【word】 龙花胶囊对环磷酰胺所致血小板减少症小鼠骨髓巨核细胞的影响

【word】 龙花胶囊对环磷酰胺所致血小板减少症小鼠骨髓巨核细胞的影响 龙花胶囊对环磷酰胺所致血小板减少症小 鼠骨髓巨核细胞的影响 陕西中医2011年第32卷第12期1669 大剂量组及戊酸雌二醇组和青年对照组能显着升高血清IgA,戊酸雌二醇组和青年对照组能显着升高血清IgG,见3. 表3妇科养荣胶囊对老年大鼠免疫球蛋白的影响(?5) 注:组I司进行t检验,与更年期对照组比?P<0.05,?P<0.01 3结论与讨论妇科养荣胶囊是西安安得药业有限责任剂量组不影响大鼠体重及物质代谢,能显着升高血清IgM,妇 公司在经典药方”八珍汤”基础上,增加部分补血,补肾药物研科养荣胶囊中,大剂量组能显着升高血清IgA,提示其具有免疫 制成的复方胶囊剂,内容物呈棕褐色.该药由当归,熟地黄,A调节的作用,表明妇科养荣胶囊对更年期妇女免疫力低下有较 芍,川I芎,益母草,黄芪,麦冬,阿胶,茯苓,甘草等组成.有补养好的治疗效果. 气血,疏肝解郁,祛瘀调经的功效,可用于气血不足,肝郁不舒,参考文献 月经不调,头晕目眩,血漏血崩,贫血身弱及不孕症.根据文献[1]谢人明,杨红莲,孟建国,等.妇科养荣胶囊对贫血治 报道妇科养荣胶囊有纠正失血性贫血及乙酰苯肼化学药品引疗作 用的实验研究LJ].陕西中医药研究,2005,10(3):40—42. 起的贫血,还可对抗环磷酰胺引起的小鼠白细胞降低作用,还[2]谢人明,孟建国,杨红莲,等.妇科养荣胶囊扶正固本 有显着耐寒,耐缺氧,增强体力作用,有显着的扶正固本作用.作用的实验研究[J].中华现代中医杂志,2006,2(1)38—40. 本药还有提高免疫功能作用.[3]谢人明,杨红莲,孟建国,等.妇科养荣胶囊对机体免 本实验采用生育一胎后的9月龄SD雌性大鼠作为更年期疫功能的作用[J].中华现代中医杂志,2006,2(2)38—40. 大鼠模型,考察妇科养荣胶囊对体重,生化学指标及血液免疫(收稿2011—07—09;修回2011—08—12) 球蛋白IgA,IgM,IgE的影响.实验结果显示妇科养荣胶囊3个 龙花胶囊对环磷酰胺所致血小板减少症小鼠骨髓巨核细胞的影响 张亚密王希胜赵艳莉王院春张莉莉?杜鹃? 陕西中医学院附属医院(成阳712000) 摘要目的:观察龙花胶囊对环磷酰胺所致血小板减少症小鼠骨髓巨核细胞的影响.方法:将60 只昆明小鼠按完全随机分为空白对照组,模型组,巨和粒组,龙花胶囊小剂量组,中剂量组 和大剂量组,每组10只,腹腔注射环磷酰胺造模,造模成功后开始给药.结果:与模型组对 比较,中药大,中剂量组,巨和粒组均能促进骨髓巨核细胞增值,中药 大剂量组与巨和粒组 相比无显着性差异(尸>0.05),中药中,小剂量组与巨和粒组相比有显着性差异(尸<0. 05).结论:一定浓度的龙花胶囊药液能促进骨髓巨核细胞增值. 主词血小板减少症/中医药疗法龙花胶囊/药效学小鼠实验研究 【中图分类号】R558【文章标识码】A【文章编号】1000—7369(2011)12—1669,02 龙花胶囊系陕西中医学院附属医院肿瘤内科王希胜主任 医师的研究精华,临床用于治疗恶性肿瘤放,化疗后血小板减 少症,疗效确切.我们采用腹腔注射环磷酰胺复制成化疗后血 小板减少症模型,观察龙花胶囊对模型小鼠骨髓巨核细胞的影 *陕西省教育厅基金项目(编号:09JK413?2009—201O) ?陕西中医学院(成阳712000) 响. 1与方法1.1实验动物昆明小鼠60只,雄性, 6,8周龄,体重18~22g,购于西安交通大学实验动物中心. 1.2主要试剂及药品中成药龙花胶囊,配方组成:仙鹤 草5Og,花生衣50g,大枣10枚;制备方法:将花生衣乙醇提取 液与仙鹤草,大枣水提取液合并,浓缩,干燥,粉碎,制粒,整粒, 干燥,装胶囊,0.35g/粒(生药含量为0.1675g/~,由陕西中医 1670陕西中医2011年第32卷第12期 学院附属医院制剂中心配制).巨和粒1.5rag/支(齐鲁制药有 限公司,国药准号:$20030016).环磷酰胺200mg/支(山西普德 药业有限公司,国药准号:H14023686). 1.3主要仪器设备超净工作台,电子天平,解剖显微 镜,CKX31一A12PHP—OLIMPUS倒置显微镜,XS2—81光学显微 镜等. 1.4实验方法将6O只雄性昆明小鼠随机分为空白对 照组(A组),模型组(B组),巨和粒组(c组),龙花胶囊小剂量 组(D组),中剂量组(E组)和大剂量组(F组),每组lO只.先用 标准饲料喂养1周后,除空白对照组(A组)外,其余5O只依据 新药研究指导原则及徐氏介绍方法,腹腔注射环磷酰胺 75mg/kg,每日1次,连续3d,以小鼠停药后3d左右血小板计 数下降至注射环磷酰胺前计数的2O,3O为造模成功的标 准.A,B组每日用生理盐水0.4mL/只/天灌胃,C组每日用巨 和粒0.25ug/g皮下注射,D,E,F组分别以42mg/mL,84mg/ ml,168mg/mI浓度的龙花胶囊药液0.4mL灌胃,各组每日 用药1次,连续用药14d.造模后第14天颈椎脱臼处死小鼠,剪 下股骨,用2.5mL注射器吸取少量的PBS缓冲液,向骨髓腔内 快速推入,冲洗出骨髓细胞,继而定量涂片,风干后瑞氏一姬姆 沙染色,油镜下计数1.0mm×1.0ram范围内骨髓巨核细胞数, 每只小鼠本骨髓片制作3张,取平均值. 1.5统计学方法采用SPSS17.0软件进行统计分析, 所得到数值以均数?标准差表示,各组之间的两两比较用配对 t检验,以P%0.05作为显着性差异的标准. 2结果实验结果表明:与模型组对比较,中药大,中 剂量组,巨和粒组均能促进骨髓巨核细胞增值,中药大剂量组 与巨和粒组相比无显着性差异(P>O.05),中药中,小剂量组与 巨和粒组相比有显着性差异(P<O.05).各组小鼠骨髓巨核细 胞计数比较见附表. 附表骨髓巨核细胞计数比较 (个/ram)(?S,n一10) 注:与空白对照组比较?P<0.05,有显着性差异;与模型 对照组比较?尸<o.05,有显着性差异;与巨和粒组比较?P> 0.05,无显着性差异. 3讨论化疗引起血小板减少症是指在化疗期间及之 后较长的一段时间内,化疗药物破坏了骨髓内巨核细胞增殖成 熟与外周血液中血小板衰老之间的平衡,导致外周血血小板不 同程度的降低啪.血小板的产生是由造血干细胞在造血微环境 中经过多种调节因子的复杂作用下逐步完成的.造血干细胞 (Hsc)在造血组织中数量很少,但有多向分化的潜能 ,故也称 多能造血干细胞(PHSC).它具有高度自我更新和自我复制的 能力.对于血小板生成而言,最早的造血干细胞称为全能造血 干细胞,即淋巴一骨髓造血干细胞,它分化为髓系限制性干细 胞,这种干细胞可进一步分化为巨核系祖细胞,继之分化为巨 核细胞,该细胞体积巨大,成熟的巨核细胞边缘部分破裂脱落 后形成血小板,每个巨核细胞平均能生成2000个左右的血小 板].骨髓巨核细胞是生成血小板的物质基础,因而研究骨髓 巨核细胞对于研究血小板减少症具有十分重要的病理学意义. 龙花胶囊是王希胜主任医师在其临床经验方”花红汤”, “龙花汤”基础上经过反复临床验证,根据临床需要及疗效,筛 选,优化处方组合,并经过多种制剂研究研制而成的复方中药 制剂.由仙鹤草,花生红衣和大枣三味组成,花生衣别名长果 衣,落花生衣,红薄皮,性昧甘,涩,平,入肺,脾,肝经,有止血散 瘀,消肿之功;仙鹤草性平,味微苦辛,无毒,人肺,肝,脾经,具 有止血健胃之功效;大枣甘,微温,入脾,胃经,有补中益气,养 血安神,抗癌的功效,大枣水提取物可缓解肿瘤病人放,化疗后 骨髓抑制的不良反应[5].三味相伍健脾养胃,益气摄血.临床观 察花红汤(花生衣50g,仙鹤草30g,大枣1O枚)治疗肿瘤化疗 后血小板减少症5O例,结果7d后血小板升高绝对值>2O× 1O./I者占9O[6;在常规化疗基础上加用龙花汤预防化疗后 血小板减少症,与单纯化疗组对照,结果显示加用龙花汤(花生 衣,仙鹤草各50g,大枣10枚)组较单纯化疗组血小板抑制情况 轻_7].为便于患者服用,将花红汤研制成龙花胶囊.王春霞等用 龙花胶囊治疗化疗后血小板减少患者,治疗组化疗后口服龙华 胶囊连服21d,对照组不治疗.结果显示治疗组血小板减少分 级明显优于对照组I8].本实验结果显示:中药大,中剂量组,巨 和粒组都能促进骨髓巨核细胞增值,中药大剂量组与巨和粒组 相比无显着性差异(P>O.05);由此提示:一定浓度的龙花胶囊 药液能促进骨髓巨核细胞增值,有促进血小板生成的作用. 参考文献 [1]中华人民共和国卫生部药政局.新药(西药)临床前 研究指导原则汇编EM].1993:103. [2]徐叔云.药理实验方法学I-M].北京:人民卫生出版 社,1994:1106—1107. [3]朱红叶,郭勇.恶性肿瘤化疗骨髓抑制的中西医 结合治疗LJ].浙江中西医结合杂志,2008,18(10):615. [4]DeutschVR,TomerA.Megakaryocytedevelopment andplateletpro—duction[J].BrJHaematoI,2006,134(5):453— 466. [5]张民庆,龚惠明.抗肿瘤中药的临床应用[M].北 京:人民卫生出版社,2000:348—349. [6]张杨,王希胜.花红汤治疗肿瘤化疗后血小板减 少症的疗效观察[J].中外健康文摘,2008,(O2):79. [7]张亚密,赵艳莉.”龙花汤”NNgf/Nad,~N,)- 症30例临床观察[J].江苏中医药,2009,41(10):42. L8]王春霞,王希胜.龙华胶囊治疗化疗后血小板减少 症疗效观察[J].实用中西医结合临床,2010,10(1):44—45. (收稿2011一O5—19;修回2011—06—22)