HPLC法测定苦瓜清脂素胶囊中盐酸西布曲明

HPLC法测定苦瓜清脂素胶囊中盐酸西布曲明 HPLC法测定苦瓜清脂素胶囊中盐酸西布曲 明 【摘要】 建立高效液相色谱法测定盐酸西布曲明的含量。 色谱柱为Venusil MP C18, 流动相为含0 1%甲酸的20 mmol/L醋酸铵 甲醇(35? 65)。检测波长为224 nm,流速 为1 0 ml/min。盐酸西布曲明在0 0225,0 225 mg/ml 范围内与峰面积线性关系良好(r=0 9998),平均回收率为 98 87%,RSD为0 65%(n=6)。本方法简便、准确、灵 敏、重现性好,可作为盐酸西布曲明的含量测定方法。 【关键词】 高效液相色谱法,苦瓜清脂素胶囊,盐酸西 布曲明 Determination of Sibutramine in Kuguaqingzhisu capsule by HPLC JIANG Jia xin,ZI Yang.Department of Bidogical Resource,Lushan Branch Institate of Guangxi Technical College,Liuzhou 545616,China 【Abstract】 To establish a method for the determination of Sibutramine in kuguaqingzhisu capsule by HPLC HPLC was used Venusil MP C18 column, mobile phase was methanol 20 mmol/L ammonium acetate 1 (0 1%formic acid) (35:65),The flow rate was 1 0 ml/min with detection wavelength at 224nm The linear range of sibutramine was from 0 0225,0 225 mg/ml (r=0 9998) The average recoverery was 98 87% and RSD was 0 65%(n=6) The method is simple,accurate and suitable It can be used for the determination of Sibutramine in kuguaqingzhisu capsule. 【Key words】 HPLC;Kuguaqingzhisu capsule; Sibutramine ----------------------------------------------------------------------------- --- 作者单位,545616 柳州,广西工学院鹿山学院生物资源 系(姜嘉鑫); 河北省食品药品检验院(訾阳) 通讯作者,訾阳 E mail: zxr3487@126 com 盐酸西 布曲明(Sibutramine)为非苯丙胺类食欲抑制药, 是作用于中 枢神经系统的减肥药物,近年来有盐酸西布曲明多例的死亡 ,1,。一些不法分子在减肥类保健食品中非法添加盐酸 西布曲明, 严重危害消费者健康。为有效地打击这种制假掺 伪的不法行为,参照有关文献,2,3,,采用高效液相色谱法, 对市售的减肥保健品进行了检验。本文选择在流动相中加入 0 1%甲酸, 改善了分离效果, 使样品中盐酸西布曲明和其 2 他成分得到了很好的分离,建立了HPLC法测定苦瓜清脂素胶囊中盐酸西布曲明的分析方法, 结果令人满意。 1 仪器与试药 1 1 仪器 LC 20AD液相色谱仪(日本岛津公司),CP225 d分析天平(德国赛多利斯公司),KQ 250 dB型数控超声波清洗器(江苏昆山超声仪器有限公司)。 1 2 试药 盐酸西布曲明对照品(批号,100624 200401,中国食品药品生物制品检定院),苦瓜清脂素胶囊(A企业,批号,100106、100804和110203),甲醇为色谱纯,其余试剂为分析纯。 2 方法与结果 2 1 溶液的制备 ?对照品溶液 精密称取盐酸西布曲明对照品11 25 mg,置50 ml量瓶中,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液。?供试品溶液 取本品胶囊10粒,精密称定重量,倾出内容物,混匀,精密称取内容物0 12 g,置25 ml量瓶中,加甲醇适量,超声15 min使溶解,放冷至室温,加甲醇稀释至刻度,摇匀,经0 45 μm滤膜滤过,即得供试品溶液。 2 2 色谱条件 色谱柱,venusil MP C18(4 6 mm×100 mm,3 μm);流动相,20 mmol/L醋酸铵(含0 1%甲酸) 甲醇(35? 65),检测波长,224nm,流速,1 0 ml/min,进样量,10 μL,柱温,室温,色谱图见图1。 3 图1 高效液相色谱图 A 盐酸西布曲明对照品 B 供试品 2 3 线性关系考察 精密量取对照品储备液1、2、4、6、8、10 ml,分别置10 ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,分别精密量取10 μL进样,以峰面积Y对含量X(mg/ml)作线性回归。得回归方程为,Y=19907500X+12929 25 r=0 9998结果明,盐酸西布曲明在 0 0225,0 225 mg/ml范围内浓度与峰面积线性关系良好。 2 4 精密度试验 精密量取盐酸西布曲明浓度为0 09 mg/ml的对照品溶液,连续测定6次,以峰面积计算RSD为0 1%。 2 5 重复性试验 称取苦瓜清脂素胶囊(批号,100106)6份,同2 1 2进行测定,计算含量,RSD为1 4%(n=6)。 2 6 稳定性试验 精密量取同一供试品溶液,分别于0、2、4、6、8 h测定以峰面积计算RSD为0 52%(n=5),结果表明,供试品溶液室温8 h内稳定。 2 7 加样回收试验 精密称取已知含量的样品(批号,100106)6份,分置25 ml量瓶,分别精密加入0 229 mg/ml 的盐酸西布曲明对照品溶液4、5和6 ml,加甲醇适量,同2 1 2进行测定,平均回收率为98 87%,RSD为0 65%。 4 2 8 样品含量测定 取本品苦瓜清脂素胶囊(批号,100106、110203、100804)10粒,倾出内容物,混匀,精密称取0 12 g,置25 ml量瓶中,加甲醇适量,同2 1 2操作进行测定,三批的含量分别为20 34、18 06和0 mg/g。 3 讨论 3 1 检测波长的选择 取对照品溶液经二极管陈列检测器在190,300 nm波长范围内扫描,在224 nm波长处有最大吸收,故将224 nm作为检测波长。 3 2 流动相的选择 以20 mmol/L醋酸铵 甲醇为流动相,用甲酸调节pH值2 5,6 0,经试验,当流动相pH值为4 5(含0 1%甲酸)时盐酸西布曲明色谱峰形对称,与其他成分的分离度符合规定,故流动相确定为20 mmol/L醋酸铵(含0 1%甲酸) 甲醇(35? 65)。 参 考 文 献 ,1, 魏艳红 关于盐酸西布曲明审查的早期报告.药品评价杂志, 2010, 7(2):29. ,2, 张小松,夏铮铮,周琳,等 检测中药保健品中非法掺入的盐酸西布曲明.华西药学杂志, 2005,20(4):293 2951. ,3, 郑萍,朱兰,罗霞,等 RP HPLC测定盐酸西布曲明中的有关物质.华西药学杂志,2005,20(2):80 82. 5