薄层色谱法分离红曲色素

￡ 期 籍 细 化 工 5t· 薄 层 色 谱 法 分 离 红 曲 色 素 甘纯吼 蔡春 燕’ (福建师范大学高分子研究所 ，福州ZIP 350007) 木文采用薄屠色谱法分离红曲色索组成成分 - 硅睫 GF-254为固定相，以乙醚 一苯 t乙醇 永{2O-22f40 15)为展开 剂．可分离出七十斑点．其中一十黄色斑点．一十具有荧光性质的无色斑点稻五个红色斑点．本文对展开弃|姐分用量的 选择 ．点样量及点样浓度对测定结果的影喧和重现性进行了探讨 ． · 红 曲色素是红 曲菌 (Monascus)培养过程 的代谢产物 用作食用色素，具有 良好的安全 性(11 但是 ，红曲色素组成成分 复杂 ， 不同 品种红曲菌得到的色素成分各不相同。因此， 建立红曲色素成分的分析方法，对鉴定其成分 和推广其用途，具有重要的意义。 前人曾用薄层色谱法分离红曲色素(2-3、4)． 均未得到较理想的结果 尤其是红 曲色素中的 红色组分通常只能分离出1～2个斑点。本文在 前人工作的基础上 ，以硅胶 GF一254为 固 定 相 以乙醚：苯；乙醇：水=20：22：4o：15(体积 比 )为展开剂 ，可分离出七个斑点 ，其中一个 黄色斑点，一个具有荧光性质的无色斑点和五 个红色斑点。 实验部分 (!) 材料与仪器 ① 试剂 ：化学试剂均为AR级。 ② 红曲色素：按文献(4 的方 法， 将福 建屏南酒 曲厂提供的色 曲，经丙 酮 提 取 结 晶 后，制成红 曲色素。 @ 仪器 ：玻璃层析缸，GF-254薄层层析 板 (青岛海洋化工厂生产，规格：5o×20ram ， 厚度：0．2～0．25ram，使用前，于 1 10℃干燥 箱中活化半小时 ，置干燥器内冷却至室温 )。 (2) 实验 方法 ① 样品的制备：取少量红曲色素 ，溶于 困酮中备州。 ② 测定方法 ：按文献( )的方法。 砭范覃再丽 盾率科毕业皇 结果与讨论 (1) 分离条件的确 定 在四组分展开剂中，分别保持其 中三种组 分的配合比例 改变其中另一种组分用量 ，得 到的结果如l所示。 实验结果表明，在展开剂中，增加乙醚或 苯的用量 可降低其极性，使SP值减小：增加 乙醇或水的用量 ，可提高其极性，使 SP值增 大。以分离效果较好的 0号展开剂为例，降低 其 SP值 ，主要影响极性较小的黄色素组强与 极性较大的红色素组分之间的分离效果 ；提高 其 sP值，则可能使各红色素组分间的分离效 果变差，红色斑点数减步 。 在四种展开剂组分中，乙醇的SP值与0号 展开剂的 sP值最接近，改变其用量不会明显 改变展开剂的 sP 值 ，但是 ，降低乙醇用量， 则可能弭显影响各红色素组分的分离效果。 展开剂的极性只是影响红曲色素分离效果 的一个因素，不可能完全决定其分离效果。伪 如，2—3号展开剂的 sP值为12．26，可以分离 得剜六 个斑点 ；而 SP值更接近 0号展开 的 3—4号展开剂 (sP=12．39)，则只能得蓊两个 分离的斑点 ，红色素组分完全无法分离开。 当展开剂的 sP值接近的情况下 ，其各组 分的配合 比例不同 ，也可能导致明显不同的分 离效果。例如 ，0号展开剂与 3—3号展开剂的 sP值只差0．05，前者可 以得到五个红色斑点 ， 而后者的几个红色素组分则无法分开。 在四种展开刹组分 中，任意缺少其 中一个 维普资讯 http://www.cqvip.com B2· 精 细 化 工 】o~oZ- 第 G鬈 表 1 开jf4对红曲立寨分离效果的影 晌 、＼ 、、— t～～ ： 一 、～斑 目 I Ⅱ Ⅲ Ⅳf V Ⅵ Ⅷ 童 『 备 注 ＼ (乙醚 ；革，乙醇 ：末)、 ～ — 黄 红 红 f 红 红 红 20=22；40 l5 l2 ．52 O．864 10．836 口．736 f0．654 0．6,30 0 ．500 0．40,3 l 0=22：40：15 l3． 1 0．833。0．822 0．8n l黄斑点棍有红色 10,22：40：15 13．01 0．859 10．822 0．778 j 霾 3,0·22 40：15 l2 06 0．878 ．844 0．744 红斑点稍有拖鼍 40,22：40：15 11．71 0 889 0．844 0．733 红斑点拖尾 20；0：40：15 13．51 0．822 0．767 0．722 黄红斑点分不开 20Il0：40：15 13．00 0．944 0．91l 0．833 i黄斑点倪有红色 ；2二-- 3 20,30：40 15 l2．26 0．857 0．827 0．722 j I 20：40=40·l5 11 ，99 0．851 j0．842 0．713 J 红斑点拖尾 20：22,60：15 l2．55 0．84 J0．800 0．741 黄红斑点分不靖 3--2 20：22：50t15 l2．54 0．859}0．833 0．778 0 ．722 f0．656 10．556 0．489 黄斑点混有红色 20：22：20：15 l2．47 0 811 0．767 —— ：f二i二J二 ￡ 点拖尾，部分不展开 20：22：0：15 l2 39 0．611 i0．400 _— 红班点原点不动 蒌f 2o=22I40：n l2．14 0．913 0．875 0．775 黄斑点碾有红色 20 22,40：l5．6 12．59 0．850 10．817 0．692 ． 7 1一J一 0：． 70 0 j。。兰。』二m0 744 0 7000 367 0 278 红斑点部分拖尾 20；22=40}13 12．29 D．9l1{0．889 0．800 20t22 140：0 10．53 0．911 0．867 0．878 ． {． 1一j— 红斑点拖尾，都分不展开 组分 ，都会 明显地 改变红 曲色素的分离效果 ， 使分离的斑点数减少，其中尤以乙醇的作用最 明显。 (2) 点样量对分离效果的影响 取0．01克红 曲色素，配成 2．5嘶(w／V)丙 酮溶液，以乙醚：苯：乙醇：水=2 0：22：4D：1 5为 展开剂，在不同点样量下进行测定，其结果如 表 2所示 表2结果表明，点样量过小时，可导致斑 点不明显，不易观察；点样量过太 ，则斑点过 太 ，相邻斑点界面不清晰。在一般条件下，点 样量对斑点的 Rf值无明显影响。当点样量为 (3) 点样浓度对分离效果的影响 以 乙醚：苯；乙醇 ：水=20 22：40：15为展开 剂，用不同浓度的样品在相同点样量下进行测 定 ，其结果如表 3所永。 表3结果表明 ，当点样浓度过低时，斑点色 淡，不易观察；当点样浓度过高时，斑点分离效 果变差。因此，点样浓度控制在1．25N 3．75嘶的 范围内，分离效果较 佳。 (4) 连续测定的精 密度 以乙醚 ：苯 ；乙醇 ：水=20_22：40：1 5为展开 剂 ，在相同条件下作连续重复测定 ，其结果如 表4所示 结 果表明，各斑点Rf值的连续测定 o+5毫克时，即可得到较好朐测定结果。 值的离差不起过。·。5 a 袅 2 点样量对红曲色素分离拽果的影响 、 盥 坞 I Ⅱ Ⅲ Ⅳ V n Ⅷ 备 注 【m1) ～ { 0．25 0．9z2 0．878 0．778 0．667 0．514 0．533 0．378 斑 点 Ⅲ不 明显 0．50 0．889 0．846 0+739 0．66L 0．610 0．512 0．383 0．75 0．889 0．846 0．739 0．645 0．603 0．513 0．400 鹂有拖尾 L_00 0．889 0．846 0．739 0．661 0．603 0．508 0．400 稍有拖尾 L．25 0．889 0．846 0．737 0．656 0．603 0．508 —— 斑 点界面不请晰 ．稍有拖尾 维普资讯 http://www.cqvip.com 第 5期 精 细 化 工 ·53 袁 3 点样 浓度对红曲色素分离蕴果的影晌 I Ⅱ Ⅲ Ⅳ V Ⅵ 备 注 确 (W ，V) 、、——_l = 0，625 0，900 o 856 』0 7 J o．722 0，黜 0，533 一 J 斑 色淡 1．25 0，890 0．868 0 780 J O．725 0 612 0．571 0．400 【 珏点色淡 l 88 0．895 m857 J O 769 l 0·714 0．687 O．56O 0．400 l 2 5O O．888 0．833 0．744 1 0．688 0 656 0．571 0．383 3．75 0．890 0．835 I D．T4T }0．703 0．6T0 0．549 0．387 I 黄红斑点界面不够精晰 5 O0 O．889 O．854 l 0．741i J 0．688 0 656 0．527 0．3fi7 I 黄斑点中混有红色 袁 4 薄层色谱往分离红伯色素的连续侧定精密度 一 一 ⋯ ☆ J I — I ’ I I 祥 目 ～曼 二翌一L I j j ： l ： 兰 兰 1 ’O．864 {0．836 1 0．1晰 J 0．654 1 0．600 0．500 0 曲0 l 、 2 1 0 889 0 f；46{o．130 1 0．661 l 0．610 t 0．512 l 0．3B3 l 3 f O 95』0．857 J 0，769 1 o，714 1 o 6e7 1 0，56o }o．400 I 4 1 0．888 o 833 I O ．T44 l 0 688 1 0．656 1 0．517 l 0．3B3 1 ’ ～ 一 ⋯ 一 一 一 ， ～ 一 』——一 —— ———— ————f『————— ————叶————————————■ ■- i 0 884 【j．843 0．747 f 0 6"／9 i 0．638 f 0．522 0．3蛆 f S }0．0137 0．0109 0．~Jl50{0．027,1f 0．04061 0 0262}0．Or．)98 J ’ 绪 论 ① 虹曲色素是 由多种成分组成的 。采用 薄层色谱法 ，以硅胶GF一 2^ 4为固定相 ，以乙 醚 ：苯 ：乙醇：水=20：22 4o：1 5为展开剂 ，可分 离出七／卜斑点，其中一个黄斑点，一个具有荧 光性质的无色斑点和五个红色斑点。 ② 点样量为0．5毫克时，分离效果较好。 ⑤ 点样浓度在1．25～3，75毋范围内，分 离 效果较 佳 ④ Rf值 的连 续 测 定 标 准 离 差 不 超 参 考 文 献 [1)甘纯现 ．精蛹化工 j(6)，42--43．19鬯L8 [2]Lee Ho g—j e，Sra~enn Jgi，ctleⅡ C ra 蟮一tan， 师大学报 (台湾 )，26，453~464，1981． [3]IsM~ata．Hajimu；WataⅡabe．Mie~iko； Tan ufa．AIi。．食品卫生学 杂春 ￡日 )． 15t1)， 36—42．1974． (4)刘丽红 ，葵乐净 ．甘纯玑 ．福建化工 ．‘I’，43-．45， 1船 9． 5)中国医学科学院药物研究所 。 薄屠屠离厦 其在中草药 分析中的 应用．科学出j馥社 ．1g78． (1船9年7月6日收稿 ) 1 990年 《沈阳化工 》征订启事 《沈阳化工 》是沈婀市石油化学工业管理 局按术情报站和沈阳市化学化工学会 编辑出版 醵综合 眭化学化工科技情报刊物。 辟有科学试验 ，化学工程、双革四新 、分 析测试 、 1 境保护 化工防旖、 节约能源 、微 机应用．特殊树脂 、溶解 乙炔 、安全生产、质 盈管理 、化工商情 ．化学配方、中小企业实用 技术 综合评述、专讲座等栏 口。 本刊为国内发行的双 月刊 ， 曰内 统 一刊 号：CN2卜l199，可供化工科 技人员、院校 师 生 ．干部工人参考。 全年六期 收工 本 资 9元 (含邮费 ) 恕不办理零期订阅。欢迎单位和 个人预订。订单函索即寄。订阅；请将订 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