11厦门-乙型肝炎病毒e抗体( HBeAb )

东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-01-11 乙型肝炎病毒e抗体( HBeAb ) 版序：2005-1 页码：第1 页，共2 页 [前言] 一些乙型肝炎病人或带毒者体内可产生HBeAg，它作为抗原刺激机体免疫系统产生相对应的专一性抗体HBeAb。 [原理] 本试剂盒采用竞争法原理检测人血清或血浆原液中的抗-HBe。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强等优点。 [试剂盒组成] 1、包被板条 6、底物液A 2、阴性对照血清 7、底物液B 3、阳性对照血清 8、终止液 4、酶标记物溶液 9、浓缩洗涤液 （用蒸馏水1：19稀释后使用） [试剂厂家] 厦门英科新创科技有限公司 [试剂的稳定性与贮存] 试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。 [标本的收集与处理] 标本为无溶血血清。 [操作步骤] 1、加样：设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔。分别加阴、阳性对照血清各1滴（50ul）和50ul待测样本于相应孔内。 2、加酶：除空白对照孔外，每孔加1滴酶标记物，轻轻振荡。 3、中和：每孔加1滴中和抗原，轻轻振荡封板后，置37℃水浴60分钟。 3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次后在吸水纸上拍干。 4, 显色：每孔加底物液A、B 各1滴，轻轻振荡封板后，置37℃水浴15分钟。 [结果判定] 1、目测：在白色背景下观察各孔颜色，无色或兰色明显浅于阴性对照者判为阳性，兰色与阴性对照相近者判为阴性。 2、酶标仪检测（选波长450nm）：每孔加终止液1滴后，用空白孔校零，测定各孔OD值。 东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-01-51 乙型肝炎病毒e抗体( HBeAb ) 版序：2005-1 页码：第2 页，共2 页 临界值（C.O.）=0.3×阴性对照平均OD值； 样本OD值S/C.O.≤1者为抗-HBe阳性。（即S≤临界值） 样本OD值S/C.O.＞1者为抗-HBe阴性。（即S＞临界值） 注：阴性对照孔OD值大于1.5时，按1.5计算；小于1.5时，按实际值计 [质量控制] 每批检测同步进行标准和质控品测定，绘制室内质控图 。其它按室内质量控制管理规定进行。 [参考范围] (接上页) 酶联免疫吸附试验（ELISA）：抑制率〈50%为阴性 [临床意义]: （1） 慢性乙型肝炎HBeAb阳性占48．3%，肝硬化为68．3%，肝癌为80%。 （2）HBeAb阳性率增高，明多数患者乙型肝炎病毒感染的时间可长达7－27年。 （3）HBeAb阳性仍会有一定的传染性。在HBeAb阳性的孕妇分娩婴儿中可有20%感染乙型肝炎病毒。 [注意事项] 1、不同批号的试剂不可混用。 2、试剂用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。 3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。 4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。 5、若浓缩洗涤液出现结晶，可于37℃放置至溶解。洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内含有游离酶不能洗净。 6、本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作。