Ge2922延缓模拟日光照射引起豚鼠皮肤光老化的功效

十一 成果羹录 一 锈亿吉狗 先材己，度瞅 {广 啪 丢 ．用 日乞旺 0引言 苗小看，周远鹏 近年来人们开始重视锗的化合物在药物、营养保 健品、饮料、化妆品中的应用 有资料表明，GeZ922具 有抑菌作用，促进细胞组织生长及降低皮肤粗糙度的 功教。为此，我们用豚鼠光老化模型观察了 Ge2922 对皮肤的保护作用。 1 实验动物和材料 1．1 实验动物 白色豚 鼠 260～460g．雌雄兼用，由上海畜牧医 学会提供；在我所普通级动物房内饲养 ，每笼 5只，给 予饲料，自由傲水。 1．2 试验样品(由本所高科技室锗研究小组提供) (1)基质 主要成分 为凡士林 ，十六醇，吐温 60， 尼泊金酯，硬脂酸 ．单甘脂 ．甘油和水， (2)Ge2922；为氨基酸类锗的化合物，呈白色 粉 末，难溶于水和有机试剂 用基质配成 1000ppm(Ge 高剂量组 )和 500ppm(Ge低剂量组)浓度的膏体备 用。 1 3 试剂 (1)黄螵呤 (S[gam公司产品) (2)黄嘌呤氧化酶(S~gam公司产品) (3)1．1．3．3一 四甲氧基雨烷 (TEP．S[gam公司 产品 ) (4)白蛋白标准液(北京试剂厂产品) (5)L一羟脯氨酸(中国科学院生物物理所 中生公 司产品) (6)奎宁硫酸盐(北京化学试剂公司产品) 其它试剂均为国产分析纯。 1 4 模拟 臼光照射箱 长波紫外灯 (UVA)和 中波紫外灯 (UVB)均 购 自北京东升玻璃光源J 。用北京师范大学光电仪器厂 生产的 UVA和 UVB型紫外辐照计，在距光源 35cm 处 分 别 测 定 uVB(250～ 350am)和 UVA(320～ 400rim)的照射强度。 1 5 仪器 (1)高速组织匀浆机：江苏海门其林 医用仪器厂 制造 (2)低温高速离心机：日本 曰立公司产品 (3)F一4500荧光分光光 度计：日本 日立公司产 · j4 · · 品 f ， 2 实验方法 2．I 实验动物分组 实验动物随机分成 4组：模型组(涂抹基质 ，n= 6)；正常对照组(涂抹基质，lJ=8)；Ge高剂量组(涂抹 1000ppm Ge2922膏体 ．1／==9)和 Ge低剂量组 (潦抹 S00ppm GE2922膏体 ，n一8)。 2 2 涂抹试验样品方法 每次照射前剃净各组豚鼠背部毛．在 5、 6cm 的 实验区域 内均匀涂抹试验样品，涂抹量均为 0．6ml。 用保鲜膜包裹 3小时 ，而后用清水将所涂抹的试验掸 品洗净。将洗净后的各组动物 (除正常对照外)立即放 入模拟13光照射箱内，在距离光源 35cn 处同时进行 uVA和 uVB照射(uV照射)。 2．3 0V 照射过程 UVB的照射剂量小于最小红斑剂量 (MED)的 ltz。开始每周照射 3次 ，每次 UVA 的照射剂量为 5．67J／cm ，UVB为 0．0842J／cm 。在照射 8周后，每 周照射 5次，每次 UVA的照射剂量为 7．56J／cm ， UVB为 0 11 Z3J／cm 。在 连 续 uV 照 射 l6周 后 (UVA 累 积 照 射 剂 量 为：444．1J／cm ；UVB 为 ； 6 604J／cm )，于末次涂抹样品和照射后 ，闯隔⋯天， 取各组动物背部实验区域的皮肤分别测定其 SOD活 力 羟脯氨酸(Hyp)、脂质过氧化物(LPO)、脂福素和 蛋白等的含量。 2 4 皮肤主要生化指标(与衰老有关)的测定方 法 (1)皮肤组织匀浆的制备；连续 uv照射 1 6周， 于末次照射 24h后，剃净各组豚鼠背部毛，处死所有 实验动物。在冰浴条件下取实验 区域皮肤．去脂肪，称 重，剪碎，按 1 5(g m1)加入冰冷的 0．1M pH7．4 磷酸缓i巾液 ，用高速匀浆机制成 20 皮肤匀浆。于一 20℃低温冰箱保存。 (2)测定指标及方法：按文献方法稍作修改测定 皮肤中SOD活力；LPO脂褐素和 Hyp的含量．以及 蛋自的含量。 将 Ge高剂量组、低剂量组和正常对照组各项生 化指标的测定结果与模型组进行组比较 ，经 t检验 ， 判断上述各组差别的显著性 3 结果 由表 1可见uV长期照射后模型组动物皮肤中 SOD活力和 Hyp的含量明显减少．LPO和脂褐素的 含量明显增加，而且与正常对照组比较具有非常显著 维普资讯 http://www.cqvip.com 1996年第 2期 日 用 化 学 工 业 的差异(p<0．01)。证明了模型组动物的皮肤已处于 老化状态，豚鼠皮肤光老化模型的成立 ． 及基质对 皮肤光老化无任何作用。 Ge2922对皮肤几种生化指标的影响如表 1所 示，Ge高剂量组和低剂量组 SOD的活力分别比模型 组高：43．3(p<0、01)和 28．6 (p<0．05)；HyP的含 成果集录 量分别高出：1 5．4(p<0．05)和 8．7 p>o 05) 而 LPO 的含量仅相当于模 型组的 72．9和 74 7 (p< 0．05)；脂褐 素 的 含 量 相 当 于 模 型 蹦 的 85．4和 86．4 (p>0．05) 提示 ，在长期 uV照射引起豚 鼠 皮肤光老化过程中，Ge2922具有较强的延缓皮肤衰 老的护肤功效 。 表 1 Ge2922对uv长期照射下度肤生化指标为保护作用 注t所有数据均为 x土SD，与模型组进行组间比较 经 t检验 ．无。 p>0．05-*p