【doc】血小板特异性抗体、血小板相关抗体、网织血小板联合检测对血小板减少的鉴别诊断

【doc】血小板特异性抗体、血小板相关抗体、网织血小板联合检测对血小板减少的鉴别诊断 血小板特异性抗体、血小板相关抗体、网织血小板联合检测对血小板减少的鉴别诊断 血栓与l血学2007年第13卷第5期 血小板特异性抗体,血小板相关抗体,网织血小板 联合检测对血小板减少的鉴别诊断 ? 221? 林丽娥,姚红霞,王述文.杨剑国(海南省人民医院血液科海口5703l1) 摘要:目的探讨血小板相关抗体(PAlgG),网织血小板(RP)及血小板特异性抗体(抗GP?b/IIIa,抗GPIb, 抗P一选择素)检测对区别免疫性与非免疫性血小板减少性紫癜的诊断.方法本院75例血小板减少性紫癜患者,其中 35例是特发性血小板减少性紫癜(ITP),40例为非免疫性血小板减少性紫癜,同时以PAlgG,RP及抗GP?b/llIa,抗GP Ib,抗P一选择素进行检测,其中血小板特异性抗体用改良单克隆抗体免疫固相法(MAIPA)检测,PAlgG,RP用流式细胞 术测定.结果35例ITP患者有22例血小板特异性抗体检测至少一项阳性,占61.5%,非免疫性血小板减少患者均为 阴性反应;ITP患者RP平均值30.5?5.5,非免疫性血小板减少患者为26.5?5.0(P>0.05);ITP患者PAlgG均值为 38.5?6.0,非免疫性血小板减少患者为36.6?6.2(P>0.05).结论免疫性和非免疫性血小板减少性紫癜患者RP和 PAlgG结果均显示增高,但差异无显着性;血小板特异性抗体检测是特异性较强的一项指标,对提高ITP确诊率及鉴别 免疫性和非免疫性血小板性紫癜有意义. 关键词:血小板特异性抗体;血小板相关抗体;网织血小板 [中图分类号]R558.2[文献标志码]A[文章编号]1009—6213(2007)05—221—03 TheDifferentialDiagnosisoftheDetectionofPlateletGlycoproteinSpecificAutoantibody, PlateletAssosiatedlgGandReticulaterPlateletsinThrombocytopenicPurpura LINLi—e,YAOHong—xia,WANGShu—wen,YANGJian—guo (DepartmentofHematology,HaiNanProvincialPeople'SHospital,Haikou,570311) Abstract:ObjectiveTostudyplateletassociatedlgG(PAlgG),plateletglycoproteinspecifican— toantibodyandreticulatedplatelets(RP)measurementinthedifferentialdiagnosisbetweenautoimmune thr0mb0cyt0peniaandnonimmunethr0mb0cyt0penias.MethodsAtotalof75casespatientswiththrombocy— topenia,idiopdthicthrombocytopenicpurpura(ITP)35cases,andnonimmunethrombocytopenia40cases.An— ti—GPIIb/ma.anti—GPIbandanti—P— seletionautoantibodiesweredetectedbyamodifiedmonoclonalanti— bodyimmobilizationofplateletantigensassay(modifiedMAIPA),PAlgGandRPweremeasuredbyflowcy— tometry(FCM).ResultsThetotalpositiverateofantibodiesagainstplateletGP? b/ma,GPIbandP—se— letionwere61.5%inITP,andtherewasnopositivefindinginthenonimmunethr0mbocyt0penias.Theaver— agecountofRPinITPandnonimmunethr0mb0cytopeniaswere30.5?5.5and26.5? 5.0respectively,there wasnotsignificantdifference..TheaveragecountofPAlgGinITPandnonimmunethromb0cyt0peniaswere respectively41.86.0and39.56.2,therewasnotsignificantdifferencetoo.ConclusionTheaveragecount 0fRPandPAlgGwerehighinITPandnonimmunethr0mb0cyt0penias,buttherewasnotsignificantdiffer— ence.TheplateletGPspecificautoantibodydetectionisconsiderablybetterindiscriminatingimmunefrom nonimmunethrombocytopenia. Keys:Plateletspecificantibody;PAlgG;Reticulatedplatelet. 特发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombocyto— penicpurpura,ITP)是最常见的一种出血性疾病.其 发病机制是机体免疫系统异常产生抗血小板自身抗 体,引起血小板破坏加速.检测抗血小板抗体不仅对 ITP的诊断有重要的应用价值,而且有助于对其发病 机制的深入认识.当前国内外研究方向已从血小板 相关抗体转为特异性抗体.我们采用单克隆抗体技 术(单抗)特异性俘获血小板抗原(MAIPA)技术并加 以改进,检测了ITP患者及非免疫性血小板减少症患 者的抗血小板膜糖蛋白(GP)特异性抗体,并与血小 板相关抗体(PAlgG),网织血小板检测相对比,其 在ITP诊断与鉴别诊断的价值. ? 222? 1与方法 1.1研究对象ITP病人35例,男l5例,女20例, 年龄2,8l岁,平均32岁.诊断符合2003年英国血 液学委员会ITP诊治指南?J.非免疫性血小板 减少症病人40例,其中自血病l0例,多发性骨髓瘤4 例,淋巴瘤6例,骨髓增生异常综合征6例,再障4例, 肝硬化脾功能亢进5例,肿瘤骨转移2例,肺炎2例, 肾功能衰竭1例.非免疫性血小板减少症病人均经 临床及相关检查确诊. 1.2方法 1.2.1标本抽取患者静脉血5ml(EDTA抗凝). 1.2.2实验方法采用流式细胞仪(FCM)(BD公司 产品)检测网织血小板(RP)和PAIgG,其中检测RP 选择波长488Fin氦氖激发光,设定血小板门,测定 20000个血小板的TO染色的RP百分率(RP%).检 测PAIgG同样采用FCM选择488Fin波长的氦氖激发 光,根据前向角散射与侧向角散射设定血小板门,采 集5000,10000个血小板,测定荧光标记阳性的血 小板百分率.PAlgG试剂盒购自法国Immunotech公 司.血小板特异性抗体采用单克隆抗体(单抗)特异 性俘获血小板抗原(MAIPA)技术并加以改进,检测血 小板特异性抗体(抗GP11b/ma,抗GPIb,抗P一选择 素),具体方法参照文献J.单抗试剂由苏州医学院 (江苏省血研所)提供. 1.2.3统计学处理采用SPSS10.0统计软件,实验 数据用均数?标准差的形式示.组间比较用t检 验 2结果 各种血小板减少症患者的特异性抗体(抗GP11 b/ma,抗GPIb,抗P一选择素),RP和PAIgG结果见 表1. 35例ITP患者有22例血小板特异性抗体检测至 少一项阳性,占61.5%,而非免疫性血小板减少症患 者均为阴性反应,具有显着差异.ITP患者RP平均植 为30.5?5.5,非免疫性血小板减少患者为26.5?5.0 (P>0.05),无显着性8差异;ITP患者PAIgG均值为 38.5?6.0,非免疫性血小板减少患者为36.6?6.2(P >0.05),差异无显着性. ChineseJoumaIofThrombosisandHemostasis20o7Vo113No5 表1ITP与非负疫性血小板减少病人抗血小板特异性抗体, PAIgA与RP的检测结果 组别nGP仅抗 lIb/?抗bP一仅抗seleti.双(+)+)RPRAJGg 注:1.RP与PAlgA为均值用(%)表示.2.双(+):指两种特异性 抗体阳性.3.总(+):指特异性抗体至少一项阳性总数. 3讨论 ITP是一种获得性自身免疫性疾病,其诊断迄今 尚无令人满意的标准,其确诊必须排除其他引起血小 板减少的因素J,因此非常需要一个特异性强的实验 诊断方法,以有效地鉴别免疫性与非免疫性血小板减 少症.血小板相关抗体(PAIgG)虽然敏感性高,但特 异性低;而血小板特异性抗体敏感性低,但特异性明 显增强,能区分免疫性与非免疫性血小板减少,对确 诊ITP诊断有重要意义J.我们采用流式细胞仪检 测ITP及非免疫性血小板减少患者的血小板表面相 关抗体(PAlgG)和RP,结果显示两者均明显增高,但 P值无显着性差异,无法加以区别.而使用改良MAI. PA法检测了ITP及非免疫性血小板减少患者的抗血 小板GP?b/ma,抗GPIb,P一选择素的特异性抗体, 结果显示61.5%的ITP患者血浆中可检测到特异性 抗体,其中仅抗GP?b/ma20%阳性,仅抗GPIb25. 7%阳性,仅抗P一选择素8.6%阳性,与文献报道一 致l4.而非免疫性血小板减少患者均阴性反应. RP的数目反映了人体血小板的更新速度和血小 板增生情况J.我们在检测PAIgG及血小板特异性 抗体同时也检测了RP.从实验中我们发现ITP与非 免疫性血小板减少患者的RP值均增高分别为30.5? 5.5,26.5?5.0(同样的方法,按文献,正常人RP值 为3.4%,5.1%),但同样P值无显着性差异,无法加 以区别免疫性或非免疫性血小板减少. 因此,我们认为RP和PAIgG的检测无法区别免 疫性与非免疫性血小板减少性紫癜,而血小板特异性 抗体检测是特异性较强的一项指标,对提高ITP确诊 率及鉴别免疫性和非免疫性血小板减少性紫癜患者 具有重要的临床意义. (下转第228页) ? 228? 供者是HC发生的危险因素. 目前对HC尚无特效的治疗方法,除减轻化疗药 物毒性,预防病毒感染方面常规方法外,用输注?因 子,高压氧加,膀胱内使用透明质酸钠[11],甲醛, 口服雌激素及次全膀胱切除加回肠膀胱成形术 等方法治疗HC均取得了一定疗效. 参考文献 [1]MIODOSKYM,ABDUL-HAlA,TSIRIGOTISP,eta1.Treatment ofpost-hematopoieticstemcelltransplantationhemorrhagiccystitis withintravesicularsodiumhyaluronate『J].BoneMarrowTrans. plant,2006,38(7):507-511. [2]MATSUMOTOM,HATTORIK,YOSHIBAF,eta1.Multivariate analysisofriskfactorsforhemorrhagiccystitisafterhematopoietie stemcelltransplantation[J].BoneMarrowTransplant,2003,32 (9):903.907. [3]GORCZYNSKAE,TURKIEWICZD,RYBKAK,eta1.Incidence, clinicaloutcome,andmanagementofvirus—inducedhemorrhagic cystitisinchildrenandadolescentsafterallogeneichematopoietic celltransplantation[J].BiolBloodMarrowTransplant,2005,11 (10):797-804. 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