尼美舒利颗粒剂的人体生物等效性及相对生物利用度研究

科技论坛 ·57· 尼美舒利颗粒剂的人体生物等效性及相对生物利用度研究 张卫东 (哈药集团医药有限公司人民同泰医药连锁店，黑龙江 哈尔滨 150000) 摘 要：本文研究尼美舒利颗粒剂的人体生物等效性。方法：采用奥泰公司 C 色谱~(25o nllTl×4．6ram，5 m)，乙腈 一0．01mol／L磷酸 二氢钾(三乙胺调 pH=6．5)(55：45)，波长为298nm，流速为 1．Oml／min，柱温为30~C。尼美舒利在 1～1OIXg·mL～ 范围内呈良好的线性关系 (r：O．99996)。尼关舒利平均回收率分别为 98．51％。结论：本法简便、准确，可用于尼关舒利颗粒剂的人体生物等效性及相对生物利用度研 究。 关键词：尼美舒利；颗粒剂；生物等效性 尼美舒利颗粒具有抗炎、镇痛、解热等药理作用。尼美舒利颗粒 类风湿性关节炎、骨关节炎等、耳鼻咽部炎症引起的疼痛、痛经。尼 美舒利可抑制前列腺素合成酶环氧化酶一2的活性，能有效抑制炎 症介质而发挥抗炎作用【”。目前尼美舒利有多种剂型上市。本文对尼 美舒利颗粒剂的人体生物等效性及相对生物利用度进行研究。 1仪器与试药 1．1仪 器 ：Waters510高 效液 相色谱 仪 ；N2000色 谱 工作 站； B03001—004在线脱气机 (上海笛柏实验设备有限公司)；Waters2487 可变波长检测器。TG13M毛细管血液离心机(湖南星科科学仪器公 司)；奥豪斯 Explorer专业型天平 (奥豪斯仪器上海有限公司)； ELGA超纯水器(上海澜锐仪器科技有限公司)；JMLABO Tw系列通 用水浴槽(优莱博技术(北京)有限公司)；Hx一06超声波清洗器(武汉 恒信世纪科技有限公司)；TM一1901双光束紫外可见分光光度计(北 京普析通用仪器有限责任公司)。 1．2色谱柱：奥泰公司。C 色谱柱(250 mm x 4．6mm，5 m)。 1-3对照品：尼美舒利。购自中国药品生物制品检定所。 1．4试剂：甲醇为色谱纯；水为纯化水，其它试剂均为分析纯。 1．5试药：尼美舒利颗粒剂(国药准字 H20041489黑龙江瑞格制 药有限公司)。 2测定方法确定 2．1色谱条件 依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。流动相：乙腈 一 0．Olmol／L磷酸二氢钾f三乙胺调 pH=6．5)(55：45)，检测波长：298nm， 流速：1．0ml·min～。柱温：35℃。理论板数按尼美舒利峰计算应不得低 于 3000。 2．2对照品溶液的制备 尼美舒利对照品溶液：精密称取尼美舒利对照品适量，置容量瓶 中，加 65％甲醇制成每 lmL含3．0 g的溶液，即得。 内标溶液：精密称取吲哚美辛对照品适量，置容量瓶中，加 20％ 甲醇制成每 lmL含 30．5 g的溶液，即得。 2．3提取方法确定 2．3．1洗脱液的选择 在供试品溶液制备中，分别选用了40％乙腈 、65％乙腈 、50％甲 醇对活化好的strata～x固相萃取小柱进行洗脱，结果表明65％乙腈 分离效果 、峰形及含量为最好，所以选择 65％乙腈为洗脱液。 2．3．2洗脱液用量的选择 在供试品溶液制备中，分别选用了 800 l 65％乙腈 、1000 l 65％乙腈、1200 1 65％乙腈对活化好的strata—X固相萃取小柱进行 洗脱，结果表明用 1000 l 65％乙腈和 1200 l 65％乙腈洗脱含量 相同，选用 800 l 65％乙腈为洗脱液含量低于 1000 l 65％乙腈和 1200 l 65％乙腈洗脱，所以选择 1000 l 65％乙腈为洗脱液。 2．3．3供试品溶液的制备 供试品溶液。精密量取血浆样品液 100 l于2．0ml塑料离心管 中。加 100 l内标液，混匀，后全部上活化好的strata—x固相萃取小 柱，待其自然滤过后，再以2遍 1000 l蒸馏水和 I遍 1000 l 8％甲 醇水洗杂质，然后将萃取小柱转移到干净的 2．Oml塑料离心管上，向 萃取小 柱加入1000 l 65％乙腈，自然滤过接取洗脱液。混匀后 取 150 l转移到进样小瓶中，5 l进样，用内标法进行定量分析。 2．4专属性试验 取空白血样，照2．3．3项下供试品溶液的制备方法制成阴性液， 依上述方法测定，结果在尼美舒利出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性 试验没有干扰，表明本方法专属性良好。 2．5精密度试验 精密称取尼美舒利对照品适量，加 65％甲醇制成每 lmL含 3．0 g的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取 10 l，连续进样6 次，峰面积。结果，RSD=0．52％，表明本方法精密度良好。 2．6对照品的线性考察 精密称取尼美舒利对照品 5．0mg，置 100ml容量瓶中，加入 65％ 甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取 0．2、0．4、0．6、 1．2、1．6、2．0mL，置于 lOmL量瓶中，加空白血浆至刻度，摇匀。分别精 密上述溶液吸取 1O L，注人液相色谱仪，依照2．1项下的色谱条件 测定，记录色谱峰。以峰面积(Y)为纵坐标，对照品进样量(x)为横坐标， 绘制曲线，计算回归方程。结果表明，尼美舒利在 1—10 g·mL 范围内呈良好的线性关系。 2．7重现性试验 称取同一批的尼美舒利颗粒剂样品6份，按测定方法项下的方 法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果 RSD为 0．92％，结果表明此方法的重现陛良好。 2．8准确度试验 取空白血浆及对照品溶液，制备尼美舒利低、中、高三浓度的标 准血浆样品，每一浓度平行操作 5份，代人线性方程计算浓度．以测 得值与加入值的比值，计算回收率，平均回收率分别为98．51％，RSD 为 0．88％。 2．9样品稳定性试验 取同一批尼美舒利颗粒剂样品，按 2．3项下的供试品制备方法 制备供试品，将供试品置室温下放置，分别于第 0、2、4、6、8、10小时， 精密吸取供试品溶液 1071注入液相色谱仪中，记录色谱图。测定尼 美舒利颗粒剂中尼美舒利的RSD=0．81％。结果表明供试品l0小时 内稳定。 3讨论 3．1流动相的选择。分别考察甲醇 一水 一冰醋酸(33：66：1)，甲 醇 一水 一冰醋酸(13：86：1)，乙腈 一0．Olmol／L磷酸二氢钾(三乙胺调 pH=6．5)(55：45)，甲醇 一水(40：60)不同比例的流动相，结果以乙腈 一0． 01mol／L磷酸二氢钾(三乙胺调 pH=6．5)(55：45)为流动相，供试品各峰 分离效果最好，故选用，乙腈 一0．OlmoFL磷酸二氢钾(三乙胺调 pH=6． 5)(55：45)为流动相。 3．2检测波长的选择。制备尼美舒利对照品稀释液照紫外 一可 见分光光度法(中国药典 2010版一部 附录V A)，于 190～900nm波 长范围内进行全波长光谱扫描，记录吸收光谱。在 298nm处有最大 吸收峰，故选用 298nm为检测波长 。 3．3结果。受试者单剂量给予尼美舒利胶囊 T和 R200rag后血 浆中尼美舒利的含量缓慢上升至 3分钟时达到最高。试验制剂和参 比制剂中的 Auc 和 c一经对数转换后，进行方差分析，结果表明， Auc 和c一之间无显著差异(P>0．05)。受试和参比制剂的T一值 经 Mann—Whitney检验，不同制剂间无显著性差异fP>0．05)。 参考文献 【1】Alberto Bemareggi．Clinical Pharmacokineties of Nimesulide．Clin Pharmacokinet，1 998，35(4)：247 『21国家药典委员会．中国药典【s]．北京：化学工业出版社，2010：517．