食品中防腐剂山梨酸和苯甲酸的气相色谱内标法测定

食品中防腐剂山梨酸和苯甲酸的气相色谱内标法测定 陈希中 (福建省轻7-业研究所，福州·350005) 摘 要 连用嬖酸作内标物，气相色谱内标浩同时剥定食品中腑腐 山梨酸和苯甲酸．定量 准确，回收率均在 96 ～103 之间，样品测定的变异系教小，山梨酸为0．529 ，苯甲酸 为 0．311 关键词 食品防腐剂 气相色谱 内标法 山梨酸和苯甲酸是常甩的食品防腐剂． 广泛使用在饮料、酱油等多种食品中，它们具 有杀死微生物或抑制微生物增殖的作用，但 过量对人体有一定毒性，国家标准详细规定 了各类食品防腐剂最大使用限量及其检测方 法，该检测方法采用标准曲线定量法，配制一 系列不同浓度山梨酸和苯甲酸标准溶液·用 气相色谱仪测定其标准曲线，与样品色谱比 较定量 。 本方法在不改变国标中规定色谱条件 下．经大量实验筛选，用正癸酸作为内标物． 以内标法同时定量测定山梨酸和苯甲酸 方 法简便可靠，减少因萃取、进样、溶剂损失等 带来的误差。 1 实验部分 1．1 仪器和主要试剂 1．1．1 气相色谱仪 ． 岛津 GC—TAG，带氢火焰离子化检测 器，CLASS--GC10色谱工作站。 1．1．2 标准溶 液 分别精密称取山梨酸、苯甲酸、正癸酸各 0．200g，置于 3个 lOOml容量瓶中，用石油醚 ：乙醚(3—1)混合溶液溶解井定容，这些溶 液每毫升分别相当于 2rag山梨酸、苯甲酸或 收祷日期-l997—1—3O 山粟岐 ，岩甲酸 ’f ＼ 正癸酸。 f 取山梨酸、苯甲酸、正癸酸溶液各 lml 于 50ml容量瓶中，用石油醚 ；_乙醚(3：1) 定容混合溶液。该溶液山梨酸、苯甲酸和正癸 酸的浓度均为 40~g／ml。 1．1．3 乙醚，纯。 l_1．4 石油醚(30～60℃)，分析纯。 1．1．5 盐酸，6mol／L 1．2 实验步骤 l_2．1 样品处理 取一定(Sml或 5g)均匀样品于 25ml具 塞量筒 中，加 0．5ml盐酸酸化．加入 lml正 癸酸标准溶液，用 15ml，10ml乙醚提取两 次．每次振摇 lmin，静置 t0min．将上层醚层 吸入另一 25ml具塞量筒 中，合并醚层，静 置．即可作为色谱样液。 1．2．2 色谱条件 色谱柱：O3mm×2m玻璃柱，5 DEGS +1 H3PO4，Chromosorb WAW6O一8O目； 载气：氮气·50ml／min； 温度：样口中230℃，柱温 170~C。 1．2．3 测定 色谱仪稳定后，分别进山梨酸、苯甲酸和 正癸酸标准溶液．确定保留时间。进混台标准 溶液 D,1．求出校正因子 f (表 1)，输入 内标 ． 弓 维普资讯 http://www.cqvip.com 4O 食品与发酵工业 Food and Fermentation Industries v。1．23 No．3 定量法程序。 衰1 f。平均值夏精密麈试验培暴(n一6) 组舟 校正 园于 ft SD CV( ) 山梨酸 L146 O．0221 L 93 苯 甲酸 O 996 0．0157 1．57 进样液 1 l约 10rain，色谱工作站直接 给出山梨酸、苯甲酸含量。色谱图见图 1。 I ● 0 2 4 0 lO ⋯ 图 1 标准色谱图 3一山梨酸}4一癸酸}5一苯甲酸 2 结果s讨论 2．1 标准曲线法要求分析时所有分析 条件必须严格一致，进样量准确。山梨酸、苯 甲酸测定中，采用低沸点溶剂乙醚、石油醛、 标准溶液浓度易变，需时常校正，进样误差也 较易产生，因此实验工作中不易获得理想的 标准曲线，采用单点式的外标法时，易带来较 大误差。内标法是最常用的方法，测定条件稍 有变动并不影响结果 。对经常性检测项目， 可将定量方法存人色谱 软件，随时调用，非 常方便 本方法的准确度和精密度令人满意 (表 2，表 3)。 衰 2 标准回收试验培果(n=3) 山 梨 酸 苯 甲 酸 舔加量 测定值 回收 率 需 加量 测定值 回收率 (g／ ) (g／kg) ( ) (g／kg) (g／ ) ( ) O．2∞ O．1925 96．26 O．2OO O．1923 96．15 O．400 O．3866 96．6S O．4OO O．3858 96．46 O．6OO O．S840 97．33 O．6OO O．5827 97．1l O．800 0．7747 96．84 0．SOO O．7728 96．60 1．000 O．989O 98．90 1．00O 0．9783 97．83 1．5O0 1 S3ll 102 07 1 50O 1．5131 1OO．87 样品抠分 量X(g／kg){ SD { c、，( ) 山梨酸 l o．461 l 0．00244 { o 529 苯甲酸 l O．412 l O．00129 I n 311 2．2 内标定量法的关键是内标物的选 定，我们试测定了多种烷酸，在该色谱条件 下，碳数低于 1O的烷酸，出峰在山梨酸之前， 而磷数大于 12的烷酸，出峰在苯甲酸之后。 我们选定正癸酸(10烷酸)为内标，其保留时 间在山梨酸和苯甲酸之间，且与两组分分离 良好·是比较理想的内标物(图2)。 一 图 2 内标物的选定色谱囝 2一已酸I3一辛酸I 4一山梨酸-s一赛酸 6 苯甲酸I7 月桂酸 作为偶碳数饱和有机酸，正癸酸色标较 易获得，便于在较大批量的日常质量监督中 采用。某此发酵制品中可能含有癸酸，则不宣 选用其为内标，有报道可以用 l1烷酸作内 标[ 。 2．3 为减少因萃取损失造成的误差，本 方法采用样品加内标物共同萃取。实验证明， 萃取对准确定量关系很大。山梨酸和苯甲酸 在水中的溶解度稍太于正癸酸 ]。因此一次 萃取时，萃取回收率比癸酸低(分别为 83． 6 ，82．7 和 89．3 )，二次萃取后，回收率 都在 97 左右，基本持平，可满足定量要求。 若待测组分含量较低，可用 KD浓缩器 将萃取液浓缩至2~5ml，作为色谱样液。据 报道，不用KD浓缩器，山刺酸和苯甲酸会随 溶剂挥发 J 参 考 文 献 l 国家标准．食品卫生检验方法理北部分 维普资讯 http://www.cqvip.com 第23卷 第3期 陈希中：食品中防腐荆山梨酸和苯甲酸的气相色谱内标法测定 41 GB5009．29～ 85 2 吉林化学工业公司研究院．气相色谱实用手 册．北京：化学工业出版社，1980，P．441 3．陈贻文等．色谱，1987，5(4)；238～240 4 日本食品工业学会编．郑州粮食学院译．食 品分析方法．(下册)成都；四川科学技术出版社 Determination of Preservatives— — s0rbic Acid and Benzoic Acid in Food by GC Internal Standard M ethod Chen Xizhong (Fujian Research Institute of Li【 t Industry，Fuzhou，350005) j · ～ i 一 ‘ Abstract Selecting cagric acid as an h~tei'nal standard substance·detect preservatives— — sorbic acid and benzoic acid in food By GC．Quantitative analysis is accurate．The recoveries of added standards is 96 ～l03 。The CV of the samples determination are small，sorbic acid is 0．529 ，Benzoic acid is 0．3ll ． Key words preservative，gas chromatography，internal standard method (上接 第38页) A Biological M ethod for Nisin Determination and the F0RTRAN Program for Data Calculation Zhu Wenmiao (Department of Microbiology，Shandong Medical University，Jimn，250012) Liu W en M a Guirong (Institute of Microbiology，Shandong University，Jinan，250100) Abstract A rapid auxanographie method for nisin determination was established By means of a nisin sensitive strain．and a computer program was designed to calculate the data ob— tained．Its determination titer ranges from 5 to 100 IU／m1．The time--tested routine work in our laboraiory proved that it is rapid，precise and reliable． Key words Nisin bio10giical assaying method 维普资讯 http://www.cqvip.com