溶菌酶活力测定方法的改进_cropped

溶菌酶活力测定的改进_cropped -6 1试样中Cu(?)含量的测定 对铜 1 × 10的 Cu(?)作 8 次平行 准偏差为 1.58%。 本法测得平NaDDTC 法测相对偏 RSD(n=5,%)差 **均值(mg/L) 得平均值(mg/L) 2.11样品分析 本法NaDDTC 法 萄酒0.7760.7602.372.82 通过五类食品预处理的研究，样萄酒 0.495 0.488 2.83 2.85 到线性范围内才能进行测定，一般情乐 2.10 2.00 1.01 6.10 水 1.85 1.77 1.32 5.65 饮料和果酒的稀释倍数为 100( 并要除2.35 4.34 水 2.40 0.55 对奶粉和白砂糖的样液浓度为 2.000g** 0.064 0.61 0.032 1.86 骤按实验方法 2.4 进行，同时作标准 ** 0.09 0.93 见表 1 。 ** 3.6 1.46 0.0585.0*** 3.5 1.99 3.94 1.06 粉 参考文献:3.84 2.34 1.79 1.58 *** 粉1.70 5.33 2.58 2.02 *** 糖 [1]杭州大学化学系.分析化学手册 第一分册2.52 3.29 3.13 1.50 *** 糖版社,1979. 3.03 1.85 *** 糖 [2]Eberman.Toxic Metals and Their Analysis N5;浓度单位为 mg/ml;浓度单位为 mg/kg 。 ** *** Ltd,1980. [3]陈国珍等.荧光分析法[M].科学出版社,199 时进行线性回归，对于水、果酒、软饮料，[4] Bemner AJ,Harris ED Biochem,1995,226(1)-3[5] 程? F=1.0246x+8.598 × 10相关系数 Otnos Teshima NL Andlyst,1996,121(10):1[6] 598。 于奶粉和白砂糖，回 ChengxiaoZhang,ZhujunZhang.Anulyst,199[7] 归方程 邓勃.数理统计方法在分析测试中的应用[ -2 版社,1984.F=1.0037c+8.502×10相关系数r=0.9896。 溶菌酶活力测定方法的改进 谢红伟 (贵州大学，贵阳550025) 要:本文以壳聚糖代替溶壁微球菌作底物测定溶菌酶的活力。实验证明:在 55?，pH=4.5 时， 反应速度。酶浓度在 0,4.5U/ml 范围内符合郎伯—比尔定律，回归方程为 Y=0.2173X , 0.0114，线 为γ =0.9998。 键词:溶菌酶;壳聚糖;酶活力;溶壁微球菌 stract:ChitosanwasusedtoreplacethesubstrateM.Lysodeikticustodeterminetheenzymeactivityoflysozyme at the optimum temperature and optimum pH were 55?and 4.5 respectively and it was accordant with the lambe en the enzyme concentration was 0 ,4.5U/ml.The regression equation is Y=0.2173X,0.0114 with linear co 溶菌酶可以内切的方式作用于壳聚糖，断开糖链 - 上的β1 ，4 糖苷键。因此，通过测定溶液中还原 糖的浓度，就可间接求出溶菌酶活力。 2.3.2方法 将浓度为1.200g/L的壳聚糖乙酸盐溶液(pH=4.5)60ml 与浓度为 100U/ml 的溶菌酶溶液 2.0ml 在 55?下 反应 60min 后，取出6.0ml 至具塞试管中，加入1.0ml 0.1mol/L 的碱性铁氰化钾溶液，摇匀，沸水中加热 3.5 酶浓度对酶活的影响 在 55?，底物浓度为 1.2g/L(pH=4 改变酶液浓度，发现溶菌酶浓度在0.5, 内，随酶液浓度增加，酶活力也增大， 关系。其回归方程为 Y2=0.2173X2-0.01 γ系数为2=0.9998。当酶液浓度增大到 5 随酶液添加量的增大，酶活力反而有下 图 5 所示) 。这是由于产物抑制了酶的 定，此即为酶反应初速度。120min 后，还原 度增加缓慢，酶反应速度降低，反应趋于平 能是由于反应的进行使底物浓度降低，导致 速度下降。 H 值对酶活的影响 4结 语 本文分别以溶壁微球菌和壳聚糖作 酶的活力，得到两条回归方程: γ Y1=0.0005X1 , 0.0045，1=0.9977 γ 及 Y2=0.2173X2 , 0.0114，2=0.9 图 3 可见，酶反应的最适 pH 值为 4.0,5.0， 对以上两个回归方程进行统计检验 活性最大，达到最大酶反应速度。本实验选 γ 回归方程 1 的相关系数为1=0.997 pH 为 4.5。 2-5 S1 =Q/(n-2)=3.27 × 10 ; 底物浓度对酶活的影响 γ 回归方程 2 的相关系数为2=0.999 2-5 S2 =Q/(n-2)=1.734 × 10 。 γ 查相关系数中的临界值为0.05,5=0. α著水平=0.01，查 F 分布表，F0.01(5,5) γγ2 均大于0.05,5，说明所建立的两条回 义的。 -5-5 而F=3.27×10/1.734×10=1.89 明两条回归直线的精度方差没有显著性 聚糖代替溶壁微球菌作底物测定溶菌酶 是可行的。