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次最低抑菌浓度抗生素对双歧杆菌粘附的影响

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次最低抑菌浓度抗生素对双歧杆菌粘附的影响次最低抑菌浓度抗生素对双歧杆菌粘附的影响 提要本文观察了八种杭生素在次最低抑菌浓度(Sub-MIC)下对双歧杆菌 和体外培养肠上皮细胞间粘附的影响。结果表明,次最低抑菌浓度的抗生素均能 显 著地抑制双歧杆菌的粘附,青霉素和万古霉素对双吱杆菌耘附的抑制有剂贡及时 间 效应。提示杭生素抑制双吱杆菌的枯附可能是其引起肠道徽生态失衡的一条重要 途 径。 关键词双吱杆菌粘附杭生素 大量的研究证实,抗生素在低于最 低抑菌浓度(MIC)时,能对细菌的形态, 超微结构及生长速率造成影响。体外次 最低抑菌浓度((Sub-MIC...
次最低抑菌浓度抗生素对双歧杆菌粘附的影响
次最低抑菌浓度抗生素对双歧杆菌粘附的影响 提要本文观察了八种杭生素在次最低抑菌浓度(Sub-MIC)下对双歧杆菌 和体外培养肠上皮细胞间粘附的影响。结果明,次最低抑菌浓度的抗生素均能 显 著地抑制双歧杆菌的粘附,青霉素和万古霉素对双吱杆菌耘附的抑制有剂贡及时 间 效应。提示杭生素抑制双吱杆菌的枯附可能是其引起肠道徽生态失衡的一条重要 途 径。 关键词双吱杆菌粘附杭生素 大量的研究证实,抗生素在低于最 低抑菌浓度(MIC)时,能对细菌的形态, 超微结构及生长速率造成影响。体外次 最低抑菌浓度((Sub-MIC)的抗生素能够 抑制大肠杆菌,酿脓链球菌及淋球菌对 宿主细胞的粘附,并以此作为应用小剂 量抗生素预防感染的依据〔‘,’,”.由于机 体正常菌群形成的生物屏障在抵御外来 菌入侵方面起着至关重要的作用,所以 探讨次最低抑菌浓度对正常菌群的影 响,有着重要的意义。本文观察了八种 常用抗生素在次最低抑菌浓度下对双歧 杆菌粘附的影响。 1材料与方法 1. 1细菌:双歧杆菌1027株为本 所从健康婴儿粪便分离,经多次生化鉴 定为青春型双歧杆菌.将细菌接种于硫 乙醇酸盐液体培养基增菌,37?厌氧培 养48小时后,用耗尽培养液上清制成菌 悬液,调整浓度为1X10,一1 X 108/ml o 1. 2抗生素敏感实验:实验用氯霉 素、新霉素、轻氨卞青霉素、灭滴灵、青 霉素,万古霉素,卡那霉素和庆大霉素 为市售。按试管稀释法进行药物敏感实 验〔幻,求出各种抗生素的最低抑菌浓度 (MIC)。 1. 3次最低抑菌浓度(Sub-MIC) 抗生素对细菌粘附的影响: 1. 3. 1 1/SMIC抗生素对细菌的 处理:双歧杆菌悬液分别加入1/SMIC 的各种抗生素,厌氧培养6小时后,进 行粘附试验,用抗生素稀释液作对照。 1.3.2不同浓度抗生素对细菌的 处理:双歧杆菌悬液分别加入1/5, 1/ 10, 1/20, 1/40MIC的青霉素及万古霉 素,厌氧培养6小时后,进行粘附试验, 用抗生素稀释液作对照。 1.3.3对细菌处理时间的影响:双 歧杆菌悬液加入1/SMIC的青霉素及万 古霉素,厌氧培养1/2, 1, 3, 6小时后, 分别进行粘附试验,用抗生素稀释液作 对照。 1. 4细胞:肠上皮细胞系Lovo细 胞引自本校病理教研究室。Lov。细胞按 常规传代培养于含10%小牛血清RP- MI—1640培养液中,细胞接种于含 盖玻片的培养皿中,待在盖玻片上形成 中国徽生态学杂志1996年第8卷第5期 单层细胞后,进行粘附试验。 1. 5粘附试验:取出细胞玻片,经 pH7. 4PBS清洗一次后,加入抗生素处 理的细菌悬液。37?湿盒温育2小时。 pH7. 4PBS漂洗6次,自然千燥,甲醇固 定,革兰氏染色,高倍镜下计数50个细 胞粘附的细菌数,计算平均数及差。 2结果 八种抗生素对双歧杆菌的最低抑菌 浓度(M IC)及1/5MIC抗生素对双歧杆 菌和肠上皮细胞粘附抑制的结果见附 表。可以看出,次最低抑菌浓度抗生素 与双歧杆菌温育6小时后,均能显著地 抑制双歧杆菌对体外培养肠上皮细胞的 粘附。 附表1/SMIC杭生素对>t}歧杆菌钻附的影响 变产生了对抗生素的耐药性,或使得原 来的耐药细菌大量增殖.这样造成肠道 菌群失调及抗生素相关性肠炎。本研究 发现八种常用抗生素在次最低抑菌浓度 下均能显著地抑制双歧杆菌对肠上皮细 胞的粘附,因为双歧杆菌是人体肠道最 主要的生理性细菌,它对宿主细胞的粘 附及定植在维持肠道正常菌群的稳定与 平衡中起主导作用。所以本结果说明,抗 生素抑制双歧杆菌的粘附可能是其引起 肠道微生态失衡的另外一条重要的途 径。这在临床工作中也有实际意义,提 示即使口服小剂量抗生素,也应及时补 充生理性细菌。 抗生素M IC 抓每素 新林素 `e',而青霉 素和四环素则均能使淋球菌和脑膜炎球 菌的菌毛减少,粘附力降低〔3).各种抗生 素抑制双歧杆菌粘附的机理还有待研 C3J C4) 〔5〕 参考文献 C6) Scheld WM,et al. Bacterial adhesion in the pathogenesis of infective endocarditis. J. Clin. Invest. 1981,68. 1381一1384. Tylewska S. et al. Effect of subinhibitory con- centrations of antibiotics on the adhesion of strptococcus pyogenes to pharyngeal epithelial cells. Antimicrobial. Agents and Chemothera- py. 19811 20 (5):563一566 C7) Stephene DS. et al. Loss of pill and decreased attachment to human cells by Neisseria meningitidis and Neisseria gonorrhoeae ex- posed to subinhibitory concentrations of an- tibiotidis Infect. Immun. 19841 46 (2):507 一513. 熊德鑫.临床厌氧菌检验中国科学技术 出版社1994北京P72-87. 蔡子徽,等。对两株双歧杆菌耐药性及其影响 因素的研究(摘要)中国徽生态学杂志 19941 6 (5):59. 凌代文,等。双歧杆菌对抗菌紊的敏感性微 生物学通报19961 23 (IO 27-33 吕虎,等.抗生素对细胞粘附的影响微生态 学研究中国微生态学杂志社1995: P45 - 49. Alkan ML&Beachey EH. Excretion of lipotei- choic acid by group A streptococci. J Clin In- vest 19781 671一677. 0 究 、J ,立 廿., C2) C8) (修回日期:96-4-4) EFFECT OF SUBINHIBITORY CONCENTRATIONS OF ANTIBIOTICS ON ADHESION OF HUMAN BIFIDOBACTERIAL STRAINS TO CULTURED HUMAN INTESTINAL EPITHELIAL CELLS Zheng YueJie,et al. Institute of Gastroenterology of PLA,Guangzhou 510515 Abstract Effect of subinhibitory concentrations of antibiotics on the adhesion of human bifidobacterial strains to cultured human intestinal epithelial cells was inves- tigated. Results showed that subinhibitory concentrations of antibiotice may de- crease bifidobacterial adhesion to intestinal epithelial cells in vitro significantly. Penicillin and vancomycin reduced bifidobacterial adhesion to intestinal epithelial cells dose一dependently and time一dependently. The results suggest that antibi- otics might influence intestinal bacterial microecology by mechanism of inhibition of bifidobacterial adhesion to intestinal epithelial cells. Key Words Bifidobacteria Adherence Antibiotics
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