亚硝酸盐暴露对红耳龟与中华条颈龟幼体的慢性毒性效应

亚硝酸盐暴露对红耳龟与中华条颈龟幼体的慢性毒性效应 DO I: 10. 3969 / . j issn. 1000 - 7083. 2011. 02. 004 亚硝酸盐暴露对红耳龟与中华条颈龟幼体的慢性毒性效应 1 1 3 1 1 , 2 3 1 1张杰 , 洪美玲 , 廖广桥 , 史海涛 , 李闯 , 胡茂柜 ( )1. 海南师范大学生命科学学院 ,海口 571158; 2. 中国科学院成都生物研究所 ,成都 610041 ( () 摘要 :对比研究了亚硝酸盐 4个浓度 N aNO0、100、200、500 m g /L 暴露对红耳龟 帄均体重 13189 g ?1167 g, n2 )()= 224 和中华条颈龟 帄均体重 13112 g ?1183 g, n = 236 机体慢性毒性效应的影响 。结果表明 ,红耳龟各暴露组 肠 ( ) 中亚硝酸盐含量均低于中华条颈龟 ,且胁迫 20 d时差异极显著 P < 0101 ; 胁迫 20 d、40 d时红耳龟肝中亚硝酸 盐 ( ) 含量高于中华条颈龟 ,但 60 d时却明显低于中华条颈龟 。同时 ,红耳龟肝肠中超氧化物歧化酶 SOD 活性始终 高 ()于中华条颈龟 ,丙二醛 MDA 含量始终低于中华条颈龟 ;红耳龟暴露 40 d后肝中 SOD 活性增强 , MDA 含量减少 , 而中华条颈龟 SOD 活性依旧降低 , MDA 含量继续增加 ,这说明红耳龟比中华条颈龟具有更强的适应力和耐受力 。 本研究为红耳龟生态入侵机理研究提供了生理学依据 ,为保护物种多样性提供了理论依据 。 关键词 : 亚硝酸盐 ; 红耳龟 ; 中华条颈龟 ; 慢性毒性 ( ) 文章编号 : 1000 - 7083 2011 02 - 0173 - 05 中图分类号 : Q95916; Q956 文献标识码 : A Effec ts of C hron ic Am b ien t N itr ite Expo sure in T ra ch em ys sc r ip ta e lega n s an d M a u rem ys s in en s is 1 1 3 1 1 , 2 3 1 1ZHAN G J ie, HON G M e i2ling, L IAO Guang2q iao, SH I H a i2tao, L I Chuang, HU M ao2gu i ( 1. Co llege of L ife Sc ience s, H a inan No rm a l U n ive rsity, H a ikou 571158 , Ch ina; )2. Chengdu In stitu te of B io logy, Ch ine se A cadem y of Sc ience s, Chengdu 610041, Ch ina A b stra c t: In o rde r to de te rm ine the effec ts of am b ien t n itrite expo su re on tu rtle s, 224 juven ile T rachem ys scripta elegans (() ) we igh t = 13. 89 g ?1. 67 gand 236 juven ile M au rem ys sinensis we igh t = 13. 12 g ?1. 83 gwe re random ly d ivided in to fou ( ) r group s [ NO2] 0, 100 , 200 , 500 m g /L to study the effec ts of ch ron ic am b ien t n itrite expo su re be tween the two sp e2 c ie 2 s. The re su lts showed tha t: n itrite concen tra tion in the in te stine wa s lowe r in T. s. elegans than in M. sinensis, and itπs ( ) sign ifican tly d iffe ren t when expo sed 20 d P < 0. 01 ; n itrite concen tra tion in the live r of T. s. elegans wa s h ighe r a t 20 d ( ) and 40 d expo su re, bu t lowe r a t 60 d expo su re. Sup e roxide d ism u ta se SOD ac tivity in the live r and in te stine of T. s. ele2 () gans we re h ighe r than tho se in M. sinensis, howeve r m a lon ic d ia ldehyde MDA leve ls we re lowe r. A fte r be ing expo sed fo r 40 d, SOD ac tivity inc rea sed and MDA leve ls dec rea sed in the live r and in te stine of T. s. elegans w ith tim e, bu t fo r M. sinensis, SOD ac tivity still dec rea sed and MDA leve ls inc rea sed. The refo re, the se re su lts ind ica ted tha t adap ta tion and the an ti2stre ss ab ility in T. s. elegans we re stronge r than in M. sinensis. Key word s: n itrite; T rachem ys scripta elegans; M au rem ys sinensis; ch ron ic toxic ity ) 2001 。红耳龟竞争和耐受逆境的能力强 ,严重危害 ,红耳龟 T rachem ys scripta elegans已在多个 目前 ( (土著龟的生存和繁殖 ,甚至导致其灭绝 Pe rez2San ti2国家造成生物入侵危害 N ewbe rry, 1984; D a Silva & ) ) B la sco, 1995; Mo ll, 1995 。我国 几 乎所 有的 宠 物市 go sa et a l1, 2008; 史 海 涛 等 , 2009 。中 华 条 颈 龟 () 场上都能见到有红耳龟出售 徐婧等 , 2006 ,且在我 M au rem ys sinensis广布于海南省且已大规模 人工 养 () ( ) 殖 龚世帄等 , 2005 。本研究以中华条颈龟为参照 , 国台湾地区已经造成 入 侵危 害 Chen, 2006 , 被列 ( 对比环境胁迫因子对二者的慢性毒性效应 。为世界最危险的 100 个外来入侵物种之一 IUCN , 收稿日期 : 2010 207 205 接受日期 : 2010 209 212 () ()基金项目 :国家自然科学基金 No. 30910103916 ; 国家大学生创新性实验计划项目 No. 081165804 ( ) 作者简介 :张杰 1986 ,, 男 , 2006 级本科生 , 生物科学专业 , 从事室内龟类养殖工作 , E2m ail: zhangjie9860129 @ 1261com 3 通讯作者 Co rre spond ing au tho r, E2m a il: ha itao2sh i@ 263. net 致谢 : 海南师范大学生命科学学院傅丽容老师和汪继超老师在实验中提出了宝贵意见 ; 刘孙翔 、贺斌 、廖英 、吕冰 、邓娇 、陈义 、梁茜茜和岳维维 等同学在实验和论文修改中给予了大力帮助 ,在此一并感谢 。 在众多的环境胁迫因子中 ,水中氮污染尤为显 ,为保护 解红耳龟的生态入侵机制提供生理学依据 物种多样性奠定理论基础 。著 ,其中亚硝酸盐使血液中的亚铁血红蛋白被氧化 成高铁血红蛋白 ,从而抑制血液的载氧能力和影响 1 材料与方法 自身免疫功能 ,严重时会导致个体缺氧而窒息死亡 111 实验材料及处理 ( H ilm y, 1987;周显青等 , 2003; 黄翔鹄等 , 2006; 洪美 ) 玲 , 2007 。研究证实亚硝酸盐胁迫将破坏机体内活 实验所用 个 体 均 购 自 海 口 市 东 山 镇 龟 鳖 养 殖 (性氧代谢帄衡而产生过多活性氧和氧自由基 , 机体 场 ,饲养 15 天后 ,挑选健康活泼的红耳龟 帄均体重 () 处于应激状态下后加剧脂质过氧化而产生大量丙二 13189 g ?1167 g, n = 224 和中华条颈龟 帄均体重 ) 13112 g ?1183 g, n = 236 均 分 为 4 个 大 组 [以 N () 醛 MDA ,从而对机体造成活性氧损伤 , 而超氧化 ) ) ( ( aNO调制 为 100 m g /L C、200 m g /L C、500 m 2 1 2 ( )物歧化酶 SOD 可清除活性氧自由基使机体免受活 ( ) ( )g /L C3个梯度 ,对照组 C加入等体积的自来 3 0 () 性氧伤害 洪美玲 , 2007 。在评价机体免疫能力的 水 ] ,瓦片为隐蔽场所 ,每池加静置自来水 20 L。每 众多指标中 ,抗氧化酶在机体行使免疫功能时发挥 日 0点各投喂定量的 配合 饲 料 , 8 h 后 取出 剩余 饲 料 ,隔天换水 ,换水量 100 % ,光照为室内自然光照 。 着相当大的作用 ,可用作评价机体免疫状况的好坏 , 每日采用重氮 2偶氮比色法测量水中亚硝酸盐的含 ( 现已成为评价生物体健康状况的重要指标 F ridov2 量 1 ,2 次 ,并及时向水中加入 N aNO以达到所需 2 ) ich, 1995; Ped ra ja s et a l1, 1996 。因此 ,本研究选择 浓度 ;每次换水后立即测量亚硝酸盐浓度并及时调 SOD 和 MDA 作为机体氧化损伤的评价指标 。本文 () 整浓度 表 1 。在此条件下持续实验处理 60 d。 旨在对比红耳龟和中华条颈龟对慢性亚硝酸盐暴露 的耐受性 ,探究其对龟类的毒性机理 ,其结果可为了 表 1 各实验组水溶液中所测得亚硝酸盐浓度 Ta b le 1 Am b ien t n itr ite con cen tra t ion in the exper im en ta l group s ( x ?s) 亚硝酸盐浓度 Am b ien t n itrite concen tra tion 种龟 Sp ec ie s CCCC 0123 红耳龟 T1s1elegans 0187 ?5172 144 ?12137 123 ?20140 150 ?45196 106200493 中华条颈龟 M 1sinensis 2137 ?8129 116172 ?56108 180123 ?25129 481187 ?20162 实验处理第 20 d、40 d、60 d从两物种的 4 个大 B radfo rd 组织匀 浆 液 中 蛋 白 浓 度 的 测 定 参 照 ( )()组中各随机取 15只个体 ,取样前 48 h 不投喂食物 。 1976 方法 ,以牛血清蛋白 B SA 为标准蛋白 ;组织 采用 - 20 ?低温冷冻麻醉 8 ,10 m in 后 ,称取个体 匀浆液中亚硝酸盐含量的测定方法采用重氮 2偶氮 () () 比色法测量 洪美玲 , 2007 。 体重 ;冰上解剖取出肝脏 、肠 除去肠中内容物 ,将 肠与肝脏分别放入 115 mL 离心管中并标记贮存于 113 数据处理 - 20 ?冰箱中 。数据用 Exce l 2003和 SPSS 1610 软件进行处理 , 所有实验数据均以 x ?s表示 。采用单因素方差分析112 指标测定 (肠和肝脏匀浆液制备 : 取适量肠和肝脏 约 () 011 O ne2way ANOVA ,同一采样时间点不同亚硝酸盐 ) g,分别加入 1 mL 蒸馏水 ,冰浴匀浆 ,冷冻离心15 浓度处理组与对照组之间的比较采用 L SD 法进行 ; () m in 控温 4 ?、转速 4000 rpm ,取上清液备用 。同一采样时间点相同处理的两物种间用 t检验 , 差 ( ) SOD 活性测定 采用 丁秀 云 等 1996 的 连 苯三 异显著临界值为 0105。 酚自氧化法 ,酶活单位定义 :每毫克蛋白每分钟抑制 2 结果与分析 连苯三酚自氧化速率达 50 %的酶量定义为 1 个酶活 - 1 - 1 () 211 慢性亚硝酸盐暴露对红耳龟与中华条颈龟肠 单位 Um g1p ro t。 ( ) MDA 含 量 的 测 定 采 用 硫 代 巴 比 妥 TBA 法和肝中亚硝酸盐含量的影响 () B uege & A u st, 1978 , 结 果 计 算 : 丙 二 醛 的 浓 度不同暴露组在各取样时间点亚硝酸盐含量变化 ( ) ( ) nmo l /m g?p ro t= f / F ×10 / [ P r ]。其 中 : f和 F 分见表 2 ,当亚硝酸盐浓度为 500 m g /L 时 ,实验个体肝 ( ) 别为由样液和标准应用液测得的光密度 ; [ P r ]为 组肠中亚硝酸盐含量显著高于对照组 P < 0105 , 且 织匀浆液中蛋白浓度 。 暴露浓度越高肝肠中亚硝酸盐含量越高 。 随暴露时间的延长 ,各暴露组肠中亚硝酸盐含 ,中华条颈龟各暴露组肝中含量均先减后增 ,且胁 减 量均先增后减 ,红耳龟各暴露组均低于中华条颈龟 ,迫 20 d、40 d时红耳龟肝中含量高于中华条颈龟 ,但 ( 60 d时却明显低于中华条颈龟 。且胁迫 20 d时二者肠中亚硝酸含量差异极显著 P ) < 0101 ; 红耳龟各暴露组肝中亚硝酸盐含量均递 表 2 不同浓度亚硝酸盐胁迫下中华条颈龟和红耳龟肝 、肠中亚硝酸盐含量变化 ( m g /Lpr?o t) Ta b le 2 N itr ite leve l in M 1 s in en s is an d T1 s1e lega n s l iver an d in te st in e un der d ifferen t am b ien t n itr ite con cen tra t ion 亚硝酸盐含量 N itrite leve l 亚硝酸盐浓度 中华条颈龟 M 1sinensis 红耳龟 T1 s1elegans Am b ien t n itrite 胁迫 20 d 胁迫 40 d 胁迫 60 d 胁迫 20 d 胁迫 40 d 胁迫 60 d concen tra tion 20 d2stre ss 40 d2stre ss 60 d2stre ss 20 d2stre ss 40 d2stre ss 60 d2stre ss bbbC 1181 ?1139 176 ?1145 1135 ?0188 2 32152 ?21411168 ?1126196 ?01991ababab1169 ?1157 2180 ?1135 1129 ?0165 1176 ?11071140 ?11091155 ?1115C 2肝 abaa1111 ?0189 2158 ?1139 1116 ?0168 1165 ?1119 0196 ?0168 1125 ?0167 L ive r C 1aaa31100 ?0176 2107 ?0176 1111 ?0126 0175 ?0180 1119 ?0143 1111 ?0186 C 0b3bbbbC 0130 ?0109 0161 ?01403171 ?01480121 ?01180169 ?01510140 ?01310aaaabb30129 ?0163 0147 ?01240115 ?01170128 ?01150126 ?01430160 ?0138 C 2肠 aaaaba3 30118 ?0112 0133 ?0120 0107 ?0106 0125 ?0112 0125 ?0120 0135 ?0112 In te stine C 1aaaaa3 30111 ?0108 0130 ?0118 0102 ?0109 0125 ?0112 0116 ?0111 0132 ?0115 C0 注 :同一指标中同列的不同字母表示差异显著 V a lue s w ith d iffe ren t upp e r le tters in the sam e co lum n of the sam e ind ica to r m ean sign ifican t d iffe r2 ( ( ) ) ence;“3 ”表示两物种在相同胁迫时间下同一指标差异显著 P < 0105 ,“3 3 ”表示两物种间差异极显著 P < 0101 A ste risk m ean sign ifican t( ) ( )d iffe rence be tween two sp ecie s a t the sam e expo su re tim e P < 0105 , two a ste risk s m ean extrem e ly sign ifican t d ifference P < 0101 表 3 不同浓度亚硝酸盐胁迫下中华条颈龟和红耳龟肝 、肠中 SOD 活性 ( U /m g?pro t) 和 M D A 含量 ( nm o l /m g?pro t)变化 Ta b le 3 SOD a ct iv ity an d M D A level in M 1 s in en s is an d T1 s1 e lega n s l iver an d in test in e un der d ifferen t am b ien t n itr ite con cen tra t ion 超氧化物歧化酶活性 SOD ac tivity 亚硝酸盐浓度 中华条颈龟 M 1 sinensis 红耳龟 T1 s1 elegans Am b ien t n itrite 胁迫 20 d 胁迫 40 d 胁迫 60 d 胁迫 20 d 胁迫 40 d 胁迫 60 d concen tra tion 20 d2stre ss 40 d2stre ss 60 d2stre ss 20 d2stress 40 d2stre ss 60 d2stre ss 3 3bbbC 10190 ?4182 146 ?3125 4 34175 ?41564100 ?61543184 ?31525105 ?5171ababab11125 ?10189 6191 ?5151 7195 ?6107 6149 ?4100 7176 ?6172 C 8129 ?61192肝 ababab9152 ?2161 7191 ?4192 8134 ?5184 7152 ?5120 8136 ?5132 8189 ?8175 L ive r C 1aaa14140 ?6109 8111 ?4118 3 39173 ?7164 8168 ?4178 10189 ?5151 6156 ?2178 C 0bbC 2188 ?2108 151 ?2161 191 ?7108 143 ?7120 32032133 ?11330127 ?0185b3331148 ?3110 172 ?2146 121 ?7164 169 ?5166 2139 ?0173 C 1131 ?2172 2b肠 ba4120 ?2135 4163 ?3166 3149 ?5116 2143 ?3103 2154 ?1108 2106 ?3159 In te stine C 1a4136 ?3131 4169 ?4187 4185 ?5145 4127 ?5158 a4143 ?3160 4110 ?3135 C 0 丙二醛含量 MDA leve l 亚硝酸盐浓度 中华条颈龟 M 1 sinensis 红耳龟 T1 s1 elegans Am b ien t n itrite 胁迫 20 d 胁迫 40 d 胁迫 60 d 胁迫 20 d 胁迫 40 d 胁迫 60 d concen tra tion 20 d2stre ss 40 d2stre ss 60 d2stre ss 20 d2stre ss 40 d2stre ss 60 d2stre ss 3 3b3 3bbC 1138 ?0151 121 ?0153 1 32160 ?01823196 ?11343113 ?11852129 ?1138abb3 3ab3 31135 ?0164 1118 ?0174 3105 ?4108 2126 ?1115 2157 ?1114 3129 ?0162 C 2肝 abab3 3a3 31128 ?0150 0196 ?0133 2136 ?1185 1172 ?0171 2130 ?0197 3110 ?0173 L ive r C 1aa1125 ?0141 0192 ?0147 3 3a3 32125 ?1123 1154 ?0150 2116 ?0168 2181 ?0156 C 03 333bC 2104 ?0194 115 ?0163 2 3148 ?11563188 ?2160147 ?310453152 ?11473b3 331199 ?0132 2109 ?0152 3150 ?1112 3114 ?1127 5136 ?2179 C 3131 ?21602肠 b3 331198 ?0136 2105 ?0145 3114 ?0165 3125 ?3122 3113 ?0197 5136 ?3118 In te stine C 1a1197 ?0140 1198 ?0162 3 333123 ?3174 2161 ?0151 3105 ?0141 5127 ?3181 C 0 同表 2 20 d 后 ,中华条颈 均随暴露浓度增加而减弱 。胁迫 212 慢性亚硝酸盐暴露对红耳龟与中华条颈龟肠 ( 和肝中 SOD 活性和 M D A 含量的影响龟肝 中 500 m g /L 暴 露 组 显 著 低 于 对 照 组 P < ) 0105 ,肠中 200 m g /L、500 m g /L 暴露组均显著低于由表 3 可知 ,同一取样时间点肝肠中 SOD 活性 ( ) 对照组 P < 0105 ; 而 红 耳 龟 仅 胁 迫 60 d 时 肝 中 SOD 活性在前期递减 , MDA 含量在 红耳龟肝中 ( ) 500 m g /L 暴露组显著低于对照组 P < 0105 。随暴 前期递增 ,而在实验后期 SOD 活性递增 , MDA 含量 露时间的延长 ,中华条颈龟各暴露组肝肠中 SOD 活 递减 ,这可能是红耳龟在一定时间内适应了亚硝酸 性均呈递减 ;红耳龟各暴露组肠中 SOD 活性也呈递 盐胁迫后机体抗氧化系统得以恢复所致 ,这与 W ill2 减 ,但均高于中华条颈龟 。红耳龟肝中 SOD 活性先 ( )mo re等 1997 对红耳龟的研究结果一致 ,由此可说 减后增 ,且胁迫 20 d时各组 SOD 活性均高于中华条 明红耳龟具有较强的适应力 。这一结果也表明红耳 ( 500 m g /L 暴 露 组 差 异 极 显 著 P < , 其 中 颈龟 龟在暴露 40 d后其清除活性氧的能力得到提高 ,而 ) () 0101 ;胁迫40 d 时各组 除 500 m g /L 外 SOD 活中华条颈龟清除活性氧的能力却随暴露时间推移继 性均低于中华条颈龟 ,而到胁迫 60 d时各组 SOD 活 续降低 ,两相比较即表明了红耳龟较中华条颈龟具 性又均高于中华条颈龟 。有更强的解毒能力和适应力 。 由表 3还可知 ,各暴露组 MDA 含量均随暴露浓 有欧洲学 者 对 红 耳 龟 与 当 地 土 著 种 欧 洲 池 龟 Em ys orbicu la ris和地中海石龟 M au rem ys leprosa 进行 度增加而 增 加 。胁 迫 20 d 以 后 , 中 华 条 颈 龟 肝 中 对比实验 ,发现红耳龟相对于土著种表现出更强的 ( 500 m g /L 暴露组 MDA 含 量 显 著 高 于 对 照 组 P <( 竞 争 力 P leguezue lo s, 2002; Cad i & Jo ly, 2003 , ) 0105 。而红耳龟胁迫 40 d时 ,当暴露浓度高于 200 ) ( ) 2004 。 Po lo2Cavia等 2009 的 研 究 表 明 地 中 海 石 ( m g /L 时 , 肝 中 MDA 含 量 显 著 高 于 对 照 组 P < 龟因害怕红耳龟而有意躲避 ,从而避免因竞争上的 劣势被红耳龟攻击 。本研究中红耳龟肝中亚硝酸盐 ) 0105 ;胁迫 60 d时 ,肠中各暴露组均显著高于对照 含量高于中华条颈龟 ,但红耳龟肝肠中 SOD 活性高 ( ) 组 P < 0105 。随暴露时间的延长 , 中华条颈龟各 于中华条颈龟 , MDA 含量仍显著低于中华条颈龟 , 暴露组肝肠中 MDA 的含量均不断累积 。红耳龟各均表明亚硝酸盐胁迫对红耳龟机体的破坏较中华条 暴露组肠中含量亦不断累积 ;肝中含量却先增后减 , 颈龟要弱 ,说明红耳龟的生存竞争力和耐受力均强 当胁迫 60 d时 ,肝中各组含量为同一暴露组内各取 于土著种中华条颈龟 。究其原因可能是在亚硝酸盐 胁迫下 ,机体的活性氧代谢帄衡被破坏 ,导致体内处 样时间点 的最 小值 。同时 红 耳龟 肝 肠 中 各 暴 露 组 () 于缺氧甚至无氧状态 周显青等 , 2003 ,但红耳龟在 MDA 含量均低于中华条颈龟 ,且胁迫 20 d时肝肠和 体内处于缺氧甚至无氧状态时可通过降低代谢率等 ( ) 60 d 时肝中各组含量均呈极显著差异 P < 0101 ,自身固有代谢途径来调节并保证自身所需能量 ,从 胁迫 60 d时肠中各组和 40 d时肠中 500 m g /L 暴露 () 而维持机体正常运行 M cDonagh et a l1, 2004 ,因此 ( ) 组含量差异显著 P < 0101 , 其余各对应组间差异 红耳龟表现出较强的抗氧化力和耐受力 ,这从生理 学角度说明了红耳龟具有更强的耐受力和适应力 。 均不显著 。 综上所述 ,红耳龟肝肠中 SOD 活性始终高于中 华条3 讨论 颈龟 , MDA 含量始终低于中华条颈龟 , 且暴露 40 d后红耳龟肝中 SOD 活性增强 , MDA 含量减少 , 研究证实淡水龟类体内各组织中抗氧化酶的活 而中华条颈龟 SOD 活性依旧降低 , MDA 含量继续增 () 性相比其他变温动物 尤其是虾蟹等水生生物 表 加 ,说明红耳龟确实具有更强的适应力和耐受力 。 现得更强 ,这保证了龟类可以阻止或缓解因胁迫而 (迅速产 生 的 大 量 活 性 氧 对 机 体 造 成 的 危 害 W ill2 ) mo re et a l1, 1997 ,同时龟类对于因无氧呼吸生成的 乳酸而引起的中毒将采取两种途径调节 : 一是通过 背甲甲壳释放的钙和镁碳酸盐加以缓冲 ,二是将产 ( 生的 大 部 分 乳 酸 储 存 在 背 甲 甲 壳 中 Jack son, ) 2004 ,由此保证了龟类更强的耐受力 。在本研究中 4 参考文献 红耳龟和中华条颈龟所设置的亚硝酸盐浓度相对于 丁秀云 , 李光友 , 翟玉梅 , 等. 1996. 皱纹盘鲍经诱导后血淋巴中一 ( ) 韩英 等 2007 对 鲤 鱼 C yprinus ca rpio 和 洪 美 玲 ( ) 些因子变化的研究 [ J ]. 海洋与湖沼 , 27 4 : 362 ,367. ( )2007 对中华绒螯 蟹 E rioeheir sinensis 实验 时 要高 龚世帄 , 符有利 , 汪继超 , 等. 2005. 海南淡水龟类贸易现状与管理 约 50多倍 ,但其在胁迫条件下与鲤鱼和中华绒螯蟹 ( ) 建议 [ J ]. 生物多样性 , 13 3 : 239 ,247. 相比 , SOD 的活性相对较高和 MDA 的含量偏低 ,即 韩英 , 张辉 , 王琨. 2007. 亚硝态氮对鲤鱼种血液 SOD 及 GSH 2Px的 ( ) 影响 [ J ]. 淡水渔业 , 37 1 : 66 ,68. 表现出较强的清除活性氧的能力 。 洪美玲. 2007. 水中亚硝酸盐和氨氮对中华绒螯蟹帅体的毒性效应 及维生素 E的营养调节 [ D ]. 华东师范大学博士论文 : 26 ,99. 黄翔鹄 , 李长玲 , 郑莲 , 等. 2006. 亚硝酸盐氮对凡纳滨对虾毒性和 lac ta te fo rm ation in the anoxic tu rtle [ J ]. R e sp ir Physio l N eu rob io l, ( ) ( ) 抗病相关因子影响 [ J ]. 水生生物学报 , 30 4 : 466 ,471. 23 : 173 ,178. 144 2 史海涛 , 龚世帄 , 梁伟 , 等. 2009. 控制外来物种红耳龟在中国野生 M cDonagh JC, Ca lliste r RJ , Favron ML , et a l. 2004. R esistance to d is2 ( ) 环境蔓延的态势 [ J ]. 生物学通报 , 44 4 : 1 ,3. u se a trop hy in a tu rtle h ind lim b m u sc le [ J ]. J Comp Physio l A , 190: 徐婧 , 周婷 , 叶存奇 , 等. 2006. 龟类外来种的入侵隐患及其防治措 321 ,329. ( ) 施 [ J ]. 四川动物 , 25 2 : 420 ,422. Mo ll EO. 1995. The tu rtle T rachem ys scripta and the p e t trade [ J ]. 周显青 , 牛翠娟 , ,儒泳. 2003. 维生素 C和酸应激对中华鳖帅鳖血 A lien s, 2: 3. ( ) 清补体 C3 和 C4 含量的影响 [ J ]. 动物学报 , 49 6 : 769 ,774. N ewbe rry R. 1984. The Am erican red2ea red te rrap in in Sou th A frica [ J ]. B rafo rd MM. 1976. A rap id and sen sitive m ethod fo r the quan titation of A frican W ild life, 38: 186 ,189. m icrogram quan titie s of p ro te in u sing the p rinc ip le of p ro te in2dye b ind2 Ped raja s JR , Peinado J , Lop ez2B a rea J. 1996. O xida tive stre ss in fish ex2 ing[ J ]. A na l B io lchem , 2: 248 ,254. po sed to mode l xenob io tic s. O xida tive ly mod ified fo rm s of Cu, Zn2su2 p eroxide d ism u tase as po ten tia l b iom arkers [ J ]. Chem B io l In te rac t, M e thod s B uege JA , A u st SD. 1978. M icro som a l lip id p e roxida tion [ J ]. 98: 267 ,282.Enzymo l, 52: 302 ,310. Perez2San tigo sa N , D iaz2Pan iagua C, H ida lgo2V ila J. 2008. The rep ro2 Cad i A , Jo ly P. 2003. Comp e tition fo r ba sk ing p lace s between the endan2 duc tive eco logy of exo tic T rachem ys scripta elegans in an invaded area of ) ( ge red Eu rop ean pond tu rtle Em ys orbicu la ris ga lloita lica and the in2 sou the rn Eu rop e [ J ]. A qua tic Con serv: M a r F re shw Eco syst, 18: 1302 ) ( troduced red2ea red slide r T rachem ys scripta elegans[ J ]. Can J Zoo l, ,1310. 81: 1392 ,1398. P leguezuelo s JM. 2002. L a s e sp ec ie s in troduc ida s de A nfib io sy R ep tile s Cad i A , Jo ly P. 2004. Imp ac t of the in troduc tion of the red2eared slide r ( ) [ A ]. In: P leguezue lo s JM , M arquez R , L izana M ed s. A tla sy L i2 ( ) T rachem ys scripta eleganson su rvival ra te s of the Eu rop ean pond tu r2 b ro Ro jo de lo s A nfib io sy R ep tile s de E sp ana [ M ]. M ad rid: AH E2 ) ( tle Em ys orbicu la ris[ J ]. B iod iv Con se rv, 13: 2511 ,2518. MMA: 501 ,532. Chen TH. 2006. D istribu tion and sta tu s of the in troduced red2ea red slide r Po lo2Cavia N , Lop ez P, M a rtin J. 2009. In te rsp ec ic d iffe rence s in chem 2 ( ) T rachem ys scripta elegansin Ta iwan [ A ]. In: Ko ike F, C lou t MN , o sen so ry re spon se s of freshwa te r tu rtles: con sequences fo r comp e tition Kawam ich i M , et a l. A sse ssm en t and con tro l of b io logica l invasion risk between na tive and inva sive sp ec ie s [ J ]. B io l Inva sion s, 11: 431 , [ M ]. Pub lished by Shoukadoh book Se lle rs, Jap an & the W o rld on se r2 440. ( ) va tion U n ion IUCN , Sw itze rland: 187 ,195. Silva D E, B la sco M. 1995. T rachem ys scripta elegans in sou thwe ste rn F ridovich . I 1995. Sup eroxide rad ica l and sup e roxide d ism u ta se s [ J ]. Sp a in [ J ]. H e rp e to logical R eview, 26: 133 ,134. A nnu R ev B iochem Eng, 64: 97 ,112. W illmo re W G, Sto rey KB. 1997. A n tioxidan t system s and anoxia to le r2 H ilm y AM. 1987. A cu te and ch ro ric toxic ity of n itrite to C la rias la jera ance in a fre shwa ter tu rtle T rachem ys scripta elegans[ J ]. Mo lecu la r and ( ) [ J ]. Comp B iochem Phu sio, 86 2 : 247 ,254. Ce llu la r B iochem istry, 170: 177 ,185. Jack son DC. 2004. Su rviving extrem e lac tic acido sis: the ro le of ca lc ium