松果体染色

松果体染色- ACHUCARRO-HORTEGA改良 目的：松果体鉴别染色。 对照：正常的松果体组织。 固定液：10% 甲醛 技术：石蜡切片6μm。37°C放置过夜。 设备：染色缸，蒸馏水清洗玻璃器皿。 试剂： 溶液 A 2%硝酸银 silver nitrate 100.0 ml 嘧啶Pyridine 1.2 ml 溶液 B 10%硝酸银 silver nitrate 10.0 ml 5%碳酸钠sodium carbonate 30.0 ml 混合溶解，一滴一滴加入： 氢氧化铵Ammonium hydroxide 直至澄清。 加入： 蒸馏水Distilled water 110.0 ml 过滤后加入： 嘧啶Pyridine 2.2 ml 溶液 C 10%硝酸银 silver nitrate 50.0 ml 逐滴加入氢氧化铵直至沉淀物几乎完全溶解，过滤。 1% 甲醛 甲醛Formaldehyde 15.0 ml 蒸馏水Distilled water 150.0 ml 嘧啶Pyridine 0.3 ml 0.2%氯化金 5% HYPO 详见备用液 程序： 1. 脱蜡至蒸馏水，以下骤后不要水洗除非有特殊要求： 2. 溶液A, 2 hours, 56-58°C 3. 溶液B, 16-24 hours，室温暗处。 4. 溶液C, 2 minutes. 5. 1% 甲醛液还原3次，第一次3-5 seconds。 6. 流水冲洗5 minutes。蒸馏水稍洗。 7. 0.2%氯化金调色10-15 minutes。 8. 蒸馏水稍洗。 9. 5% Hypo定影5 minutes。 10. 流水冲洗5 minutes, 蒸馏水稍洗。 11. 脱水、透明和封固。 结果： 杆状体：黑色 背景：琥珀/棕褐色/灰色