更年舒片的质量标准研究

更年舒片的质量标准研究 第29卷第1期 2008年2月 首都师范大学学报(自然科学版) JournalofCapitalNormalUniversity (NaturalScienceEdition) No.1 Feb.,2008 更年舒片的质量标准研究 王英锋梁建贞晏利芝刘锁兰 (首都师范大学分析测试中心,北京100037) 摘要 目的:建立更年舒片的质量标准.方法:采用薄层色谱法(TLC)对方中当归,牡丹皮,淫羊藿进行定性鉴别;采用 高效液相色谱法测定更年舒片中芍药苷的含量.结果:TLC色谱中均能明显地检出当归,牡丹皮和淫羊藿;芍药苷 含量测定线性范围O.032,0.160/~g/mL(r=0.9998.n=5),平均回收率为100.9%,RSD为2.89%. 结论:该方法准 确可靠,可用于该制剂的质量控制. 关键词:更年舒片,芍药苷,薄层色谱法,高效液相色谱法. 中图分类号:R927.1 更年舒片(WS3一B.270897)收载于部颁标准中 药成方制剂第十四册,由熟地黄,五味子,牡丹皮,益 母草,淫羊藿,当归等十六味药组成,临床上具有滋 化淤调经,调气温肾,营养神经, 补肝肾,养阴补血, 调节代谢功能.适应于更年期障碍引起的月经不调, 头昏,心悸,失眠等.为控制产品质量,作者对方中当 归,牡丹皮,淫羊藿进行了薄层鉴别,参考有关文献 [1,2],采用HPLC测定了更年舒片牡丹皮中芍药苷 的含量,为更年舒片的质量控制提供了定性和定量 的检测方法,方法简便,准确可靠. 1仪器与试药 1.1仪器 Waters717plusAutosampler,Waters600 controller,WatersIn—LineDegasserAF,Waters2996 photodiodeArrayDetecter,EmpowerKQ一500DB型数控 型超声波清洗器. 1.2对照品与试剂 标准品:芍药苷对照品(中国药品生物制品检定 所批号:0736.200118);乙腈为色谱纯,水为超纯 水,其余试剂为分析纯.阴性对照品按处方药味除去 被测药材,其余药味,按更年舒片的生产工艺及供试 品溶液的制备方法制备,即得.更年舒片对照药材由 收稿日期:2007.O1.08 46 中国药品生物制品检定所提供. 2定性鉴别 2.1当归的鉴别 取样品3片,研细,加乙醚20mL,超声处理20 min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1mL使溶解,作为 供试品溶液.另取当归对照药材lg,同法制成对照 药材溶液.另按处方比例称取当归外的其余药味,按 样品制备工艺和供试品溶液的处理方法,制成缺当 归药材的阴性对照溶液.照薄层色谱法试验,吸取 上述三种溶液各5,分别点于同一硅胶G薄层板 上,以正己烷.乙酸乙酯(4:1)为展开剂,展开,取出, 晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应位置有相同颜色的荧光斑 点,阴性对照无此斑点,见图1. 】2345 图1当归的定性鉴别TLC图 (1,3,5为样品:2为阴性;4为对照药材) 第1期王英锋等:更年舒片的质量标准研究 2.2牡丹皮的鉴别 取样品l0片,研细,加水40mL,超声处理30 rain,用乙醚萃取两次,每次40mL,合并乙醚液,60? 水浴蒸干乙醚,残渣加丙酮1mL使溶解,作为供试 品溶液.另取牡丹皮对照药材5g,加乙醚50mL,超 声处理20min,滤过,滤液挥干,残渣加丙酮2mL使 溶解,作为对照药材溶液.另按处方比例称取牡丹皮 外的其余药味,按样品制备工艺和供试品溶液的处 理方法,制成缺牡丹皮药材的阴性对照溶液.照薄层 色谱法试验,吸取上述三种溶液各1OL,分别点于 同一硅胶G薄层板上,以正己烷.乙酸乙酯(4:1)为 展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%盐酸酸性三氯化 铁乙醇试液,置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色 谱中,在与对照药材色谱相应位置有相同颜色的荧 光斑点,阴性对照无此斑点.见图2. 图2牡丹皮的定性鉴别TLC图 (1,3,5为样品:2为阴性;4为对照药材) 2.3淫羊藿的鉴别 取样品7片,研细,加乙醇30mL,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1mL使溶解,作为 供试品溶液.另取淫羊藿对照药材2g,加乙醇60 mL,同法制成对照药材溶液.另按处方比例称取淫 羊藿外的其余药味,按样品制备工艺和供试品溶液 的处理方法,制成缺淫羊藿药材的阴性对照溶液.照 薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试 验,吸取上述三种溶液各40,分别点于同一硅胶 H薄层板上,以乙酸乙酯丁酮.甲酸.水(10:1:1:1) 为展开剂,展开,取出,晾干,喷以三氯化铝试液,置 紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照 药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴 性对照无此斑点.见图3. 3含量测定 3.1色谱条件 YMCpackedODS—A(250×4.6mm,5Ilm)色谱 图3淫羊藿的定性鉴别TLC图 (1,3,5为样品:2为阴性;4为对照药材) 柱,流动相:乙腈一水(14:86),流速:1mL/min,检测 波长::230nm,柱温:室温,结果见图4. 1 1 A ———]—丁—?——1一/m’n 图4更年舒片HPLC图 A.对照品;B.样品;C.阴性;1.芍药苷 3.2对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒重的芍药 苷对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.082mg的 溶液,即得. 3.3供试品溶液的制备 取样品10片,研细,取0.50g,精密称定,置具 塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL称定重量,超声提 取lh,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的 重量,摇匀,滤过,取续滤液,用0.45m微孔滤膜滤 过,作为供试品试液. 3.4线关系的考察 精密称取芍药苷对照品(经五氧化二磷减压于 燥至恒重)0.80mg置10mL容量瓶中,加甲醇溶解 47 首都师范大学学报(自然科学版) 并稀释至刻度,摇匀,从中分别精密吸取4,8,l2,l6, 20L,分别进样,在上述色谱条件下测定.以进样量 (g)为横坐标(X),以测得峰面积为纵坐标(Y),绘 制标准曲线,得回归方程为 Y:2×10X一7510.1 结果表明,进样量在0.032,0.160g线性关系 良好(r:0.9998). 3.5精密度试验 精密吸取同一份供试品溶液l0,重复连续进 样6次,测定芍药苷峰面积值.结果,芍药苷RSD为 0.79%,表明精密度良好. 3.6重现性试验 取同一批样品粉末5份,分别制备供试品溶液, 在上述色谱条件下测定峰面积,计算得芍药苷的平 均含量为686.6g/g,RSD0.87%,表明方法重现性 良好. 3.7稳定性试验 取供试品溶液,分别在0,1,2,4,8,12,24h进行 HPLC测定,所测峰面积RSD1.92%,表明芍药苷在 24h内基本稳定. 3.8加样回收率试验 精密称取已知含量的同批号(20051203)样品5 份,分别加入己知浓度的芍药苷标准品溶液,按供试 品溶液的制备方法进行制备,进行HPLC分析,记录 芍药苷的峰面积,计算含量.芍药苷平均回收率为 100.9%,RSD为2.89%. 3.9含量测定 取三批样品,按供试品溶液制备方法制备.分别 精密吸取对照品与供试品溶液各l0L,注入液相色 谱仪,记录色谱峰面积,计算各批样品的芍药苷含 量.结果见表1. 表1更年舒片中芍药苷含量测定结果 样品批号含量(t~g/g) 2oo5l20l 2o051202 20o51203 692.8 689.1 682.6 4讨论 1)本实验对更年舒片中的药材作TLC鉴别实 验,结果更年舒片中当归,牡丹皮,淫羊藿三味药与 阴性对照品比较,斑点集中,层次清晰,重现性好,稳 定可靠,且无干扰.而益母草,泽泻,艾叶,五味子与 阴性对照品比较有于扰,所以未列入质量标准. 2)因本方复杂,君药熟地黄中成分不稳定,故对 臣药牡丹皮进行含量测定,实验中比较了超声提取 和加热回流提取产品中芍药苷,以及用甲醇超声提 取的时问对样品中芍药苷含量的影响,从而确定了 上述的样品处理方法.本文建立的芍药苷定量分析 方法,分离度好,准确度高,为该药品的质量控制提 供了简洁,科学的方法. 参考文献 [1]李静.HPLC测定舒胃颗粒中芍药苷的含量[J].中国中药杂志,2006,31(4):349. [2]梁春华,哈永红,田洪斌.高效液相色谱法测定更年宁中芍药苷含量[J].药物鉴 定,2005,14(1O):3O一31 [3]国家药典委员会编.中国药典[M].一部,附录VIB试验.北京:化学工业出版社,2005. 48 第1期王英锋等:更年舒片的质量标准研究 StudiesontheQualityStandardofGengnianshuTablets WangYingfengLiangJianzhenYanLizhiLiuSuolan (TheCenterforInstrumentalAnalysisofCapitalNormalUnive~ity,Beijing100037) Abstract 0bjective:TosetupthequalitystandardforGengnianshuTablets.Method:RadixAngelicaeSinennsis,Cortex MoutanandEpimedillmwereidentifiedbyTLCmethod.ThecontentofpaeonifiorinwasdeterminedbyHPLC.Result: RadixAngelicaeSinennsis,CortexMoutanandEpimedillmcouldbedetectedbyTLC.Thepaeoniflorinshowedagood linearcorrelationintherangeof0.064, 0.320t~g/mL(r=0.9998,n=5).TheaveragrecoveryWas1O0.9%(RSD= 2.89%).Conclusion:Themethodisconveninentandaccurate.ItissuitableforqualitycontrolofGengnianshutablets. Kevwords:Gengnianshu,paeoniflorin,TLC,HPLC. (接第45页) DeterminationofIsoalantolactoneinInulaHeleniumIbyGC WangYingfengTanXiangxiangGuoXueqingRezengCaidan. (1.CenterofAnalysisandTest,CapitalNormalUniversity,Beijing100037; 2.ResearchCenterofChineseandTibetanMedicine,QinghaiUniversityMedicalCollege,Xining810001) Abstract TodeterminethecontentsofisoalantolactoneinInulaheleniumIbyGCmethodonacapillarycolunm(HP一5MS,30 mx0.25mm×0.25m).Heliumascarriergasandflameionizationdetection.Theaveragerecoverieswere97.43%, withRSD1.90%(n=5).11llemethodestablishedissimple,accurateandspecificandwillbeappliedtocontrolthe qualityofInulaheleniumI. Keywords:InulaheleniumI,isoalantolactone,GC. 作者简介王英锋,男,首都师范大学化学系分析测试中心主任,研究方向:天然药物分析 49