氢氧化钾提高尿液干化学白细胞的检出率

氢氧化钾提高尿液干化学白细胞的检出率 【摘要】 目的 探讨氢氧化钾(KOH)对尿液干化学白细胞(WBC)检出率的影响。方法 将尿沉渣仪检测提示WBC升高且镜检确认为阳性，而干化学试纸检测为阴性的标本70份，加入0.1 ml的10.0 mol?L-1 KOH溶液混匀后重新检测;将尿沉渣仪检测、镜检、干化学都为阴性的标本30份(男、女各15份)加入0.1 ml的10.0 mol?L-1KOH溶液作对照。结果 70份假阴性标本滴加KOH重新检测后全部为阳性;30份阴性标本重测结果仍均为阴性。结论 加入KOH可有效提高干化学白细胞的检出率,降低假阴性率 【关键词】 白细胞;尿液干化学法;氢氧化钾 尿液干化学法具有检测速度快、项目多的特点，尤其对尿路感染具有较迅速的诊断价值，但在试纸灵敏度不够或存在干扰因素的情况下会产生假阴性，引起误、漏诊。有文献报道，尿液干化学白细胞(WBC)检测的灵敏度与尿液pH值有关〔1〕。本研究旨在探索在尿液中加入氢氧化钾(KOH)溶液，以提高WBC检出率,降低假阴性率。 1 材料和方法 1.1 材料 标本来自1 468例本院10 d门诊患者的随机尿液样本。 1.2 仪器和试剂 尿沉渣仪及其配套试剂、质控品(批号:A7010)均为日本Sysmex公司生产，H10?尿液分析仪及其配套试纸(批号:20071020和20071120)、质控品(批号:20070629)均为长春迪瑞实业有限公司生产。Olympus双筒显微镜为日本奥林巴斯光学工业株式会社生产。分析纯KOH由上海第二试剂厂生产。 1.3 方法 仪器操作均按操作手册进行，手工离心镜检按《全国临床检验操作规程》进行，阳性标本判断以参考文献〔2〕:尿沉渣分析仪计数WBC>26个?μl-1,且手工离心镜检每高倍镜下WBC数>5个;尿干化学试纸检测WBC为1+或以上。阴性判断标准:尿沉渣分析仪计数WBC<14个?μl-1,尿干化学分析试纸检测WBC阴性，手工离心镜检每高倍镜下WBC数<4个。两者之间的可疑样本不选用。假阴性判断标准:尿沉渣分析仪检测提示WBC升高并镜检确认为阳性，而干化学试纸检测为阴性的标本。每日做完质控后进行样本检测。 2 结 果 2.1 提高检测率的最佳浓度 (1)取阴性标本30份，每份分成4小份，每小份尿液6 ml，分别加入10.0 mol?L-1的KOH 0.05、0.1、0.15和0.2 ml混匀后重新检测，结果见表1。(2)取假阴性标本30份，操作方法同阴性标本，结果见表2。表1 阴性标本加KOH后重测WBC结果(n=30)份表2 假阴性标本加KOH重测WBC结果(n=30)份 由表1、2可见，6 ml尿液中加入10.0 mol?L-1的KOH 0.1 ml为最佳浓度，既可以保证阳性标本全部被检出，又可以减少假阳性的出现。 2.2 加KOH后的重测结果 尿沉渣分析仪和离心涂片镜检阳性者560例， 1 468份尿标本中 尿干化学试纸检测假阴性203例，假阴性率为36.25%。我们取其中的70份假阴性标本，每份取6 ml尿液加入10.0 mol?L-1 KOH 0.1 ml混匀后重检测，结果见表3。表3 假阴性标本加KOH重测WBC结果由表3可见，加入KOH后，70例假阴性标本重新检测后全部为阳性。 3 讨 论 尿干化学法检测WBC是利用中性粒细胞中的酯酶水解试纸中的吡咯酚酯产生游离酚，游离酚与苯酚基重氮盐偶联，生成紫色偶氮染料。但如果中性粒细胞中的酯酶没有释放出来(或释放较少)，则不能快速水解吡咯酚酯，在较短时间内不能充分反应而使试纸检测WBC成假阴性。 从本试验结果可以看出，单用尿干化学法检测假阴性率达36.25%，对于糖尿病病人，尿路感染是较常见的并发症，反复发作后可以转为慢性。慢性感染后的尿液可能以淋巴细胞为主，而淋巴细胞中不存在中性粒细胞酯酶，也会导致WBC检测假阴性使检测率降低。本实验中有5例(5/203)尿糖(3+),(4+)的阴性标本，加入KOH混匀重新检测后均为阳性。与文献报道〔〕的尿糖对WBC检测有影响的结果不符。因此，笔者认为，尿糖对尿液WBC的检测结果没有影响，这仅是试纸检测的局限造成的假阴性。 从本试验WBC假阴性的203例标本中，亚硝酸盐(NIT)、隐血(Bld)、蛋白(Pro)也都为阴性的标本有90例。如果以1996年的标准〔5〕:干化学检测NIT、Bld、Pro、WBC都为阴性的标本就可以免镜检，那本研究中将有6.13%(90/1 468) 的阳性漏检率(加上Bld的假阴性，实际上漏检率将高于6.13%)。因此，笔者认为，尿试纸干化学NIT、Bld、Pro、WBC四项都为阴性的标本就可以免镜检的决定有待商榷，赞同张晓宁〔6〕提出的干化学加混匀一滴尿镜检作为过筛的观点。 在进行干化学检测中，本科都是在室内质控在控的前提下进行样本检测，而室内质控是一种中性粒细胞酯酶已释放的溶液，因此做质控时能很快与试纸反应。当测定标本时，试纸中的白细胞破坏剂量不足(或没有破坏)，中性粒细胞酯酶释放较慢，则在较短时间内不能充分反应而使结果出现假阴性。因此，笔者认为，在试纸白细胞膜块中加入破坏白细胞的试剂KOH可使白细胞酯酶快速释放，结合定量加入尿液的尿液分析仪检测，能较好地控制KOH的浓度使其达到WBC完全破坏，而不至于产生假阳性。从而有效地提高WBC检测的灵敏度，也能解决室内质控品与尿样本之间的差异。 【参考文献】 〔1〕郭东洁，安国瑞，聪慧.尿液的pH对干化学比重与白细胞的影响〔J〕.河北医药，1998，20(2):113. 〔2〕刘成玉.临床基础检验学实验指导〔M〕.2版.北京:人民卫生出版社， 〔3〕陈春华.尿液中葡萄糖对干化学检测白细胞的影响〔J〕.临床检验杂志，2007，25(5): 〔4〕杨妍，贾林，贾惠琳.尿糖对尿液分析仪血细胞干化学检测的影响〔J〕.医学检验，2006，27(4): 〔5〕朱忠勇.中华医学会检验学会临床血液与尿分析专题研讨会纪要〔J〕.中华检验医学杂志，1996，19(2): 〔6〕张晓宁.摒弃尿干化学法筛选标准，推行干化学法+混匀一滴尿镜检作为过筛〔J〕.中华检验医学杂志，2007，30(7):