BODIANS法-神经纤维

BODIAN'S 法 – 神经纤维 目的：鉴别神经纤维。 原理：含银白蛋白-S(银蛋白)被用作铜的反应加成剂。铜替代银在结缔组织的位置。使神经纤维和结缔组织出现明显的区别。对苯二酚将银还原成可见的金属形式。用氯化金进行调色，再用草酸还原氯化金，增加组织上金沉淀。 对照：正常的大脑皮质。 固定液：10%甲醛。 技术：6μ石蜡切片，置37°C恒温箱过夜。 设备：酸洗玻璃器皿，37°C恒温箱。 试剂： 还原液： 对苯二酚Hydroquinone 0.5 gm 亚硫酸钠Sodium sulfite 2.5 gm 蒸馏水Distilled water 50.0 ml 新鲜配制，用后丢弃。 警告：避免接触和吸入。 铜片： 铜片Copper sheet 5.0 gm (1/2”) 盐酸Hydrochloric acid 铜片放酸中洗，流水冲水和蒸馏水洗3次。 警告：腐蚀性。 银蛋白-S溶液： 银蛋白-SProtartol-S 0.5 gm (Purchased through Polysciences Inc.) 蒸馏水Distilled water 50.0 ml 酸洗过铜片，酸洗过的玻璃容器。铜片放入蒸馏水染色缸中，在水面渐渐撒入银蛋白-S，不要搅拌混合，让溶液静置直至完全溶解。新鲜配制，用后丢弃。 0.5%草酸： 草酸Oxalic acid 1.0 gm 蒸馏水Distilled water 200.0 ml 混合溶解，保存期1年。标签、签名和日期。 警告：避免接触和吸入。 5% Hypo: 详见备用液 安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。避免接触和吸入。 盐酸：对皮肤、眼睛和呼吸系统有强烈的刺激性。经吸入途径侵入，影响靶器官为皮肤、呼吸、生殖和胎儿系统。 草酸：可能引起眼睛、皮肤或口腔粘膜严重灼伤。侵入途径：吸入、摄入。影响靶器官为泌尿和心血管系统，反复接触能引起皮炎。腐蚀性。 硫代硫酸钠：摄入毒性，对胃有刺激性，对皮肤、眼睛和呼吸道有刺激性。 对苯二酚：对皮肤和眼睛有刺激性。侵入途径为吸入和摄入。老鼠长期接触产生膀胱癌。 程序： 1. 脱蜡至蒸馏水。 2. 放入银蛋白液中，置于37°C恒温箱过夜。 3. 蒸馏水洗，迅速浸两下。 4. 还原液5 minutes。 5. 流水冲洗，蒸馏水稍洗。 6. 0.5% 氯化金3-5 minutes，或变灰色。 7. 蒸馏水稍洗。 8. 0.5% 草酸10 minutes，镜检直到纤维黑色。 9. 蒸馏水稍洗。 10. 5% hypo, 3 minutes. 11. 流水冲洗。 12. 脱水、透明和封固。 结果： 神经纤维黑色 参考文献： Lillie R.D., Histopathologic Technic and Practical Histochemistry, 4th Ed,1976, pp771-772, McGraw-Hill, NY Carson F, Histotechnology: A Self-Instructional Text, 1990, pp172- 174,ASCP, Ill Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech 程序卡 BODIAN'S 法 – 神经纤维 对照：正常的大脑皮质。 技术：6μ石蜡切片，置37°C恒温箱过夜。 程序： 1. 脱蜡至蒸馏水。 2. 放入银蛋白液中，置于37°C恒温箱过夜。 3. 蒸馏水洗，迅速浸两下。 4. 还原液5 minutes。 5. 流水冲洗，蒸馏水稍洗。 6. 0.5% 氯化金3-5 minutes，或变灰色。 7. 蒸馏水稍洗。 8. 0.5% 草酸10 minutes，镜检直到纤维黑色。 9. 蒸馏水稍洗。 10. 5% hypo, 3 minutes. 11. 流水冲洗。 12. 脱水、透明和封固。 结果： 神经纤维黑色 还原液： 对苯二酚Hydroquinone 0.5 gm 亚硫酸钠Sodium sulfite 2.5 gm 蒸馏水Distilled water 50.0 ml 新鲜配制，用后丢弃。 警告：避免接触和吸入。 铜片： 铜片Copper sheet 5.0 gm (1/2”) 盐酸Hydrochloric acid 铜片放酸中洗，流水冲水和蒸馏水洗3次。 警告：腐蚀性。 银蛋白-S溶液： 银蛋白-SProtartol-S 0.5 gm (Purchased through Polysciences Inc.) 蒸馏水Distilled water 50.0 ml 酸洗过铜片，酸洗过的玻璃容器。铜片放入蒸馏水染色缸中，在水表面渐渐撒入银蛋白-S，不要搅拌混合，让溶液静置直至完全溶解。新鲜配制，用后丢弃。 0.5%草酸： 草酸Oxalic acid 1.0 gm 蒸馏水Distilled water 200.0 ml 混合溶解，保存期1年。标签、签名和日期。 警告：避免接触和吸入。 5% Hypo: 详见备用液 0.5%氯化金： 氯化金Gold chloride 1.0 gm 蒸馏水Distilled water 200.0 ml 混合溶解，盛于干洁的瓶中，置于冰箱冷藏保存。 警告：避免接触和吸入。 0.5%草酸 草酸Oxalic acid 1.0 gm 蒸馏水Distilled water 200.0 ml 混合溶解，保存期1年。标签、签名和日期。 警告：避免接触和吸入。 日期： 技师： 使用限期： 0.5%草酸： 日期： 技师： 0.5%氯化金 氯化金Gold chloride 1.0 gm 蒸馏水Distilled water 200.0 ml 混合溶解，盛于干洁的瓶中，置于冰箱冷藏保存。 警告：避免接触和吸入。 日期： 技师： 使用限期： 0.5%氯化金 日期： 技师：