纤维蛋白 - FRASER-LENDRUM METHOD
目的:鉴别纤维蛋白
对照:血块,损伤的组织标本。
固定:固定良好的组织,Zenker液固定。
技术:4 to 5 microns石蜡切片。
设备:染色缸,蒸馏水洗玻璃器皿,微波炉。
试剂:
Zenker's 固定液:
See EVG三色法 Trichrome
天青石蓝液:
硫酸铁铵Ferric ammon sulfate 2.5 gm
蒸馏水Distilled water 50.0 ml
天青石蓝Celestine blue 0.25 gm
甘油Glycerin 7.0 ml
将硫酸铁铵溶于蒸馏水中。加入天青石蓝,煮沸3 minutes。冷却,过滤,加入甘油。保存期6个月。
警告:避免接触和吸入。
橙黄G-苦味酸溶液:
苦味酸Picric acid 2.8 gm
80% 酒精alcohol 200.0 ml
橙黄GOrange G 0.4 gm
混合溶解,标签,保存期1年。
警告:易燃性,腐蚀性,可能致癌。
1%酸性品红:
酸性品红Acid fuchsin 1.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
醋酸Acetic acid 1.0 ml
混合溶解,标签,保存期1年。
警告:避免接触和吸入。
分化液:
橙黄G-苦味酸溶液Orange G-Picric sol. 5.0 ml
80% 酒精alcohol 45.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:易燃性,腐蚀性,可能致癌。
Mayer's苏木精:
See刚果红染色
MacFarlane's 备用液:
磷钨酸Phosphotungstic acid 12.5gm
苦味酸Picric acid 1.25 gm
95%酒精 alcohol 50.0ml
混合溶解,标签,保存期6个月。
警告:易燃性,腐蚀性。
MacFarlane's工作液:
MacFarlane's原液 10.0 ml
95%酒精 alcohol 30.0 ml
蒸馏水Distilled water 10.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:易燃性,腐蚀性
2%亮绿溶液:
亮绿Light green, SF Y 2.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
醋酸Acetic acid 1.0 ml
混合溶解,标签,保存期1年。
警告:可能致癌
安全:穿戴丁腈手套、护目镜、微过滤口罩和白大衣。在通风橱中操作,避免接触和吸入。
Zenker’s固定液:氯化汞:剧烈的皮肤和眼睛刺激性。通过呼入和摄入途径影响靶器官为生殖、泌尿、呼吸胃肠和胎儿系统。重铬酸钾:吸入粉尘和摄入毒性,影响靶器官为生殖和胎儿系统。固体对眼睛、皮肤和粘膜有腐蚀性。不要将Zenker’s固定液直接倒入下水道,应交由安全部门处理。
硫代硫酸钠:摄入毒性,对胃有刺激性。皮肤、眼睛和呼吸道刺激物。
磷钼酸/磷钨酸粉末和醋酸溶液对皮肤和眼睛有刺激性和剧烈的腐蚀性。
苦味酸:干燥时可能产生爆炸。
橙黄GOrange G and亮绿 Light Green SF Yellowish, 可能致癌。
程序:
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. *Zenker's,微波高火45 seconds,放置5 minutes。
3. 使用Lugol's and hypo清除汞色素。
4. 流水冲洗,蒸馏水稍洗。
5. 天青石蓝,5 minutes。
6. 流水冲洗。
7. Mayer's苏木精,5 minutes。
8. 流水冲洗。
9. 橙黄G-苦味酸液, 5 minutes。
10. 流水冲洗产。
11. 酸性品红, 5 minutes。
12. 流水冲洗。
13. 分化液20 quick dips.
14. 流水冲洗。
15. MacFarlane's 工作液 5 minutes。
16. 流水冲洗。
17. 亮绿1 minute。
18.流水冲洗,脱水透明和封固。
*传统方法:60°C恒温箱1 hour.
结果:
纤维蛋白,角蛋白及一些细胞质内颗粒:红色
红血球:橙色
胶原:绿色
参考文献:
Luna L, Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rdEd, 1968, pp
81-82, McGraw-Hill, NY
Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology
Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech
程序卡
纤维蛋白 - FRASER-LENDRUM METHOD
对照:血块,损伤的组织标本。
技术:4 to 5 microns石蜡切片。
程序:
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. *Zenker's,微波高火45 seconds,放置5 minutes。
3. 使用Lugol's and hypo清除汞色素。
4. 流水冲洗,蒸馏水稍洗。
5. 天青石蓝,5 minutes。
6. 流水冲洗。
7. Mayer's苏木精,5 minutes。
8. 流水冲洗。
9. 橙黄G-苦味酸液, 5 minutes。
10. 流水冲洗产。
11. 酸性品红, 5 minutes。
12. 流水冲洗。
13. 分化液20 quick dips.
14. 流水冲洗。
15. MacFarlane's 工作液 5 minutes。
16. 流水冲洗。
17. 亮绿1 minute。
18.流水冲洗,脱水透明和封固。
*传统方法:60°C恒温箱1 hour.
结果:
纤维蛋白,角蛋白及一些细胞质内颗粒:红色
红血球:橙色
胶原:绿色
Zenker's 固定液:
See EVG三色法Trichrome
天青石蓝液:
硫酸铁铵Ferric ammon sulfate 2.5 gm
蒸馏水Distilled water 50.0 ml
天青石蓝Celestine blue 0.25 gm
甘油Glycerin 7.0 ml
将硫酸铁铵溶于蒸馏水中。加入天青石蓝,煮沸3 minutes。冷却,过滤,加入甘油。保存期6个月。
警告:避免接触和吸入。
橙黄G-苦味酸溶液:
苦味酸Picric acid 2.8 gm
80% 酒精alcohol 200.0 ml
橙黄GOrange G 0.4 gm
混合溶解,标签,保存期1年。
警告:易燃性,腐蚀性,可能致癌。
1%酸性品红:
酸性品红Acid fuchsin 1.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
醋酸Acetic acid 1.0 ml
混合溶解,标签,保存期1年。
警告:避免接触和吸入。
分化液:
橙黄G-苦味酸溶液Orange G-Picric sol. 5.0 ml
80% 酒精alcohol 45.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:易燃性,腐蚀性,可能致癌。
Mayer's苏木精:
See刚果红染色
MacFarlane's 备用液:
磷钨酸Phosphotungstic acid 12.5gm
苦味酸Picric acid 1.25 gm
95%酒精 alcohol 50.0ml
混合溶解,标签,保存期6个月。
警告:易燃性,腐蚀性。
MacFarlane's工作液:
MacFarlane's原液 10.0 ml
95%酒精 alcohol 30.0 ml
蒸馏水Distilled water 10.0 ml
新鲜配制,用后丢弃。
警告:易燃性,腐蚀性
2%亮绿溶液:
亮绿Light green, SF Y 2.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
醋酸Acetic acid 1.0 ml
混合溶解,标签,保存期1年。
警告:可能致癌
1%酸性品红:
酸性品红Acid fuchsin 1.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
醋酸Acetic acid 1.0 ml
混合溶解,标签,保存期1年。
警告:避免接触和吸入。
日期:
技师:
使用限期:
1%酸性品红
日期:
技师:
2%亮绿溶液:
亮绿Light green, SF Y 2.0 gm
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
醋酸Acetic acid 1.0 ml
混合溶解,标签,保存期1年。
警告:可能致癌
日期:
技师:
使用限期:
MacFarlane's 备用液:
磷钨酸Phosphotungstic acid 12.5gm
苦味酸Picric acid 1.25 gm
95%酒精 alcohol 50.0ml
混合溶解,标签,保存期6个月。
警告:易燃性,腐蚀性。
日期:
技师:
使用限期:
天青石蓝液:
硫酸铁铵Ferric ammon sulfate 2.5 gm
蒸馏水Distilled water 50.0 ml
天青石蓝Celestine blue 0.25 gm
甘油Glycerin 7.0 ml
将硫酸铁铵溶于蒸馏水中。加入天青石蓝,煮沸3 minutes。冷却,过滤,加入甘油。保存期6个月。
警告:避免接触和吸入。
日期:
技师:
使用限期:
天青石蓝液:
日期:
技师:
橙黄G-苦味酸溶液:
苦味酸Picric acid 2.8 gm
80% 酒精alcohol 200.0 ml
橙黄GOrange G 0.4 gm
混合溶解,标签,保存期1年。
警告:易燃性,腐蚀性,可能致癌。
日期:
技师:
使用限期:
橙黄G-苦味酸溶液
日期:
技师:
Zenker's 固定液
日期:
技师: