胶体铁-粘多糖

胶体铁-粘多糖 目的：用于鉴别羧酸、硫酸粘多糖和糖蛋白。 原理：胶体铁在低pH值时主要被羧酸、硫酸粘多糖吸附。洗去多余的试剂后用普鲁士蓝(铁染料)反应来鉴别链接在组织上的铁。 对照：用粘液作对照，小肠 固定： 0%甲醛，避用铬酸盐固定。 技术：4μ石蜡切片。 设备：电炉，酸洗玻璃器皿，烧瓶，染色缸，滤纸。 试剂： Müller 胶体铁备用液： 煮沸蒸馏水Boiling distilled water 250.0 ml 29% 氯化铁(新鲜)ferric chloride-fresh 4.4 ml 当加入氯化铁时保持沸腾和搅拌。搅拌至溶液呈暗红色。停止加热，冷却。保存于干洁的棕色瓶中。标签，日期和签名。保存期6个月。 工作液： 胶体铁原液Stock colloidal 10.0 ml 蒸馏水Distilled water 18.0 ml 12%醋酸Acetic acid 12.0 ml 新鲜配制，用后丢弃。 警告：避免接触和吸入。 12%醋酸： 冰醋酸 acetic acid 24.0 ml 蒸馏水Distilled water 176.0 ml 警告：腐蚀性。 亚铁氰化钾盐酸工作液 (铁染液) 5% 亚铁氰化钾Potassium ferrocyanide25.0 ml 5% 盐酸Hydrochloric acid 25.0 ml 在使用前混合，用酸洗玻璃容器，用后丢弃。 警告：腐蚀性，酸。 核固红： 详见阿尔新蓝染色 安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。避免接触和吸入。在通风橱中加热溶液。 醋酸：对呼吸系统有刺激性，侵入途径为吸入，影响靶器官为呼吸系统。腐蚀性。 三氯化铁：对金属有腐蚀性，摄入引起胃肠道问题。 程序： 1. 脱蜡至蒸馏水。 2. 12%醋酸稍洗。 3. 胶体铁工作液1 hour。 4. 12%醋酸3 minutes 3次。 5. 亚铁氰化钾盐酸工作液20 minutes。 6. 流水冲洗5 minutes。 7. 核固红复染 5 minutes。 8. 流水冲洗。 9. 脱水、透明和封固 结果： 酸性粘多糖和粘蛋白：深蓝色 核：粉红-红色 胞浆粉红色 参考文献： F.CARSON, HISTOTECHNOLOGY: A SELF-INSTRUCTIONAL TEXT, PP 127-129, 1991, ASCP PRESS Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech 程序卡 胶体铁-粘多糖 对照：用粘液作对照，小肠 技术：4μ石蜡切片。 程序： 1. 脱蜡至蒸馏水。 2. 12%醋酸稍洗。 3. 胶体铁工作液1 hour。 4. 12%醋酸3 minutes 3次。 5. 亚铁氰化钾盐酸工作液20 minutes。 6. 流水冲洗5 minutes。 7. 核固红复染 5 minutes。 8. 流水冲洗。 9. 脱水、透明和封固 结果： 酸性粘多糖和粘蛋白：深蓝色 核：粉红-红色 胞浆粉红色 试剂： Müller 胶体铁备用液： 煮沸蒸馏水Boiling distilled water 250.0 ml 29% 氯化铁(新鲜)ferric chloride-fresh 4.4 ml 当加入氯化铁时保持沸腾和搅拌。搅拌至溶液呈暗红色。停止加热，冷却。保存于干洁的棕色瓶中。标签，日期和签名。保存期6个月。 工作液： 胶体铁原液Stock colloidal 10.0 ml 蒸馏水Distilled water 18.0 ml 12%醋酸Acetic acid 12.0 ml 新鲜配制，用后丢弃。 警告：避免接触和吸入。 12%醋酸： 冰醋酸 acetic acid 24.0 ml 蒸馏水Distilled water 176.0 ml 警告：腐蚀性。 亚铁氰化钾盐酸工作液 (铁染液) 5% 亚铁氰化钾Potassium ferrocyanide25.0 ml 5% 盐酸Hydrochloric acid 25.0 ml 在使用前混合，用酸洗玻璃容器，用后丢弃。 警告：腐蚀性，酸。 核固红： 详见阿尔新蓝染色 Müller 胶体铁 备用液： 煮沸蒸馏水Boiling distilled water250.0 ml 29% 氯化铁(新鲜)ferric chloride-fresh 4.4 ml 当加入氯化铁时保持沸腾和搅拌。搅拌至溶液呈暗红色。停止加热，冷却。保存于干洁的棕色瓶中。标签，日期和签名。保存期6个月。 工作液： 胶体铁原液Stock colloidal 10.0 ml 蒸馏水Distilled water 18.0 ml 12%醋酸Acetic acid 12.0 ml 新鲜配制，用后丢弃。 警告：避免接触和吸入。 日期： 技师： 使用限期： 12%醋酸： 冰醋酸 acetic acid 24.0 ml 蒸馏水Distilled water 176.0 ml 警告：腐蚀性。 日期： 技师： 使用限期：