10促甲状腺激素TSH

东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-10 促甲状腺激素TSH 版序：2005-1 页码：第1 页，共4 页 用途： 用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的促甲状腺激素（thyrotropin,TSH）含量。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys、2010免疫测定仪。 概述: TSH是一种分子量为30kD的蛋白质，由二种亚单位组成。β亚单位携带TSH特异的免疫学和生物学信息；α亚单位携带种族特异性信息，与LH、FSH和hCG的α链上的某些氨基酸组成的肽段有一致性。TSH在垂体前叶的特异性嗜碱细胞内生成。垂体释放TSH是机体发挥甲状腺素生理作用的中枢调节机制，刺激甲状腺素的生成和分泌，并有增生效应。TSH是查明甲状腺功能的初筛试验。游离甲状腺浓度的微小变化就会带来TSH浓度向反方向的显著调整。因此，TSH是测试甲状腺功能的非常敏 感的特异性参数，特别适合于早期检测或排除下丘脑-垂体-甲状腺中枢调节环路的功能紊乱。Elecsys TSH测定方法应用二种TSH特异的单克隆抗体。其中钌标记的抗体是人和鼠的嵌合性抗体，因此可极大程度地消除HAMA（人抗鼠抗体）的干扰。 原理： 采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。 · 第1步：50 µl 标本、生物素化的抗TSH单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗TSH单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。 · 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 · 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 ·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。 试剂： M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，12ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。 R1：生物素化的抗TSH单克隆抗体（灰盖），1瓶，14ml。浓度2.0mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.2。含防腐剂。 R2：Ru(bpy)32＋标记的抗TSH单克隆抗体（黑盖），1瓶，12ml，浓度1.2mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.2。含防腐剂。 东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-10 促甲状腺激素TSH 版序：2005-1 页码：第2 页，共4 页 储存和稳定性： 存放在2-8度，切莫倒置。 未开封，可稳定至标明的保质期。 开封后，2－8度12周； 放E170上，6周； 放在Elecsys2010上， 8周（使用后放回2 －8度；如置20－25度，约20小时）。 标本采集和准备： 血清：按标准常规方法采集。 血浆：肝素锂、钠、铵；EDTA-K3 ；枸橼酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝均可。标本在2－8度可稳定7天，-20度可稳定1个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。 不要使用加热灭活的标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。 检测步骤： 提供的： 货号：11731459，200人份的ElecsysTSH试剂盒包含： · M 链霉亲和素包被的微粒 · R1 生物素化的抗TSH单克隆抗体 · R2 三联吡啶钌标记的抗TSH单克隆抗体 需要的材料（未提供）： · ElecsysTSH定标液（CalSet）货号11731483 · Elecsys TSH质控品（PreciControl）货号11776479 · Elecsys通用质控品（PreciControl Universal）货号11731416 · Elecsys通用稀释液（DiluentUniversal）货号11732277 · Elecsys、2010分析仪 · Elecsys系统缓冲液（ProCell）货号11662988 · Elecsys 测量池清洗液（CleanCell）货号11662970 · Elecsys 添加剂液（SysWash）货号11930346 · Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean） ）货号11933159 · Elecsys 2010反应杯（Assay Cup） 货号11706802 · Elecsys 2010吸样头（Assay Tip) 货号11706799 · Elecsys 系统清洗液（SysClean） 货号11298500 东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-10 促甲状腺激素TSH 版序：2005-1 页码：第3 页，共4 页 方法： 按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。 将冷藏试剂预温到20 度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器 自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。 定标： 每批TSH试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用TSH CalSet定标液定标。 定标频率： 每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次， 如再次标定即根据下列要求： · 一个月（同一批号试剂） · 7天（放置仪器上的同一试剂盒） ·根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。 质控： Elecsys通用质控品（PreciControl ）1和2、Elecsys TSH质控品或其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应 适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。 计算： 对每一个标本，仪器会自动计算FSH含量，单位是μIU/ml或mIU/l 干扰因素： 该方法不受黄疸（胆红素<41mg/dl）、溶血（血红蛋白<1g/dl）、脂血（脂质1500mg/dl）和生物素<60ng/ml干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子（3250U/ml）干扰，透析病人的标本也无干扰。TSH浓度高达1000μIU/ml也不出现钩状效应。26种常用药物经试验对本测定无干扰。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔可遇到高链霉亲和素抗体的干扰。ElecsysTSH测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。 东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-10 促甲状腺激素TSH 版序：2005-1 页码：第4 页，共4 页 检测范围： 0.005-100μIU/ml 稀释： 高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1:10稀释。稀释后的标本TSH含量必须高于10μIU/ml。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。 正常参考值： 0.27-4.2μIU/ml(范围：第2.5百分位－第97.5百分位,n=516) 如有必要各实验室应自己测定一个参考值范围。