HOLZER'S染色-神经胶质纤维
目的:神经胶质纤维的一个适当名词就“神经胶”,因为它们为中枢神经系统提供内在支持。四种类型的神经胶质细胞:星形胶质细胞、少突胶质细胞、小胶质细胞和室管膜细胞。
原理:神经胶质纤维由结晶紫着染,结晶紫用苯胺-氯仿分化。
对照:大脑皮质
固定液:10% 甲醛
技术:6μ石蜡切片
设备: 所有玻璃器皿用蒸馏水洗,染色缸,吸水纸。
试剂:
磷钼酸酒精液:
0.5% 磷钼酸phosphomolybdicacid 20.0 ml
95% 酒精alcohol 40.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:易燃性,避免接触和吸入。
无水乙醇-氯仿:
无水乙醇Absolute alcohol 40.0 ml
氯仿Chloroform 160.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:致癌物质,易燃性。
10% 溴化钾:
溴化钾Potassium bromide 10.0 gm
混合溶解。保存期3个月。标签、签名和日期。
Holzer’s结晶紫:
结晶紫Crystal violet 5.0 gm
无水乙醇Absolute alcohol 20.0 ml
氯仿Chloroform 80.0 ml
混合溶解。保存期3月。
警告:致癌物质,易燃性,避免接触和吸入。
分化液:
苯胺油Aniline oil 30.0 ml
氯仿Chloroform 45.0 ml
氢氧化铵Ammonium hydroxide 5 drops
新鲜配制,用后丢弃。
警告:致癌物质,易燃性、腐蚀性。
安全:在通风橱中操作。穿戴丁腈手套、护目镜和白大衣。避免接触和吸入。
磷钼酸:对皮肤和眼晴有刺激性。
氯仿:致癌物质,侵入途径为吸入和摄入。影响靶器官为肝、生殖系统、胎儿组织、中枢神经系统、血液和胃肠系统。过度接触蒸气可能失去意识或死亡。
结晶紫(龙胆紫):致癌物质
苯胺:可能致癌,瘤生成,对皮肤和眼睛有剧烈的刺激性。致敏,侵入途径通过皮肤吸收。过度接触可能引起严重青紫、头痛和睡意。
程序:
1. 脱蜡至95%酒精。
2. 磷钼酸液3 minutes。
3. 滴干溶液。
4. 酒精氯仿液直至切片透明,拭干。
5. 结晶紫染液 30 seconds.
6. 滴干溶液。
7. 溴化钾液5 minutes.
8. 蒸馏水洗,用吸水纸吸干水份。
9. 分化液,镜检。
10. 二甲苯透明和封固
结果:
神经胶质纤维深紫罗兰-蓝色
背景:紫罗兰色
参考文献:
Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed,
1980, pp 258-260, Battelle Press, Ohio
Carson F, Histotechnology: A Self-Instructional Text, 1990, pp. 177-178,
ASCP, Ill
Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology
Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech
程序卡
HOLZER'S染色-神经胶质纤维
对照:大脑皮质
技术:6μ石蜡切片
程序:
1. 脱蜡至95%酒精。
2. 磷钼酸液3 minutes。
3. 滴干溶液。
4. 酒精氯仿液直至切片透明,拭干。
5. 结晶紫染液 30 seconds.
6. 滴干溶液。
7. 溴化钾液5 minutes.
8. 蒸馏水洗,用吸水纸吸干水份。
9. 分化液,镜检。
10. 二甲苯透明和封固
结果:
神经胶质纤维深紫罗兰-蓝色
背景:紫罗兰色
磷钼酸酒精液:
0.5% 磷钼酸phosphomolybdicacid 20.0 ml
95% 酒精alcohol 40.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:易燃性,避免接触和吸入。
无水乙醇-氯仿:
无水乙醇Absolute alcohol 40.0 ml
氯仿Chloroform 160.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:致癌物质,易燃性。
10% 溴化钾:
溴化钾Potassium bromide 10.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
混合溶解。保存期3个月。标签、签名和日期。
警告:避免接触和吸入。
Holzer’s结晶紫:
结晶紫Crystal violet 5.0 gm
无水乙醇Absolute alcohol 20.0 ml
氯仿Chloroform 80.0 ml
混合溶解。保存期3月。
警告:致癌物质,易燃性,避免接触和吸入。
分化液:
苯胺油Aniline oil 30.0 ml
氯仿Chloroform 45.0 ml
氢氧化铵Ammonium hydroxide 5 drops
新鲜配制,用后丢弃。
10% 溴化钾:
溴化钾Potassium bromide 10.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
混合溶解。保存期3个月。标签、签名和日期。
警告:易燃性,避免接触和吸入。
日期:
技师:
使用限期:
Holzer’s结晶紫:
结晶紫Crystal violet 5.0 gm
无水乙醇Absolute alcohol 20.0 ml
氯仿Chloroform 80.0 ml
混合溶解。保存期3月。
警告:致癌物质,易燃性。
日期:
技师:
使用限期: