血清甘油三酯(TG)测定(酶法)

血清甘油三酯(TG)测定(酶法) 授课对象:06级检验1-5班 课 时:2学时 血清甘油三酯(TG)测定(酶法) 目 标:1.掌握酶法测血清TG的基本原理及注意事项。 2.熟练进行实验操作。 3.了解TG测定主要临床意义。 实验用品:甘油三酯试剂盒(3 v)，水浴箱(37?)，721型分光光度计等 内 容: 原理: 酶法测定是用脂肪酶或脂蛋白脂酶(LPL)使血清中甘油三酯水解，生成甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶(GK)催化下，生成3-磷酸甘油，3-磷酸甘油在甘油磷酸氧化酶(GPOD)的催化下，生成磷酸二羟丙酮和HO。然后，以Trinder 反应测定HO，计算2222血清甘油三酯含量。 甘油三酯 L P L 甘油+3脂肪酸 甘油+ATP G K 3-磷酸甘油+ADP 3-磷酸甘油 GPO D 磷酸二羟丙酮+ HO22 HO+酚+ 4 - 氨基安替比林 红色醌亚胺 + HO 222 操作步骤: 加入物(ml) R S B 血 清 0.01 — — 标准液(1.13mmol/L) — 0.01 — 酶试剂 1.0 1.0 1.0 混匀，置37?水浴15min, 以B管校“0”， 500 nm波长比色， 取 A值。 计算: 血清甘油三酯( mmol/L) = A/A ×1.13 RS 正常参考范围: 0.56~1.70mmol/L 临床意义: 血清甘油三酯有随年龄增长而上升的趋势,体重超过标准者往往偏高。正常成人，空腹时按1g/kg体重进食脂肪，一般2~4小时内血清甘油三酯达高峰，8小时后恢复正常。 脂肪清除作用较差的人，清除时间延长。 1.病理性增高: 见于原发性高脂血症、动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合症、糖原沉积病、脂肪肝、其他肝病也可出现增加. 2.病理性降低: 见于原发性ß脂蛋白缺乏症、甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能降低和严重肝功能低下等。 注意事项: 1.配制后的酶试剂可在4?存放4天,几种酶中以甘油激酶较易失活。 2.标本应新鲜,血清放置时间长可使游离甘油浓度升高。 课后小结: