辣根过氧化物酶

null辣根过氧化物酶催化机理及应用辣根过氧化物酶催化机理及应用目录目录辣根过氧化物酶的来源 辣根过氧化物酶（HRP)简介 其同工酶——HRP C 辣根过氧化物酶的催化机制 辣根过氧化物酶的应用 一、辣根过氧化酶的来源一、辣根过氧化酶的来源辣根是十字花科多年生草本植物，它的根有辛辣味，可用作调味品或烹饪食用，根同时还含有一种含量丰富的过氧化物酶——辣根过氧化物酶。二、辣根过氧化酶(HRP)二、辣根过氧化酶(HRP)1、HRP广泛分布于植物界，它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟林结合而成的糖蛋白，在过氧 化氢存在时能催化苯酚、苯胺及其取代物聚合。 2、HRP的同工酶种类极多。 3、虽然它们都是以铁卟林为辅机的血红素蛋白，但是彼此间在分子量、含糖量和等电点等方面却不太相同。 同工酶同工酶1、同工酶：指能催化相同化学反应，但酶本身的分子结构组成、理化性质、免疫功能和调控特性等方面有所不同的一组酶。 2、同工酶不仅存在于同一个体的不同组织中，也存在于同一组织、同一细胞的不同亚细胞结构中，甚至存在于不同发育期的组织中。三、辣根过氧化物酶同工酶C三、辣根过氧化物酶同工酶C 其中以中性辣根过氧化物酶同工酶C的含量颇为丰富，也是应用最广泛的一种 。 HRP C单肽链是由308个氨基酸构成的，肽链上存有二硫键（4个由两分子Cys组成的），还含有一个盐桥（是Arg123和Asp99构成）。 HRP C二级结构HRP C二级结构 HRP C 含有两个不同的金属中心:血红素和两个钙原子。 血红素中铁原子的一个轴向结合点与肽链上His170侧链的N原子结合, 使血红素垂直连接在His170上。HRP C三级结构HRP C三级结构 酶的结构总体上看来大部分是α-螺旋,但其中也包含一些小的β-折叠。 网状为血红素; 球型为钙原子; 螺旋型为α 螺旋; 尖头所指为β折叠。　四、辣根过氧化物酶的作用机理　四、辣根过氧化物酶的作用机理辣根过氧化物酶的作用机理可分以下几步： 第一步，形成有活性的酶一底物复合物Ⅰ： HRP + H2O2 → 复合物Ⅰ 第二步，复合物Ⅰ转变成有活性的复合物Ⅱ： 复合物Ⅰ+AH →复合物Ⅱ+A(AH：示还原型氢供体） 第三步，复合物Ⅱ被还原，释放出酶： 复合物Ⅱ+AH HRP+A+2H2O 在一定程度上复合物Ⅱ可自发地分解成HRP和产物(P)，亦可与过量的过氧化氢形成无活性的复合物Ⅲ。 null五、辣根过氧化酶的应用五、辣根过氧化酶的应用神经生物学研究：作为工具酶使用，研究不同核团和神经元之间的相互联系。 环境生物修复的应用：HRP具有极强的催化苯酚及其衍生化合物的氧化的能力。 广泛用于临床化学和食品工业等领域。 用于废水处理、生物传感和酶联免疫吸附。 酶联免疫吸附分析（ELISA)酶联免疫吸附分析（ELISA) ELISA中酶标记抗体或抗原上的标记酶是整个免疫分析体系中催化底物，提供可检测信号的成分。HRP作为免疫标记酶的检测方法HRP作为免疫标记酶的检测方法化学发光法化学发光法参考文献参考文献[1]田婧.辣根过氧化物酶HRP-DL性质及其在环境检测中的应用[D].2012,6. [2]洪伟杰,张朝晖,芦国营.辣根过氧化物酶的结构与作用机制[J].生命的化学，2005,25（1）：33-36. [3]姜子涛.辣根过氧化物酶在食品分析中的应用[D].2007,4. [4]冯春梁,赵新,王汉,李言,韩玉花. 辣根过氧化物酶H2O2的响应[J]. 辽宁师范大学学报. 2011(04) [5]张四方,王春涛,张亚媛,安小花. 辣根过氧化物酶活性研究[J]. 太原师范学院学报. 2010(04) null 谢谢观赏！