高效离子色谱测定酒中某些有机酸和无机离子

’ 7 ， } ，》 扁孢诸 ，布 攻 无机匆 t ， 高效离子色谱测定酒中某些有机 酸和无机离子 塑 (浙江省测试技术研究所) 提 要 奉文以阴离子交换法分离，抑制电导检测离子色谱法，对常见的有机酸和无机酸如乙酸、 丙酮酸、c卜，琥珀酸、苹果酸、马来酸、SO 2一酒石酸和草酸进行了 分 析。在 Dionex 400Oi离子色谱仪上，用串联的两根DIOnexHPIC--AG6柱，以2．0ml／min的5mmoI／INaC O3／Smmol／INaOH进行分离，对二元酸如琥珀酸，苹果酸，马来酸、SO !一、酒石酸和 草酸的测定进行了研究，在100ug／ml浓度范围内，线性关系良好，重观性较好，有较好 的 检测服和很宽的线性范围．采用这种方法测定了黄酒和黄酒中的二元酸。 有机酸和无机酸的测定是食品经常 遇到的问，一般对有机酸 的测定经常采用 高效液相色谱 (1-a~，以这种方法测定 由于 采用低波长的紫外检测，灵敏度不高，易受 干扰，此外，高效液相色谱法，对无机离子 的测定较为困难。 离子色谱法 c2]不仅是分析无 机 离子 十分普遍的方法，而且对多种羧酸及取代羧 酸也极为有效 (5．6]。有机酸的分析可以用 阴离子交换法、离子排斥法、流动相离子色 谱法和反相色谱法分离，用电导、电化学和 紫外等检测手段，来灵敏和简便地测定。 这里，我们以抑制电导～阴离子色谱法 分析了常见的有机酸如乙酸、丙酮酸 c卜， 琥珀酸、苹果酸、马来酸、酒石酸、草酸及 SO 2一。对二元酸的测定如琥珀酸 苹 果 酸、马来酸、酒石酸、草酸和So 2一的 测 定进行了研究。并用这种方法测定了黄酒和 啤酒中的二元有机酸和无机酸，得到较好的 测定结果。 1实验部分 1．1仪器和试剂l DjOaex4000i离子色 谱仪，配 以 电 导 检 测 器。 二 根 Dionex 36 HPIc—AG阴离子色谱柱，DionexAMMS 阴离子微膜抑制器，HP--4270积分仪。 所有的淋洗液和溶液均以二次去离 子水脱气后配制，各试剂均用分析纯。· 1．2色谱条件。 以二根串联的Dionex HPIC--AG6为 分离柱，用5mmol／Na 2cO3／smtool／L NaOH为淋洗液，流速为2ml／m i n。掷制 液为0．025mol／LH JSO‘，流速为2ml／mi1"1 电导检测器量程30HS，通过积分析以峰面 积进行计算。进行体积为50 l。 1．3样品测定t 样品经过超声波脱气后，直 接 稀释 进 样，通过0．45Hm的滤膜过滤进样。 2结果与讨论 2．1分析条件的选择t 二元有机酸在色谱柱内有较强的保留， 而且与普通常见的阴离子如Cl一、NO8一、 SO 2一、POt 8一的保留值比较接近，因此 需要用较强的淋洗液洗脱，而且一般采用柱 效较高的HPIc～AS6柱进行分离。文献 [6] 采用As一6柱，用浓度较高的N a co3淋洗 液分离，由于柱压较高，淋洗速度为1．5ml 维普资讯 http://www.cqvip.com ／min，因此各物质的保留时间较 1由 于 高浓度的Na zCO 日I起较商的背景皑导，易 【起基线 稳，受温度的影Ⅱ 严重，从而 减 弱了检测的灵敏度。此外，要抑制这样浓的 Na CO ，必须应刖大抑制容量柏撤膜扣：制 器才能达到，从而限制了其应用。 鉴于以上情况，我们这里改用了两根 串 联的保护柱Dionex HPIc—AG6，这样 仅降低了成本，减小柱压，而且只需用较低 浓度的Na co 淋洗液，就能达到分离的效 果，由于柱压较小，这里我们选用2mI／mln 的流速淋洗，减少了备物质的保留时间}同 时，Na CO 的低浓度使背景电导降低，检 灵敏度提高，并可以用多种抑制器抑制。 这里，我们以5mmO1／LNa 2co3和5mmol ／LNaOH为流动相。 2．2各物质的保留时间和相邻峰的分离 度 以上面条件，我们对10／．tg／ml的各物质 的保留时间T和相邻峰的分 离度R进行测定， 结果列入 1，其中w为峰宽。 表 1 t 10~g／ml各物质的保留时闻和相邻峰的分离度 从以上表可以看到，各物质基本上可以达 到良好的分离，分离效果与采用浓Na：CO。 淋洗在HPIc—AS6柱的相接近，但保 留 时 同缩短。如果要达到更好的分离效果，可以 用更稀的淋洗液，而要再缩短保留时间，则 可增加淋洗禳浓度。琥珀酸、苹果酸、马来 酸、和SO4 2一之间有部分重叠，但一般对测 定影响不大 ，可以进行定性定量测定 图 l ：~t0Hg／m l各物质的标准色谱图。 2．3检测限，线性范围、线性关系和重 现性 由实验韧步决定，各物质均有较低的检 测限，在30p．s的电导检测量程的条件下，乙 衰2 各物质的线性关系 酸、丙酬酸、c卜、琥珀酸、苹果酸、马来酸、 SO4 2一酒石酸、草酸的检测限分别为0．24， 0．3,t、0．055、0．55、0．32、0．24、0．088、 0．33 和0．13 g／mI，如果要检测更低浓度时，可 以用更小的电导量程。 从实验结果看，各物质以峰面 积计 算 时，有很宽的线性范围，一般在5000~g／ml 内，各物质均有 良好的关系，但随着浓度的 增加，分离效果变差。因此，一 般 测 定 在 lO0 g／ml范围内进行。对5、i0、20 40、80、 l0O g／ml的二元酸测定，其线性关系见 表 2。 琥珀酸 苹果酸 马来酸