尿液及体液一般检查

nullnull尿液及体液一般检查 上海交通大学医学院 胡晓波 副教授(一)尿液标本的种类kinds of urine specimens(一)尿液标本的种类kinds of urine specimens1．首次晨尿morning urine 2．随机尿random urine 3．餐后尿postprandial urine 4．定时尿timed urine 尿液标本的保存与防腐 storage and antisepsis of urine specimens尿液标本的保存与防腐 storage and antisepsis of urine specimens1．冷藏refrigeration 2. 防腐antisepsis尿液的理学检查 urine physical examination：尿液的理学检查 urine physical examination：尿量volume 颜色colourh混浊度turbidity 气味odour 尿量urine volume尿量urine volume多尿polyuria 少尿oliguria 无尿anuria尿色urine color 尿色urine color 正常尿液的颜色 红色 浓茶色、振荡后有黄色泡末 棕黑色 乳白色气味odor气味odor正常尿液 新鲜排出的尿液有氨臭味 烂苹果味 大蒜臭味 腐臭味 老鼠尿样臭味尿液化学检查 urine chemical examination尿液化学检查 urine chemical examination干化学尿液仪的发展史干化学尿液分析仪的发展史1956年，美国Ames和Lilly两家公司几乎同时创建了测定尿糖的Clinistix和TesTape试剂带。 1957年，美国Ames推出测定尿液蛋白Albustix试剂带。 1958年，推出尿糖和尿蛋白的二联Uristix试剂带，次年有推出尿糖、尿蛋白、和尿pH的三联Combistix试剂带。Multistix试剂带。 20世纪70年代，半自动尿液分析仪按测试项目分类按测试项目分类8项尿液分析仪 尿蛋白、尿糖、尿pH、尿酮体、尿胆红素、尿胆原、尿潜血和尿亚硝酸盐 9项尿液分析仪 尿白细胞 10项尿液分析仪 尿比重 11项尿液分析仪 颜色或维生素C 12项尿液分析仪 颜色和浊度尿液分析仪原理尿液分析仪原理 null 尿液pH 试带法：酸碱指示剂法，测试模块中含有甲基红（pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝（pH6.0~7.6)，两种酸碱指示剂适量配合可反映尿pH5.0~9.0的变异范围。肾功能 食物 生理活动 药物 疾病常见影响尿液pH的因素常见影响尿液pH的因素null 尿比重（比密） 称重法、浮标法、折射计法 试带法 多聚电解质（甲乙烯稀酸酰马来酐）含有随尿标本中离子浓度而解离的酸性基团，离子浓度越多，酸性基团（氢离子浓度）解离越多，而使模块中的pH改变，这种改变可由模块中的酸碱指示剂变化显现出来pH6.2~7.0 比密的变化范围在1.000~1.030 蛋白质浓度增加使比密结果增加null尿胆红素试带法 在强酸的介质中直接胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应生成红色的复和物。null尿胆原 试带法： 在强酸性条件下，尿胆原与对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应，生成樱红色缩合物，模块发生从黄色到红色的颜色变化。 在强酸条件下尿胆原和对-甲氧基重氮四氟化硼发生重氮盐偶联反应，生成胭脂红色化合物。null尿液pH 胆红素的形成量 肝细胞功能 胆道梗阻null 尿 液 胆红素 尿胆原 正 常 阴性 少量 肝前性黄疸 阴性 显著增加 肝原性黄疸 阳性 轻度增加 肝后性黄疸 阳性 减少或无null 葡萄糖glucose [reference interval] 定性：阴性 定量：<2.78mmol/L null尿中是否出现葡萄糖取决于三个因素： 动脉血液中葡萄糖浓度 每分钟流经肾小球的血浆量 近端肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的能力null 摄食性糖尿、神经、精神性糖尿糖尿葡萄糖尿非葡萄糖尿生理性糖尿病理性糖尿妊娠期糖尿真性糖尿病胰岛外性糖尿肾性糖尿 胰岛外性高 血糖性糖尿半乳糖尿 果糖尿 戊糖尿 其他糖尿尿糖定性试验尿糖定性试验 1.班氏法（Benedict法）含有醛基的葡萄糖，在高热及碱性溶液中能将蓝色的硫酸铜还原为黄色的氢氧化亚铜及红色氧化亚铜，出现黄色至砖红色沉淀物。null 加班氏试剂1ml加热取尿液0.1ml加入上述试剂中再加热冷却判断结果null尿糖定性结果判断: 实验结果 结果判断 相当含量（g/L） 仍呈蓝色 - 蓝绿色，无沉淀 ± ＜0.1 绿色，有少量 + 0.1~0.5 绿黄色沉淀 黄绿色，有较多 ++ 0.5~1.0 沉淀 土黄色，有大量 +++ 1.0~2.0 沉淀 砖红色沉淀，上 ++++　　 　＞2.0 清液无色null 2.试带法： 试带模块中主要含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和色源及其他物质。 葡萄糖氧化酶（ glucose oxidase ,GOD）作用于尿液中葡萄糖，使其形成葡萄糖醛酸和过氧化氢（H2O2），后者在过氧化氢酶（POD）的催化释放出[O]，后者使色源呈现不同的颜色变化。null蛋白质protein [reference interval] 定性：阴性 定量：<0.1g/Lnull尿蛋白血浆蛋白 组织蛋白肾小球性肾小管性混合性溢出性组织性泌尿系统、泌尿外系统 肾病综合征、肾病性蛋白尿 原发、继发肾小球疾病肾小管间质病变、中毒性肾病 浆细胞病、血管内溶血、肌肉损伤肾脏疾病、炎症、中毒、泌尿道结石 泌尿道、生殖道炎症、出血、排泌物污染null尿蛋白定性 1.磺柳酸法:在酸性条件下，磺基水杨酸的阴离子和蛋白氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋白盐沉淀。 敏感度 0.05~0.1g/L NCCLS将其定为干化学检查蛋白的参考方法，并推荐为检查尿蛋白的确证试验。null加磺硫酸2滴null     实验结果 结果判断 相当含量（g/L） 清晰透明无 - 0 改变 黑色背景下， ± 　 ＜0.1 极轻度混浊 明显白色混浊， + 0.1~0.5 但无颗粒 明显混浊， ++ 0.5~2.0 出现颗粒 大量絮状沉淀 +++ 2.0~5.0 但无凝块 严重混浊， ++++ ＞5.0 有大凝块null 2.加热醋酸法 加热煮沸使蛋白变性、凝固，然后加酸使尿液pH接近尿蛋白质等电点，在含有适量无机盐状况下，蛋白质更易于变性沉淀。null 3.试带法 pH指示剂的蛋白误差原理 蛋白质具有两性离子的电荷性，在溶液中，能被指示剂相反电荷的静电吸引，而生成蛋白指示剂复合物，引起指示剂的进一步电离，从而使其所显示的pH颜色发生转变，这种色泽变化的差别，与蛋白质的含量成正比。null试带法影响因素： 尿液pH值 尿液所含蛋白成分 尿液中的干扰物 尿液存放的时间及污染null 隐血 试带法：尿液中的血红蛋白或其破坏释放的游离血红蛋白均含有亚铁血红素，后者具有过氧化物酶样活性，可使过氧化物分解释放出新生态氧[O]，[O]能使无色的邻甲联苯胺变成蓝色。null 2.试带法： 亚硝基铁氰化钠，在碱性条件下可与尿液中的乙酰乙酸、丙酮起反应，呈现紫色。尿液必须新鲜，及时送检 不同病程酮体成分的变化会给检测结果带来差异。尿酮体 1.湿化学法：null 尿亚硝酸盐 试带法：当尿液中有大肠埃希氏菌增加时，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐，其可将模中的氨基磺胺重氮化而成重氮盐，后者与1，2，3，4-四氢并喹啉-3偶联，使模块产生红色，借以诊断患者是否被肠杆菌科细胞感染。尿路感染的病原微生物种类 体内适量硝酸盐的存在 尿液标本留取的时间 药物的影响菌尿症常见微生物及致病率菌尿症常见微生物及致病率null 白细胞计数 试带法：中性粒细胞胞浆中含有的酯酶作用于模块中吲哚酚酯，使其产生吲哚酚，后者与重氮盐反应形成紫色化合物，其颜色的深浅与细胞的多少呈比例关系。null 维生素C 试带法：VitC在酸性条件下使染料还原，模块颜色发生改变。血红蛋白、胆红素、葡萄糖、亚硝酸盐尿液分析试纸尿液分析试纸项目 缩写符号 反应原理 酸碱度 pH pH指示剂 蛋白质 PRO pH指示剂的蛋白质误差法 葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶法 隐血 BLD 血红蛋白类过氧化物酶法 胆红素 BIL 偶氮反应法 尿胆原 URO 醛反应法、重氮反应法 酮体 KET 硝基铁氰化钠法 亚硝酸 NIT 亚硝酸盐还原法 白细胞 LEU 酯酶法 比密 d（SG） 多聚电解质离子解离法 抗坏血酸 ASG 还原法null 中华医学会提出尿液干化学分析仪筛检的标准： 当干化学尿液试带质量合格、尿液分析仪运转正常情况下，试验结果中白细胞、红细胞、蛋白及亚硝酸盐全部为阴性时，可以免去显微镜检查。 干化学过筛适用范围的局限性 干化学过筛适用范围的局限性 肾科和泌尿科病人的尿液不适合于干化学过筛显微镜检查。 以镜检结果作为诊断依据或疗效观察时，不宜使用干化学方法作为过筛。 要结合临床现判断结果。不可只看干化学分析，忽视镜检。 尿液的外观与尿沉渣有一定的相关性。当尿液外观异常时，应注意显微镜检查。 干化学试剂带的质量、稳定性及质量控制与过筛的准确性密切相关。组合型试带组合型试带肾病型四联试带：pH、蛋白、隐血、比密 糖尿病型五联试带：pH、蛋白、葡萄糖、 酮体、比密 肝脏病型二联试带：胆红素、尿胆原结果分析：结果分析：（二）尿标本制备prepare of urine specimen：（二）尿标本制备prepare of urine specimen：     1.离心centrifugation 离心10ml尿（离心管）水平离心机有效半径为15cm， 相对离心力为378G 1500转5分钟 弃上清液，取剩余约0.2ml混匀吸取混匀液0.02ml于载玻片上盖片（18*18mm或22*22mm），防止产生气泡 低倍镜下：全片观察，计数管型（20个视野） 高倍镜下：细胞计数、复查管型、结晶（10个视野）null 2.不离心not centrifugate       3.染色 stain 二．尿细胞成分检查及临床意义 urinary cell element examination and clinic significance二．尿细胞成分检查及临床意义 urinary cell element examination and clinic significance （一）红细胞red cell （一）红细胞red cell参考值reference interval： 混匀一滴尿 0~偶见/高倍视野 离心尿 0~3个/高倍视野 1.量quantity 1.量quantity肉眼血尿：如果每100ml尿液中含有0.1ml以上的血液时，肉眼能看到不同程度的浑浊红色，称为肉眼血尿。 Visual hematuria: Excretion of urine containing blood, which can be demonstrated by eyes. Usually RBCs are more than 50/HPF by the microscope. null显微镜血尿microscopic hematuria：100ml尿液中含有0.1ml以下的血液，肉眼看不见，只有通过显微镜才能发现，称显微镜血尿。 Microscopic hematuria: Excretion of urine containing blood, which can be demonstrated only by the microscope and usually equal or more than 3/HPF.null2.形态form（质quality） 新鲜尿中红细胞形态对鉴别肾小球源性和非肾小球源性血尿有重要价值。异形红细胞 >30%肯定诊断为肾小球性； 15%～30%初步诊断； <15%肯定诊断为非肾小球性。 红细胞（非肾小球源性）红细胞（非肾小球源性） 红细胞（S染色：非肾小球源性） 红细胞（S染色：非肾小球源性）瘤状、环状、岛状红细胞（未染色）瘤状、环状、岛状红细胞（未染色）用相差显微镜观察计数红细胞，参照Brich和李惊子判断标准将红细胞结果分为三型：用相差显微镜观察计数红细胞，参照Brich和李惊子判断标准将红细胞结果分为三型：（1）均一型（均一红细胞血尿homogeneous erythrocyte hematuria） （2）多形型（变形红细胞血尿metamorphotic erythrocyte hematuria） （3）混合型（混合性血尿mixed hematuria）诊断diagnosis：肾小球源性血尿多为变形红细胞血尿，或以其为主的混合性血尿。3.鉴别identification：3.鉴别identification： 名称 形态 折光性 大小 排列 加蒸馏水 化学试验 红细胞 淡黄色双 弱 一致 无规律 破坏 隐血（+） red cell 凹圆盘状 脂肪滴 无色正圆形 强 不一致 不一致 不破坏 苏丹III染色 fat drop 草酸盐 无色圆形 强 不一致 无规律 不破坏 10%盐酸可 oxalate salt 椭圆形 溶解 酵母菌 无色椭圆形 强 不一致 有规律 不破坏 隐血（-） yeast 淀粉颗粒无色类圆 弱 不一致 无规律 不破坏 遇碘成蓝 starch 形椭圆形 紫色 （二）白细胞white cell（二）白细胞white cell正常normal：偶见1~2个/Hp。 白细胞white cell 白细胞white cell 镜下脓尿microscopic pyuria：如果镜下白细胞大于5个/Hp为增多。 Microscopic pyuria: The production of urine that contains white blood cells, when inspected by the microscope. Examples which may result in pyuria include urinary tract infection, tuberculosis, cancer and acute pyelonephritis. null 脓细胞pus cell：炎症时白细胞发生变异或已死亡，其外形变得不规则，结构不清，称为脓细胞，其往往成团分布。闪光细胞glitter cell：急性肾盂肾炎时，在低渗条件下，有时可见中性粒细胞胞质内颗粒呈布郎运动，由于光的折射，出现闪光现象。 嗜中性白细胞（未染色） 嗜中性白细胞（未染色）临床意义clinic significance：临床意义clinic significance： 白细胞增加主要见于泌尿系统炎症、结核、结石，以及膀胱、尿道恶性肿瘤、肾小球肾炎白细胞可轻度增加。null验尿潜血反应（+） 尿沉渣检查红细胞（+）红细胞（-）显微镜性血尿null显微镜性血尿尿蛋白（+）尿蛋白（-）尿沉渣红细胞形态学检查变形红细胞（+）变形红细胞（-）尿沉渣检查白细胞（-）白细胞（+）泌尿系统疾病尿道感染图象检查 尿细胞诊断 膀胱镜肾小球疾病肾功能检查 图象检查 肾活组织检查（三）吞噬细胞phagocyte（三）吞噬细胞phagocyte 形态form：比白细胞大，含吞噬细胞 意义significance：泌尿道急性炎症，常伴白细胞增加。 （四）上皮细胞epithelial cells：（四）上皮细胞epithelial cells： 尿中所见上皮细胞有：肾小管、肾盂、输尿管、膀胱、尿道等处脱落。1.正常鳞状上皮细胞（扁平上皮细胞） squamaus epithelial cell 1.正常鳞状上皮细胞（扁平上皮细胞） squamaus epithelial cell 正常normal: 尿液中可见少量。 来源souce：来自尿道前段和阴道黏膜的表层。 形状form：见图 临床意义clinical significance：如大量出现，见于妇女尿中成片出现无临床意义，如同时伴有大量白细胞，表示泌尿生殖系统炎症。下一张 表层扁平上皮细胞（未染色） 表层扁平上皮细胞（未染色）胞体较大，扁平似鱼鳞，形状不规则呈多角形，边缘常卷折，胞核小而明显，呈圆形或卵圆形。 表层扁平上皮细胞（S染色） 表层扁平上皮细胞（S染色） 返回2.移形上皮细胞transitional epithelial cell2.移形上皮细胞transitional epithelial cell正常normal: 少见。 来源source:肾盂、输尿管、膀胱和尿道近膀胱段等处的移形上皮细胞。 形状form：这类细胞由于部位不同和脱落时器官收缩状态的差异，其大小和形态有很大差别。（1）表层移形上皮细胞（大圆上皮细胞）（1）表层移形上皮细胞（大圆上皮细胞）正常normal：偶见，成片脱落可见于膀胱炎 来源souce：膀胱上皮表层，阴道上皮中层 形态form：在器官充盈时脱落，则胞体较大，约为白细胞4~5倍，多呈不规则圆形，核较小，常居中央；在器官收缩时脱落，则胞体较小，约为白细胞2~3倍。（2）中层移形上皮细胞（尾形上皮细胞）（2）中层移形上皮细胞（尾形上皮细胞）来源souce：多来自肾盂,有时亦可来自输尿管及膀胱颈部 形态form：体积大小不一，常呈梨形、纺锤形或尾形，核较大，呈圆形或椭圆形 意义significance：正常不易见，上述部位有炎症可成片出现 （3）底层移形上皮细胞（和肾小管上皮细胞统称为小圆上皮细胞）（3）底层移形上皮细胞（和肾小管上皮细胞统称为小圆上皮细胞）形态form：体积较小，形态较圆。底层上皮细胞核相对较小，而整个胞体比肾小管上皮细胞大 。3.肾小管上皮细胞 renal tubular epithelial cell 3.肾小管上皮细胞 renal tubular epithelial cell 来源souce：来自肾小管 形态form：形态往往不规则，常为多边形，故又称为多边形细胞，与白细胞相似，较白细胞略大（大1/3左右），有一个大而明显的核和一些不规则的颗粒，胞质中有小空泡、颗粒或脂肪小滴。 见图 意义significance：正常不见或偶见，成片出现表示肾小管有坏死性病变，肾移植排斥反应可出现成片。复粒细胞compound granular cell（脂肪颗粒细胞）：在某些慢性肾病中，常见肾小管上皮细胞发生脂肪变性，浆内充满脂肪颗粒，甚至将胞核遮盖，此细胞称为复粒细胞。 见图 肾小管上皮细胞（未染色） 肾小管上皮细胞（未染色）肾小管上皮细胞（S染色）肾小管上皮细胞（S染色） 肾小管上皮细胞（S染色） 肾小管上皮细胞（S染色）返回 复粒细胞 compound granulation cell 复粒细胞 compound granulation cellnull 4.多核巨细胞multinuclear giant cell 来源souce：一般认为是由尿道而来的移形上皮细胞。 形态form：大小20~25um，呈多角形，椭圆形，有数个椭圆形的核，可见嗜酸性包涵体。 意义significance：见于麻疹、水痘、腮腺炎、流行性出血热等病毒性感染者尿中。 5.非典型性细胞atypical cell5.非典型性细胞atypical cell肾脏和尿路系统肿瘤细胞，应用巴氏染色。 扁平上皮癌细胞（S染色：子宫） 扁平上皮癌细胞（S染色：子宫） 移形上皮细胞（S染色：膀胱癌） 移形上皮细胞（S染色：膀胱癌） 三、管型casts 三、管型casts1877年 德国学者Vigla和Rayer最先报道 1962年 Mcqueen用免疫学方法证明透明管型是TH粘蛋白和少量白蛋白为主的血浆蛋白凝固沉淀而构成管型的基质 1944年 Olive用显微解剖观察肾单位时，明确证实尿管型是在远曲肾小管和集合管的官腔中所见的圆管状铸形null一、定义definition：尿液中蛋白在肾小管、集合管内凝固而成的圆管状结构物。 二、形成条件formation condition： 1．蛋白尿的存在 2．肾小管有使尿液浓缩和酸化的能力 3．要有可供交替使用的肾单位（一）透明管型hyaline cast（一）透明管型hyaline cast形状form：无色、半透明，圆柱形，大小，长短不一，通常两边平行，两端钝圆，平直或略弯曲，甚至扭曲。在暗视野下易见，在碱性尿液中或稀释时，可溶解消失。 正常参考reference：0~1/LP（浓缩尿中偶见）透明管型的意义hyaline casts significance：透明管型的意义hyaline casts significance：正常人激烈运动或老年人，一般无临床意义。如持续多量出现，并可见异常粗大的透明管型和红细胞，表示肾小管有剥落现象，说明肾脏有严重的病变。肾脏轻度/暂时性功能改变，肾实质病变时，透明管型增加。 透明红细胞管型——肾出血 透明白细胞管型——炎症 透明脂肪管型——肾病综合征 （二）细胞管型cellular cast （二）细胞管型cellular cast 其含细胞数量超过管型体积的1/3，包括红细胞、白细胞、上皮细胞管型，常表示肾脏病变在急性期。Cellular cast A cast in which there are red blood cells or/and white blood cells et al. 1.红细胞管型red cell cast：1.红细胞管型red cell cast：红细胞常互相粘连而无明显的细胞界线，有时因溶血现象只存在红细胞的轮廓。如红细胞已破坏，使管型基质呈红褐色后称“血液管型blood cast”或“血红蛋白管型hemoglobin cast” 意义significance：表示肾脏有出血。急性肾炎、慢性肾炎急性发作。急性肾小管坏死、肾移植后急性排斥反应、溶血性输血反应。 2.白细胞管型leucocytes cast2.白细胞管型leucocytes cast其中含白细胞、脓细胞或其凝块，POX染色呈阳性。 意义：化脓性炎症，见于急性肾盂肾炎、间质性肾炎；非化脓性炎症，见于SLE肾炎。 3.上皮细胞管型epithelial cell cast3.上皮细胞管型epithelial cell cast含肾小管上皮细胞，表示肾小管上皮有脱屑性病变。 意义significance：肾小管病变如急性肾小管坏死、急性肾炎、重金属和化学物质中毒、肾移植排斥反应及肾淀粉样变性。上皮细胞管型epitheial cell cast（S染色）上皮细胞管型epitheial cell cast（S染色）（三）颗粒管型granular cast（三）颗粒管型granular cast定义：内含大小不同的颗粒，其量超过1/3面积时称为颗粒管型。外形较短且亮，淡黄色或棕黑色。 来源：细胞崩解的残渣，或血浆蛋白及其它物质直接聚集于基质而形成的。分为粗颗粒管型和细颗粒管型。 意义：粗颗粒管型——慢性肾小球肾炎 细颗粒管型——慢性肾炎、急性肾炎后期。（四）肾功能不全管型renal failure casts（四）肾功能不全管型renal failure casts形状：宽达50um以上，是一般管型的2~6倍，又称宽幅管型（broad cast）。宽而长，不规则，易折断。 来源：损坏的肾小管上皮细胞碎屑在内经宽大的集合管内凝聚而成。 意义：急性肾功能不全多尿早期、慢性肾功能不全示预后不良（五）脂肪管型fatty casts（五）脂肪管型fatty casts含大小不等折光性强的脂肪滴，为肾小管上皮细胞脂肪变性后的破碎物。 意义：慢性肾炎，尤肾病综合征、类脂性肾病。 （六）蜡样管型waxy casts（六）蜡样管型waxy casts形状：蜡黄色，质较厚，折光性强，边缘常有切迹，有时分节或扭转状。 来源：管型在肾小管中停留时间过久或淀粉样变的肾上皮细胞溶解所致。 意义：肾小管有严重的变性坏死，是不良之兆。见于慢性肾炎晚期，肾淀粉样变。 （七）易误认为管型的物质（七）易误认为管型的物质 1.类圆柱体cylindroid： 意义：肾血循环障碍或肾受刺激有关。 2.黏液丝mucous strands： 意义：正常情况下可见于正常人尿，尤其是妇女。增高表示尿道受到刺激或有炎症反应。 3.假管型pseudo cast：四、结晶crystals （一）酸性尿中结晶四、结晶crystals （一）酸性尿中结晶 常见非病理性结晶：尿酸、尿酸盐、草酸钙 病理性： 亮氨酸、酪氨酸——见于严重的肝实质损伤如急性肝萎缩、肝硬化、磷和氯仿等中毒； 胆固醇——乳糜尿、脓尿等； 胆红素——黄疸、急性肝萎缩、肝癌、肝硬化； 胱氨酸——结石可能、PNH、先天性胱氨酸病 （二）碱性尿中结晶：（二）碱性尿中结晶： 磷酸盐结晶：三联磷酸盐无意义； 无定型磷酸盐无意义； 磷酸钙—常与代谢性疾病相伴随 碳酸钙：无意义，加HAC溶解，产生气泡 尿酸钙：如刺苹果，若新鲜尿中出现，示膀胱细菌感染。 null 尿液标本 混浊 加酸 加热 变清 变清 产生气泡 磷酸盐 碳酸盐 尿酸草酸钙结晶calcrium oxalate crystal（未染色）草酸钙结晶calcrium oxalate crystal（未染色） 磷酸氨镁盐结晶 磷酸氨镁盐结晶 尿酸钙结晶（未染色） 尿酸钙结晶（未染色） 尿酸结晶（未染色） 尿酸结晶（未染色）胆固醇结晶cholesterol crystal胆固醇结晶cholesterol crystal胆红素结晶bilirubin crystal胆红素结晶bilirubin crystal 含铁血黄素颗粒 含铁血黄素颗粒五、细菌和真菌 germ and fungi五、细菌和真菌 germ and fungi 细菌germ（S染色） 细菌germ（S染色） 真菌fungus（未染色） 真菌fungus（未染色） 埃及血吸虫 埃及血吸虫六、传统结果： 六、传统结果报告： 报告 正常参考值 白细胞 0~5 红细胞 0~3 上皮细胞 0 结晶 0~3/HP（非病理性） 管型 0 酵母菌 0 滴虫 0 细菌 0~5/HP（数量过多时按 视野范围：+~++++） 脂肪 0七、尿沉渣检查中存在的问题：七、尿沉渣检查中存在的问题： 1.各实验室之间检查方法不统一。 2.各检验机构、检验人员之间报告结果差异较大。 3.实验步骤尤分析前繁琐，干扰实验的各个环节较多。质控物制备困难,易受主观因素影响,难以标准化。 八、定量板报告方式**/ul 八、定量板报告方式**/ul 定量板：配套的尿沉渣检查系统kova system,包括： 12ml塑料刻度离心管； 带壶腹的塑料移液管； 10孔固定6.6ul定量的有机玻璃板； S-M染色液； 含不同细胞的质控物。（一）操作步骤：（一）操作步骤：尿液12ml，有盖kova管，RCF400G，r=6英寸（约15cm） 插入kova吸管，倾去上清液，移去吸管 加sternheimer、Malbin染料 用吸管混匀，吸适量移至kova计数板（每池内有10个大方格，每大格1mm2，每大格有9个小方格） 低倍镜下数10个大方格管型；高倍镜下数10个大方格细胞数然后计算**/L  null （二）FAST-READ 10 尿沉渣定量分析板包括： 1.Biosed尿沉渣离心管； 2.FAST-READ10尿沉渣定量分析板 八、注意事项：八、注意事项：1.新鲜尿，最好用中段尿，以免细菌生长和细胞破坏。 2.加热加酸消除尿酸盐和磷酸盐结晶。 3.操作步骤、手法一致，以利对照。 4.尿宜使用PH酸性，以保持有形成分，因高浓度和低PH有助于保存有形成分， 5.女性尿常混有阴道分泌物，必要时冲洗外隐后留取标本。 脑脊液 脑脊液Cerebrospinal Fluid, CSF  一、概述overview  一、概述overview（一）历史： （二）CSF的生成 ： （三）CSF循环 ： （四）CSF的功能 ： （五）CSF的组成成分： （六）CSF检查目的（下一张） （二）CSF的生成：（二）CSF的生成： 婴儿为50ml；成人为150ml CSF生成率是0.3~0.4ml/min，每天分泌的量不超过400~500ml，4~8小时更新1次，每日更换3~4次。 （返回） （三）CSF循环：（三）CSF循环： 脉络丛（脑室）主动分泌和超滤作用产生 侧脑室 室间孔 第3脑室 中脑导水管 第4脑室 正中孔和外侧孔 珠网膜下腔 珠网膜上矢状窦（静脉窦）吸收后进入静脉 返回（四）CSF的功能（四）CSF的功能1．保护功能 2．调节颅内压 3．代谢作用 返回 （五）CSF的组成成分：（五）CSF的组成成分：1.易透过的物质：Na+,cl-，Mg2+,CO2,乙醇。 2.不易透过的物质：清蛋白,葡萄糖,尿素,氨基酸,肌酐，酮体，酶，乳酸。 3.最不易透过的物质：纤维蛋白原,胆红素,抗体,补体，胆固醇等。 返回 Blood-brain barrier（BBB）:The barrier exists between the blood and the central nervous system, the brain and the spinal cord.二、CSF采集spinal tap二、CSF采集spinal tap（一）穿刺部位tap position： ———————————————————         CSF压力的正常值 卧位 坐位 —————————————————————————————————— 腰椎穿刺 60~180mmH2O 350~400 mmH2O lumbar puncture 小脑延髓池穿刺 8~100 mmH2O 0 cerebellomedullary cistem 脑室穿刺 70~120 mmH2O 0或负数 lateral ventricle ———————————————————（二）腰椎穿刺适应证 lumbar puncture indication（二）腰椎穿刺适应证 lumbar puncture indication不明原因剧烈头痛、昏迷、瘫痪脑膜刺激症 疑颅内出血，脑膜白血病，神经梅毒 锥管给药、造影、腰麻（三）禁忌证contraindication（三）禁忌证contraindication疑有颅内高压者 处于休克，衰竭或濒危状态者 腰椎TB、穿刺部位有化脓性感染灶 颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状者 （四）标本采集specimen collection（四）标本采集specimen collection无菌采集 压力测定 收集三管 T1 bacterial examination T2 chemical and immunological examination T3 cell count 各1~2ml,立即送检。   二、CSF常规检查内容 content of CSF routin examination    二、CSF常规检查内容 content of CSF routin examination （一）一般性状检查general examination 1.颜色colour 2.混浊度turbidness即透明度transparency 3.薄膜film形成和凝块 coagulum 4.比密specific gravity 5.pHnull 1.颜色colour：正常：无色透明病理：呈红色、红褐色、柠檬黄色或淡黄色。(1) 红色 血性CSF的大致红细胞数 血性CSF的大致红细胞数 外观和性状 估计红细胞数/L 轻度浑浊 （500~1000）×106 粉红色 （1000~3000）×106 明显红色 大于5000×106 血性 大于10000×106 三管试验：三管试验：穿刺出血：留取标本时，第一管为血性，以后两管颜色逐渐变淡，红细胞计数结果也依次减少。 珠网膜下腔出血：三管呈均匀红色。区别新鲜出血和陈旧出血 区别新鲜出血和陈旧出血 区别新鲜出血和陈旧出血 新鲜出血 陈旧出血 外观： 浑浊、易形成凝块 较透明 离心沉淀： 无色透明 红、褐、黄 上清液 OB（+） 红细胞形态 ：无变化或无皱缩 有改变 白细胞数： 不增加 继发性或反 应性增加 红细胞/白细胞 ： 500 ： 1 失去正常比例 出血性 郁滞性 梗阻性 黄疸性 其他色素2.黄色：CSF黄变症cxanthochromin 3.其他颜色 3.其他颜色棕色或黑色 绿色 米汤样浑浊 乳白色2.混浊度即透明度2.混浊度即透明度观察方法：在腰穿后1小时取CSF 3~5ml，置无色透明玻璃试管内，在自然光线下进行观察。 报告: 清亮 微混 混浊 3.薄膜形成和凝块 3.薄膜形成和凝块 purulent meningitis——往往1~2小时内形成薄膜，凝块或沉淀 tuberculous meningitis——12~24小时形成膜状物或纤细凝块 neurosyphilis——出现小絮状凝块而不形成薄膜 subarachnoid cavity obstruct——其远端部位的CSF因蛋白含量呈黄色胶胨状 normal：pathology：4.比密4.比密正常：1.006~1.008 增高：cephalitis、meningitis、brain hemorrhage、brain verminosis and tumor,etc。 5.PH5.PH正常:7.31-7.34二、显微镜检查 microscopic examination二、显微镜检查 microscopic examination CSF细胞的种类 CSF主要来源于血液中的细胞 去向主要通过淋巴系统引流、变性和血液回流。 正常: 病理:null1．细胞计数 （1）细胞总数 （2）白细胞计数法 （3）红细胞计数 （4）白细胞正常值：0~10 × 106/L2．白细胞分类 （1）直接法： （2）染色法： 正常 淋巴：单核 = 7：3 4.临床意义: clinic significance4.临床意义: clinic significance null（1）CSF中性粒细胞增多：脑膜炎症，特别是急性炎症的渗出期；出血和脑挫伤等。 （2）淋巴细胞占优势：急性病毒感染、急性细菌性感染的恢复期、慢性细菌性感染或霉菌性感染，肉芽肿等。 （3）嗜酸细胞增多：见于脑寄生虫病、变态反应性疾病。 （4）白细胞增多，原始/幼稚增多：急性脑膜白血病。 null（5）吞噬细胞：如出现多见于中枢神经出血、炎症、外伤等，最常见于珠网膜下腔出血。 （6）肿瘤细胞：脑、脊髓或软脑膜恶性肿瘤，特别是肉瘤如黑色素肉瘤或髓母细胞瘤 （7）细胞数×106/L：化脑、流脑极度增高大于1000×106/L以中性粒细胞为主。 结脑初以中性粒细胞为主，后淋巴细胞增多，10~500×106/L。 （三）化学检查chemical examination（三）化学检查chemical examination 1.蛋白质protein： 部位 蛋白含量（mg/l） 脑室 50~150 脑池 100~250 腰部脊髓珠网膜下腔 150~400 1)蛋白定性：正常阴性 1)蛋白定性：正常阴性 （1）潘氏法（Pandy’s）：蛋白+石炭酸——不溶性蛋白盐白色沉淀，沉淀量与蛋白量成正比结果易于观察。 方法特点：样本用量少，操作简单，灵敏度高，总蛋白大于0.25g/l即可阳性。（2）Ross-Jone’s：球蛋白+半饱和硫酸铵——白色 沉淀 特点：检测球蛋白，敏感性较弱。（3）Nonne-Apett’s（诺-爱） 特点：先测球蛋白，除去球蛋白后，再以加热醋酸法测白蛋白，特异性高于潘氏，但操作较繁，极少选用。（4）李文生试验Levinson’s：用磺硫酸、氯化高汞分别沉淀蛋白根据两管沉淀物比例以区分化脑/结脑。 2)蛋白定量2)蛋白定量 （1）比浊法：磺基水杨酸（沉淀白蛋白） —硫酸钠（沉淀球蛋白）浊度法。 特点：操作简单，敏感性不如考马氏亮蓝法，必须先离 心，以排除细胞及细胞蛋白的影响。（2）染料结合法：考马氏亮蓝法G-250 特点：灵敏度高，标本用量少，重复性好，但对球蛋白 的显色过浅，使结果偏低；对pH要求较严；形成的考 马氏亮蓝-蛋白复合物易黏附器皿，影响比色杯清洗 困难，要用95%乙醇或甲醇清洗。（3）化学结合法：邻苯三酚红钼络和法 特点：敏感度同上，色素不吸附器皿，国产价格低廉，故应用较广。3)临床意义clinic significance3)临床意义clinic significance 增高 脑梗阻、脑炎、脑出血、脑软化、及脑退行性变、颅内占位病变等。减低 CSF鼻漏、耳漏、颅内压增高、甲亢。2.葡萄糖glucose2.葡萄糖glucose腰穿： 2.5~4.4mmol/L 小脑延髓池：2.8~4.2mmol/L 脑室： 3.0~4.4mmol/L CSF中葡萄糖含量取决于以下几种因素： 1.血液葡萄糖的浓度 2.血脑屏障的通透性 3.CSF中葡萄糖的酵解程度 4.携带运转系统的功能 null 1)定性（半定量）：基本同尿糖班氏法 2)定量：葡萄糖氧化酶法 3)临床意义： 增加：糖尿病、早产儿、新生儿、脑水肿、脑溢血。 下降：化脑减少最明显、霉脑、结脑、脑瘤、神经梅毒、低血糖。 3.氯化物chloride3.氯化物chloride CSF中氯化物主要是NaCl含量高于血中正常normal: 120~130mmol/L 临床意义clinic significance： 减低 见于结脑最明显、流脑、化脑、低氯血症，病毒性脑炎无显著变化。 增高 见于尿毒症、肾炎。 (四)细菌检查bacteriologic examination(四)细菌检查bacteriologic examination1.direct smear Gram’stain Neisseria menigitidis、streptococcus pneumoniae Acid-fast stain tubercle bacillus India ink preparation Cryptococcus 2.bacterial culture Staphylococcus aureus、streptococcus pneumoniae、Hemolytic streptococcus 、Escherichia coli Ne