δ 6.67**ΔΔ 417.50?5.00 572.40?2.18** 425.25?8.58Δ498.00?548.75?16.38** 15d Δ 22.58**ΔΔ 与空白组比较 *表示 P<0.05; ** P<0.001; 与阳性对照组比较 Δ表示P<0.05;ΔΔP<0.001 小鼠术后变化体重曲线
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