碱性蛋白酶水解脱脂玉米胚芽粕
的研究
年第卷第期 中国油脂
潦%篝器巷
碱性蛋白酶水解脱脂玉米胚芽粕工艺的研究
任健,张明站
齐齐哈尔大学食品与生物工程学院,农产品加工黑龙江省普通高校重点实验室,黑龙江齐齐哈尔
摘要:研究了碱性蛋白酶水解脱脂玉米胚芽粕的最佳工艺。以脱脂玉米胚芽粕为原料,水解
度为指标,在单因素试验的基础上,采用正交试验确定了脱脂玉米胚芽粕最佳水解工艺条件。得出
最佳水解工艺条件为:底物浓度%占水的质量,加酶量%占底物的质量,水解温度?,
.,水解时间 。在此条件下,脱脂玉米胚芽粕的水解度为.%。
水解
关键词:脱脂玉米胚芽粕;碱性蛋白酶;水解
中图分类号:; 文献标志码: 文章编号:???
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肖志刚等”采用国产碱性蛋白酶水解脱脂玉 脱脂玉米胚芽饼粕是玉米胚芽经压榨法或浸提 .、加酶量
法提油后的副产物,是一种以玉米纤维和蛋白质为 米胚芽粕,在温度?、 /、
底
物浓度.%的条件下反应 ,玉米胚芽蛋白提取 主的高营养物质。玉米胚芽蛋白的氨基酸组成较均 率达%左右,这为玉米胚芽肽的开发提供了试验 衡,蛋白质功效比职为.~.,与/
基础。张鸣镝等采用胰蛋白酶对玉米胚芽蛋白 推荐的人类蛋白质
具有较好的一致性, 进行水解,得出最佳水解条件为加酶量%、温度 是一种良好的蛋白质资源?。玉米胚芽提油后,除 ,
?、 .、底物浓度%,在此条件下水解
油脂含量降低外,其他营养成分基本保留在饼粕中, 玉米胚芽蛋白水解度可达.%;高效凝胶过滤色
但国内工厂一般把玉米胚芽饼粕用作饲料,并没有 谱
酶解产物相对分子质量分布发现,水解产物 充分发挥其潜在的生物价值旧。
。本文选
的相对分子质量主要集中在?
玉米胚芽蛋白水解后有利于人体吸收,可作为 用碱性蛋白酶水解脱脂玉米胚芽粕,研究最佳水解 消化系统功能不健全的特定人群的膳食蛋白来源。 条件,以期为玉米胚芽粕的综合利用提供技术支持。 材料与方法
收稿日期:??;修回日期:??
.
试验材料
基金项目:黑龙江省教育厅重点项目
脱脂玉米胚芽粕,实验室自制;碱性蛋白 作者简介:任健,男,教授,博士,主要从事油脂及植 酶酶活万一万/,购自无锡杰
物蛋白制备、改性方面的研究工作
能科生物工程公司;其他试剂均为分析纯。 万方数据
电子天平,一酸度计,飞鸽一
一离心机,电热鼓风干燥箱。
零
.试验方法
警
..脱脂玉米胚芽粕水解工艺
用水将脱脂玉米胚芽粕配制成一定底物浓度的 料液,加入一定量的,在一定的水解温度和水解时间/ 水解条件下,在磁力搅拌器中进行水解反应,每 图加酶量对水解度的影响
隔一定时间测定脱脂玉米胚芽粕的水解度。 ..水解度的测定
..水解温度对水解度的影响
参照文献,采用一滴定法测定水解度。 在底物浓度%、水解 .、加酶量%的
结果与分析
条件下,考察水解温度分别为、、?时,. .
单因素试验
水解脱脂玉米胚芽粕的情况,结果如图所示。 ..底物浓度对水解度的影响
.、加酶量占底
在水解温度?、水解
零
\
物的质量,下同%的条件下,考察底物浓度占水 蓥
的质量,下同分别为%、%、%、%、%时,. 繁
水解脱脂玉米胚芽粕的情况,结果如图 所示。水解时间/
图水解温度对水解度的影响
量
毯
水解温度通过影响酶的活性从而影响酶水解反 萋
应过程。水解温度主要影响反应速率常数,在较低 的水解温度范围内,反应速率常数随水解温度的增 加而增大,使得酶水解
反应速率增加,但超过一定温
水解时间/
度后,酶发生热失活引起酶催化效率下降。由图 图底物浓度对水解度的影响
可知,水解温度对水解脱脂玉米胚芽粕的 由图可知,当底物浓度较小时,酶相对过 影响不太显著,?时水解度较高,故
选择水解温
度为?。
量,底物不足以结合所有的酶,使得一部分酶未能 充分发挥作用;随着底物浓度的增大,酶与底物充 ..水解对水解度的影响
在底物浓度%,水解温度?,加酶量%的
分结合,水解度随底物浓度的增加而增大;当底物 条件下,考察水解分别为.、.、.时,? 浓度过大时,酶无法完全与底物结合,底物相对过 水解脱脂玉米胚芽粕的情况,结果如图
量,水解度逐渐降低。综合考虑,选择最适底物浓 所示。
度为%。
..加酶量对水解度的影响
在底物浓度%、水解 .、水解温度? 枣 \
的条件下,考察加酶量分别为%、%、%、%、 蓬
%时,水解脱脂玉米胚芽粕的情况,结果
如图所示。
由图可知,当加酶量较少时,随着加酶量的增水解时间/ 加,参与反应的酶分子越多,相应的反应速率就越 图水解对水解度的影响
快,水解度增大。当加酶量较大时,酶相对过量,对 底物产生了竞争性抑制,反应速率降低。考虑生产
水解直接影响酶与底物的结合和催化。由 成本,选择加酶量为%。
图可知,脱脂玉米胚芽粕在碱性条件下溶解度较 万方数据年第卷第期
因素水平
高,这是因为脱脂玉米胚芽粕发生了解离,部分脱脂 玉米胚芽粕内部的亲水性基团暴露出来,从而提高 了其水溶性。水解也是影响酶活力的重要因 素,当水解过高或过低时,酶活性都会受到影 响,进而酶水解过程受到抑制。因此,选择最适水解 为.。
。.水解时间对水解度的影响
试验号 空列 水解度/% .
在底物浓度%,水解温度?,加酶量%,. 水解 .的条件下,考察水解时间对脱脂玉米. 胚芽粕水解度的影响,结果如图所示。.. 零.
\.
譬..
. . . .
: . . . .
水解时间/
. . . .
图水解时间对水解度的影响
. . .
.
由图可知,在最适的底物浓度、水解温度、加 结论
酶量和水解条件下,水解度随水解时间的延长 通过单因素试验和正交试验得出碱性蛋 逐渐增加直至趋于稳定,在 时达到最大值。 白酶水解脱脂玉米胚芽粕的最佳条件为:底物浓度 因此,选择水解时间为 。
%占水的质量,加酶量%占底物的质量,水 .正交试验
.,水解时间 。在
解温度?,水解
在单因素试验的基础上,采用正交试验进一步 最佳条件下,脱脂玉米胚芽粕水解度为.%。 优化水解条件。在单因素试验中,水解时间选择 参考文献:
,而水解温度对脱脂玉米胚芽粕水解度影响 . , ,
较小且不易控制,因此以底物浓度、加酶量、水解 .
.
为试验因素,以水解度为指标,设计三因素三水平的 .,
正交试验。因素水平见表,正交试验设计及结果 ,:?.
见表。
刘迎春,杜以文.利用玉米胚芽粕酿造酱油的研究. 由表可知,影响水解脱脂玉米胚芽
山东食品发酵,:?.
粕的因素主次顺序为:加酶量底物浓度水解 肖志刚,段玉敏,徐红华,等.玉米胚芽肽酶解工艺初步 研究.食品工业科技,:?.
,最佳试验组合为:::,即底物浓度%,加酶 张鸣镝,姚惠源.胰蛋白酶水解玉米胚芽蛋白的研究 量%,水解 .。
.中国油脂,,:?.
为了验证该
的可行性,在最佳试验条件下,? .即底物浓度%,水解温度 ,加酶量%,水解 :
.
.,水解时间 ,对脱脂玉米胚芽粕进行
,:?.
次重复验证试验,测得其水解度平均值为.%。
万方数据