21梅毒特异性试验( TPPA )

东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-01-21 梅毒特异性试验( TPPA ) 版序：2005-1 页码：第1 页，共2 页 [原理] 用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒，此致敏颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反应。 [试剂厂家] 富士瑞必欧株式会社 日本东京 [试剂组成] （1）“A”溶解用液 （2）“B”血清稀释液 （3）“C”致敏颗粒（冻干）：用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀 （4）“D”非致敏颗粒（冻干）：用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀 （5）“E”阳性质控血清 [试剂的稳定性与贮存] 试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。 [标本的收集与处理] 标本为无溶血血清。 [操作步骤] 孔 号 1 2 3 4 血清稀释液“B”（ul） 100 25 25 25 ------》 ------》 ------》 -----》弃去25ul 血清标本（ul） 25 25 25 25 标本稀释度 1：5 1：10 1：20 1：40 加非致敏颗粒“D”（ul） --- --- 25 ---- 加致敏颗粒“C”(ul) ----- ----- ----- 25 血清最终滴度 1：40 1：80 置微型振荡器振荡30秒，放在湿盒里，室温2小时后观察结果。 [结果判断] 颗粒凝集覆盖于整个孔底，可呈多边形膜状，边缘粗糙......阳性2+--4+ 颗粒凝集呈多边形粗糙大环状 ...... 阳性1+ 颗粒浓集呈边缘光滑的小环状 ...... 可疑+- 颗粒聚集在孔中央,光亮,边缘光滑 ...... 阴性- 东莞常平医院 免疫实验室 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-01-21 梅毒特异性试验( TPPA ) 版序：2005-1 页码：第2 页，共2 页 [吸收试验] 孔内标本与非致敏和致敏颗粒均产生凝集者,标本需作下列重吸收试验 （1）加 0.95ml 非致敏颗粒溶液于小试管内. （2）加入50ul血清,充分混匀,置室温吸收30分钟以上. （3）离心2000rpmX 5分钟,吸取上清液50ul加入孔3. （4）自孔4--孔10各加血清稀释液"B"25ul. （5）自孔3吸25ul至孔4,混匀后吸入25ul至孔5......如此稀释至孔10,弃去25ul. （6）按定量试验法加入"D"和"C",振荡30秒,置有盖湿盒室温2小时,观察结果. [质量控制] 为确保测试结果准确可靠，每批测试均应放置阴阳性质控血清与被检样品同时测试，用以检查试剂性能。 [临床意义] 该试验用于检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体的存在与否，对评估受检人是否曾经感染过梅毒螺旋体有较高的特异性。但由于该抗体可在被感染人的机体中存在较长的时间（长达五年），故不适宜用于疗效的观察。