实验 大分子物质的水解试验

实验 大分子物质的水解试验 一、目的要求 1(不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统; 2( 掌握进行微生物大分子水解试验的原理和方法。 二、基本原理 微生物的胞外酶(如淀粉酶、脂肪酶等)将大分子物质的分解过程可以通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实。 三、器材 1(菌种:枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌，普通变形杆菌。 2. 培养基:固体油脂培养基，固体淀粉培养基，明胶培养基试管，石蕊牛奶试管，尿素琼脂试管 3. 溶液或试剂:革兰氏染色用卢戈氏碘液。 4. 仪器或其他用具:无菌平板，无菌试管，接种环，接种针，试管架。 四、操作步骤 1(淀粉水解试验 制成淀粉培养基平板后，将平板分为四个区域，划线接种枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌后置于37?培养24h。观察各细菌的生长情况，并滴加少量碘液于平皿中。若菌苔周围有透明圈，说明水解反应阳性。透明圈大小可初步判定该菌水解淀粉酶的能力强弱。 2( 油脂水解试验 制成油脂培养基平板后，同样划线接种上述四菌株，置于37?培养24h后观察各细菌的菌苔颜色，若出现红色斑点，则为脂肪水解阳性。 3( 明胶水解试验 在明胶培养基中穿刺接种枯草芽孢杆菌、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌，置于20?培养2,5d后观察液化情况。 4( 石蕊牛奶试验 接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌于石蕊牛奶培养基中，置于35?培养24,48h后观察培养基颜色变化情况。石蕊在酸性条件下为粉红色，碱性为紫色，而被还原时为白色。 5( 尿素试验 接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌于尿素培养基中，置于35?培养24,48h后观察培养基颜色变化情况。尿素酶存在时为红色，否则为黄色。 五、实验 将结果添入下，“+”表示阳性，“-”表示阴性 菌名 淀粉水解试验 脂肪水解试验 明胶液化试验 石蕊牛奶试验 尿素试验 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 普通变形杆菌 六、结果与讨论