穿心莲药材干燥前后穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量变化研究

穿心莲药材干燥前后穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量变化研究 曾令杰, 梁 晖, 谢晓萍* (广东药学院, 广东 广州 510006) 收稿日期: 2009-01-24 作者简介:曾令杰 ( 1970- ) ,男,博士,副教授,研究方向: 中药材 GAP种植与中药质量研究。Te:l ( 020 ) 39352176 E-m ai:l zl j334477@ ho-t m ai.l com * 广东药学院 2009届毕业生。 关键词: 穿心莲药材; 干燥; 穿心莲内酯; 脱水穿心莲内酯 摘要: 目的:研究干燥过程中穿心莲内酯和脱水内酯的含量变化,为 GAP实施过程中规范穿心莲药材的干燥提供依 据。方法: 应用 H PLC法,比较烘干、自然晒干和新鲜的穿心莲根、茎、叶和果实中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。 结果: 烘干后的样品中内酯类成分的含量和新鲜样品相当, 但自然晒干后, 叶、茎和根中穿心莲内酯的含量明显减少,果 实中穿心莲内酯的含量显著上升。叶和果实中的脱水穿心莲内酯的含量均下降一半以上。结论: 穿心莲药材采收后,烘 干有利于防止穿心莲内酯类成分的损失。 中图分类号: R283 文献标识码: A 文章编号: 1001-1528( 2009) 09-1399-03 穿心莲 Andrographis panicu lata ( Burm. .f ) Nees 为爵床科植物,全草入药,我国广东、福建地区广泛 栽培, 具有清热解毒, 凉血、消肿之功效 [ 1]。穿心莲 抗炎抗感染的活性成分是二萜内酯类, 其主要成分 穿心莲内酯还具有降压、抑制血小板聚集及抗血栓 形成以及免疫刺激活性 [ 3]。穿心莲药材在受热或 储藏过程中其内酯类成分会发生变化, 穿心莲内酯 在高温的煎煮下,大部分的穿心莲内酯转化为脱水 穿心莲内酯 [ 2, 3] ,采收后,干燥和储藏方式影响着穿 心莲药材的质量。中药材的 GAP规范中指出, 中药 材的干燥方法对质量是有影响的, 干燥方法的选定 应进行对比实验研究。但许多中药材采收后, 干燥 方法对质量的影响还缺乏研究。本试验对穿心莲干 燥前后穿心莲内酯类成分的变化进行了探讨, 为规 范穿心莲药材的干燥方式提供了依据。 1 实验仪器、材料与试剂 Ag ilent 1100系列高效液相色谱仪, Ag ilent自动 进样器, Ag ilentDAD检测器; ODS C18色谱柱 ( 10 Lm, 250 mm @ 4. 6 mm ); 对照品穿心莲内酯 (批号 0797-9803)和脱水穿心莲内酯 (批号 0854-200103) 购自中国药品生物制品检定所。色谱纯甲醇购自广 州化学试剂厂, 水为双蒸水。穿心莲 2008年 10月 采自广东药学院药用植物园,经我校标本馆刘基柱 研究员鉴定。 2 方法与结果 2. 1 分析用样品的准备 穿心莲植株采收后,随机分成两组,一组立即分 离成根、茎、叶和果实 (含种子 ), 然后再分成两部 分, 一部分趁新鲜时立即剪碎,分别精密称取 0. 6 g, 按本试验选定的方法提取和分析; 一部分立即于 105 e 烘箱中烘干, 约 1 h即可烘干, 然后分别粉碎 成粉末,阴凉处储存,供 HPLC分析用。另一组在太 阳下晒干, 7 d左右可全部晒干, 然后, 分离成根、 茎、叶和果实 (含种子 ), 分别粉碎成粉末, 阴凉处储 存, 备用。 2. 2 供试液的制备与 HPLC分析方法。 样品的提取、供试液的制备同中国药典 2005版 一部中穿心莲样品的制备方法 [ 1] , HPLC分析方法 采用我们以前报道的方法 [ 4]。本次分析所使用的 穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯混合对照品的浓度分 别为: 0. 131mg /mL及 0. 052 mg /mL。 2. 2. 1 精密度试验:取穿心莲内酯和脱水穿心莲内 酯对照品溶液各 5 LL, 重复进样 6次,按上述实验 方法项下的色谱条件测定,其精密度分别为: RSD为 1. 2%和 1. 4% ,符合 HPLC定量。 2. 2. 2 重复性实验: 分别取同一批的穿心莲 5份, 按供试品溶液项下制备供试品溶液并测定, 其 5次 测定结果为:色谱峰的个数和特征一致,各色谱峰峰 面积的 RSD在 0. 8% ~ 2. 6%之间,保留时间的 RSD 在 1. 1% ~ 3. 2%之间; 表明重复性良好,符合 HPLC 定量分析要求。 2. 2. 3 回收率实验:取已知含量的穿心莲药材粉末 1399 2009年 9月 第 31卷 第 9期 中 成 药 Ch inese T rad itiona l PatentM ed icine Septem be r 2009 Vo .l 31 No. 9 约 0. 5 g, 精密称定, 按样品的制备方法过中性氧化 铝柱, 洗脱液蒸干后分别精密加入 3. 0mL穿心莲内 酯对照品溶液 (浓度 2. 62 mg /mL)和 0. 5 mL脱水 穿心莲内酯对照品溶液 (浓度 1. 04 mg /mL ), 然后 以甲醇定容成 10mL, 即得供试液。平行 5份, 按本 试验方法测定。穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的平 均回收率分别为 100. 3%和 100. 2%, 符合 HPLC的 定量分析要求。 2. 3 穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯在穿心莲植株 中的纵向分布研究 新鲜的穿心莲根、茎、叶和果实的样品,折算成 干重后,可以分析其穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯 的含量,其结果见表 1和图 1。结果表明,穿心莲内 酯在穿心莲根、茎、叶和果实中均有分布, 其含量的 高低依次为:叶 >茎 >果实 >根,叶中穿心莲内酯的 含量为茎中的 3~ 4倍;脱水穿心莲内酯仅在叶和果 实中有分布,根和茎中检测不到。 2. 4 干燥前后穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含 量变化 高温烘干和自然晒干的样品,经 HPLC分析,其 穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量见表 1。它们 与新鲜样品中的穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含 图 1 穿心莲根、茎、叶和果实中穿心莲内酯和脱水穿心莲 内酯的含量 A. 穿心连内酯 D. 脱水穿心莲内酯 量比较见图 2。结果表明, 干燥后,样品中穿心莲内 酯和脱水穿心莲内酯的分布规律与新鲜样品的分布 规律一致,穿心莲内酯在叶中含量最高,根中含量最 低。脱水穿心莲内酯仅在叶和果实中有分布, 在根 和茎中检测不到。采收后, 立即烘干的根、茎、叶和 果实中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量与新鲜 样品中的含量相当, 没有显著差别。但自然晒干的 穿心莲各部分中穿心莲内酯的含量与新鲜样品相比 有显著变化, 其叶、茎和根中穿心莲内酯的含量降 低, 但果实在晒干后, 其穿心莲内酯的含量显著上 升; 和新鲜样品相比,晒干后叶和果实中的脱水穿心 莲内酯的含量均下降一半以上。 表 1 干燥前后穿心莲根、茎、叶、果实中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量 ( n= 3, m g/ g) 干燥前 / ( m g/g) A D 晒干后 / (m g /g) A D 烘干后 / ( mg /g) A D 根 0. 275 ? 0. 012 0 0. 228 ? 0. 012 0 0. 275 ? 0. 012 0 茎 3. 721 ? 0. 176 0 1. 588 ? 0. 077 0 3. 736 ? 0. 245 0 叶 11. 866 ? 1. 398 0. 406 ? 0. 023 9. 845 ? 0. 481 0. 114 ? 0. 008 11. 614 ? 0. 815 0. 400 ? 0. 017 果 1. 208 ? 0. 107 0. 022 ? 0. 002 1. 851 ? 0. 089 0. 004 ? 0. 001 1. 42 ? 0. 072 0. 019 ? 0. 002 A. 穿心莲内酯 D. 脱水穿心莲内酯 图 2 干燥前后穿心莲根、茎、叶、果实中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量比较 3 讨论 3. 1 中药材采收后,在其储藏过程中许多化学成分 会受热或酶等因素的影响而发生变化, 从而使其质 量发生变化,这在一些中药材中有报道 [ 5-7] , 如含挥 发油成分的中药材不能暴晒等。大部分中药材的干 燥方法对其活性成分和质量的影响还缺乏研究, 这 不利于中药材质量的保证,不利于中药材 GAP的有 效实施。 3. 2 采收后, 高温烘干的穿心莲根、茎、叶和果实中 穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量与新鲜样品中 1400 2009年 9月 第 31卷 第 9期 中 成 药 Ch inese T rad itiona l PatentM ed icine Septem be r 2009 Vo .l 31 No. 9 的含量相当。自然晒干的样品中, 总穿心莲内酯的 含量呈下降趋势。穿心莲叶、茎和根中穿心莲内酯 的含量降低,叶和果实中的脱水穿心莲内酯的含量 下降一半以上。但晒干后, 果实中穿心莲内酯的含 量显著上升。 3. 3 穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯不稳定,研究表 明,在贮藏过程中, 穿心莲内酯的含量逐渐下降,到 叶陈旧时,下降到 50%以上 [ 3] ,另外, 在高温高湿或 酸性条件下,穿心莲内酯含量也显著下降 [ 2]。本试 验的结果表明,在自然晒干的条件下,穿心莲内酯类 成分的含量会下降, 但在立即高温烘干时却没有显 著下降,这说明这种下降与穿心莲内酯成分的酶的 分解有关。瞬间的高温使酶失活, 从而避免了内酯 类成分的酶解。 3. 4 在晒干的过程中,穿心莲中其它部位中穿心莲 内酯成分的含量下降,但果实中的含量却上升,这与 植物对环境的适应及自我保护有关, 穿心莲内酯具 有抗氧化、清除自由基等作用。自然晒干的过程类 似于干旱的过程,植物体会激活其相关的代谢途径, 产生相应的成分如穿心莲内酯等保护其繁殖器官, 以达到繁衍后代之目的。 参考文献: [ 1] 中国药典 [ S ] .一部. 2005: 189-190. [ 2] 杨东升,陈松光,欧阳惠芳,等.穿心莲流膏中穿心莲内酯类成 分在烘干过程中的变化 [ J].中成药, 2003, 25( 11) : 8-10. [ 3] 颜玉贞,谢培山.穿心莲质量控制的再评价 [ J]. 中药新药与临 床药理, 1998, 9( 4) : 204-206. [ 4] 林蔚兰,曾令杰,梁惠瑜,等.不同产地穿心莲药材 HPLC指纹 图谱初步研究 [ J] .中成药, 2007, 29 ( 5) : 730-733. [ 5] 裘汉幸,蒋永海.不同干燥法丹参药材中丹参酮Ò含量的比较 [ J] .中国中药杂志, 2003, 28 ( 6) : 580. [ 6] 张 俭, 伍贤进, 罗增桂.鱼腥草干燥过程中化学成分含量及 抑菌效果变化的研究 [ J].食品科技, 2007, ( 4) : 89-92. [ 7] 苏 锦.不同贮存期的桂枝生品与炮制品的质量研究 [ J] .中 药材, 2001, 24( 4) : 260-262. 5中医药通报62010年征订、征稿启事 5中医药通报 6是中华中医药学会主办的系列杂志之一,为国内外公开发行的综合性中医药学术期刊。 本刊的办刊方针和任务是:全面报道我国中医、中西医结合、中药研究在临床、预防、科研、教学等方面的最新 进展、成果和诊疗经验,探讨中医药学术提高的思路和方法,介绍国内外中医药研究动态, 开展学术争鸣, 反 映中医药市场现状与开拓前景,临床治疗新方法及新药研究开发成果发布。 5中医药通报 6是国内唯一的通报类中医杂志。 2007年获国家中医药管理局颁发的全国中医药优秀期 刊奖。 本刊设有院士及专家论坛、进展述评、研究快报、获奖成果介绍、专笔谈、基础研究、临床论著、临床报 道、诊法研究、理法研究、针灸经络、中药研究、方剂研究、(中药 )新药介绍与评价、药物不良反应、实验研究、 医史研究、名医精华、名医研究、学术动态、综述、思路与方法、诊余心悟、茧斋夜话、医案医话、病例讨论、护理 研究等栏目。 欢迎国内外专家、作者踊跃投稿,惠赐佳作。 稿件要求一式二份,请注明联系电话、传真、E-ma il。稿件请寄本刊编辑部。 本刊为双月刊,大 16开本, 每期 66页,逢双月 25日出版。国内刊号 CN 35-1250 /R, 国际刊号 ISSN671- 2749。国内定价每期 10. 00元,全年定价 60. 00元。国外全年定价 60. 00美元 (上述定价均含邮资 )。 期刊邮发代号 34-95 订 阅 全国各地邮政局 (所 ) 欢迎新老订户订阅。如读者在当地邮局订阅不便或漏订,本刊编辑部可代办邮购。订阅款请汇入:开户 行:兴行吕岭支行,收款单位:中医药通报编辑部,账号 1293 001 001 000 40724。现金订阅请寄本刊编辑部, 订阅人姓名、详细地址,务必书写清楚。 地 址 厦门市仙岳路 1739号 5中医药通报6编辑部 收 邮 编 361009 电 话 ( 0592) 5579661、5579662 E-ma il zyytb@ yahoo. com. cn 1401 2009年 9月 第 31卷 第 9期 中 成 药 Ch inese T rad itiona l PatentM ed icine Septem be r 2009 Vo .l 31 No. 9