反相高效液相色谱法测定甘之平口服液中左卡尼汀含量

反相高效液相色谱法测定甘之平口服液中左卡尼汀含量 反相高效液相色谱法测定甘之平口服液中 左卡尼汀含量 科技信息0高校讲台0SCIENCEINFORMATION ? 2006年第6期 反相高效液相色谱法测定甘之平口服液中左卡尼汀含量 陆瑞勇杨小玉 (广西花红药业有限责任公司广西柳州545007) 摘要:采用反相高效液相色谱法测定甘之平口服液中左卡尼汀的含量.色谱柱为LunaC18柱(150minx4.6ram,5),流动相为O.05mol/L磷 酸二氢钾(PH2.2,含l%.庚烷磺酸钠)一甲醇(100:2,v/v),紫外205nm检测.结果:在建立的色谱条件下,左卡尼汀与有关辅料能有效分离左卡 尼汀在2~20范围内与峰面积呈良好线性关系,相关系数为0.9999,平均回收率为98.94%.结论:本法精密度好,结果准确可靠c 关键词:反相高效液相色谱法;左卡尼汀;甘之平口服液 左卡尼汀(1ev~amitine)别名又称左旋肉碱,广泛存在于自然界 中.由于它的多种营养和生理功能,已被视为人体的必需营养物质,主 要用于营养保健,医疗和食品等领域.甘之平El服液由左卡尼汀和柠 檬酸,山梨酸钾等组成.本文采用反相高效液相色谱法对左卡尼汀进 行含量测定.直接用水稀释样品测定,操作简便,快速,能准确测定甘 之平口服液中左卡尼汀的含量. 1.仪器与试剂 岛津LC一10ATvp高效液相色谱仪,SPD一10Avp紫外检测器;威玛 龙色谱工作站. 甲醇(色谱纯);磷酸二氢钾(分析纯),庚烷磺酸钠(分析纯);柠檬 酸,山梨酸钾;水(自配重蒸馏水);左卡尼汀对照品(东药集团东北制 药总厂.批号:200502208,含量99,7%);甘之平口服液(广西花红药业 股份有限公司,批号:2o05O7O5,20050802,20050803). 2.实验方法与结果? 2.1色谱条件与系统适用性实验色谱柱:LunaCl8柱(50,m, 150mmx4.6mm):流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾(PH2,2,含l‰庚烷 磺酸钠)一甲醇(100:2);流速:lmL/min.;检测波长为205nm;柱温:室 温;进样量:20l.理论板数按左卡尼汀峰计算应不低于1500. 2.2溶液的制备供试品溶液的配制:精密吸取1.00mL样品溶 液.置50mL量瓶中.加水至刻度.摇匀.精密吸取上述溶液5.00mL,置 25mL量瓶中.加水至刻度,摇匀,即得. 对照品溶液的配制:取105?干燥恒重的原料药左卡尼汀适量,加 水配制成每l毫升含0.4mg左卡尼汀的溶液 空白样品溶液的配制:除左卡尼汀外,接处方比例配制甘之平口 服液空白样品(缺左卡尼汀).依供试品溶液配制空白样品溶液. 2.3空白试验取缺左卡尼汀的甘之平口服液空白样品溶液.精 密量取200,I注入液相色谱仪,色谱图见图i. 2.4线性试验对照品贮备液的制备:精密称取105?干燥恒重的 左卡尼汀对照品0.2508g,置50mL量瓶中.加水至刻度,摇匀,得浓度 为5.O16mg/mL的对照品贮备液. 对照品溶液的制备:分别精密吸取0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5+OmL对 照品贮备液.置25mL量瓶中,加水至刻度,摇匀.即得浓度为0.10, 0.2O,0.40,0.60,0.8O,1.00mg/mL一系列对照品溶液取上述对照品溶 液各200.1.注入液相色谱仪,得到浓度C(mg/mL)和峰面积A的线性 方程结果表明,左卡尼汀进样量为2-2Og范围内与峰面积呈良好线 性关系.回归方程为: C=2.98x10—6A一3,20x10—4,相关系数r=0,9999. 2,S精密度试验取同一样品供试品溶液,按上:述色谱条件连续 进样6次.测定.左卡尼汀含量结果相对偏差为0.54%. 2.6重现性试验取同一批号甘之平口服液(批号:20050802),按 正文内容供试品制法制备6份供试品溶液,进样200,1,测定,计算,样 品含量结果相对标准偏差为0.4|D%. 2.7稳定性试验取同一样品每隔2小时进样一次,进行12小时 考察,样品结果的相对标准偏差为0.30%(n=6). 2.8回收率试验精称称定105?干燥恒重左卡尼汀对照品 2.4994g.置50mL量瓶中,得49.99mg/mL对照品溶液. 精密吸取0.50mL样品溶液与上述对照品溶液1+00mL,置于同一 50mL萤瓶中,加水至刻度,摇匀,精密吸取5+00mL.置25mi量瓶中, 加水至刻度摇匀,即得平行操作六份.按正文测定方法,进样,测定. 左卡尼汀的平均回收率为98.94%. 2.9样品含量测定取3批样品,按正文内容处理,进样测定,以 外标法计算含量,结果分别为109,99,109.66,109.70mg/mL 3.讨论 左卡尼汀易溶于水,因此样品直接采用水稀释.使操作简便快速. 根据文献It],我们自行进行紫外光谱扫描.紫外最大吸收为 205nm.与文献有一定差异,我们根据实验所得定检测波长为 205nm. 在流动相的筛选时,我们参考文献筛选.选用甲醇一0.05moL/L磷 酸二氢钾溶液(35:65,用8O%磷酸调节PH为2.4).左卡尼汀在不同品 牌的C18柱中,由于键合程度不同,分离情况存在较大的差别.有些二 十分钟不出峰,且峰形严重拖尾,与文献报道一致.另一流动相通过加 入一定比例的离子对(庚烷磺酸钠),使流动相为0,05moI/L磷酸二氢 钾(PH2,2,含1%o庚烷磺酸钠)一甲醇(100:2)时,在该色谱条件下,左 卡尼汀则有比较理想的保留行为,重现性较好. 按文中流动相分析对照品,供试品及缺左卡尼汀的空白样品.左 卡尼汀与其它杂质峰达到基线分离,空白样品(缺左卡尼汀)在吸收峰 处基本没有吸收,结果表明,此方法其它成分干扰少.具有专属性,稳 定性高,重现性好,操作简便,可作为控制奉品质量的手段之一. 参考文献 [1]ChinaPharmacist2001.Vol+4No.1:26. [2]PROGRESSINPHARMACEUTICALSCIENCES2004Vo1.28No.3 l31. 作者简介:陆瑞勇.杨小玉执业职务:陆瑞勇——中国执业药师, 中国质量工程师(中级),杨小玉——工程师,单位:广西花红药业股份 有限司. 135