银翘解毒丸

银翘解毒丸 银翘解毒丸的制备及质量检查实验 一、实验目的 1. 自主查阅文献，实验。 2. 掌握中药原料药的提取、丸剂的制备及检验方法，含量测定等方法。 二、实验材料 1. 处方:金银花50g，连翘50g，薄荷30g，荆芥20g，淡豆鼓25g，牛蒡子(炒)30g，桔梗30g，淡竹叶20g，甘草25g 。 2. 试剂:蒸馏水，炼蜜25g，硅藻土3g，石油醚50mL，乙醇50mL，荆芥对照药材0.8g，薄荷脑对照品，羧甲基纤维素钠，正己烷-乙酸乙酯(17:3)，茴香醛，连翘对照药材2g，醋酐-硫酸(20:1)，牛蒡子对照药材1.2g，甘草对照药材1g，三氯甲烷-甲醇-水(40:10:1)，10%硫酸乙醇溶液。 3. 仪器:加热套，2L圆底烧瓶，挥发油测定器，回流冷凝管，1L烧杯，纱布，小型粉碎机，80~100目筛，喷湿器，显微镜，干燥箱，薄层板，层析缸。 三、实验步骤 1. 银翘解毒丸的提取 薄荷、荆芥提取挥发油:将30g薄荷和20g荆芥置于500ml圆底烧瓶中，加水200ml，数粒沸石，连接挥发油测定器及回流冷凝管，保持微沸5h。收集挥发油，用另一个玻璃仪器收集。药渣与连翘，淡豆鼓，牛蒡子，淡竹叶，甘草五味加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，过滤;滤液与上述水溶液合并，浓缩成稠膏。 2. 银翘解毒丸的制剂 将金银花、桔梗粉碎成细粉，加入到上述稠膏中，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，喷加薄荷、荆芥挥发油，混匀。每100g粉末加炼蜜80,90g制成浓缩丸，既得。 3. 银翘解毒丸的质量检查 (1)鉴别 ? 取本品6g，切碎，加硅藻土1.5g，研细，加石油醚(60~90?)20ml，密塞，时时振摇，浸渍，过滤，滤液挥散至约1ml，作为供试品溶液。另取荆芥对照药材0.8g，加石油醚(60~90?)20ml，同法制成对照药材溶液，再取薄荷脑对照品，加乙醇制成1ml含2ml的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法(药典附录?B)试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(17:3)为展开剂，展开，晾干，喷以茴香醛液，在105?加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱及 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 ? 取本品6g，切碎，加硅藻土1.5g，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取连翘对照药材2g，加水40ml，置水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(药典附录?B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(20:1)为展开剂，展开，取出，晾开，喷以醋酐-硫酸(20:1)混合溶液，在105?加热至斑点显色清晰，放冷，置紫外线光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，相同颜色的荧光斑点。 ? 取牛蒡子对照药材1.2g、甘草对照药材1g，分别加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(药典附录?B)试验，吸取鉴别?项下的供试品溶液及上述两种对照药材溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(40:10:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105?加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 点样:在洁净干燥的环境，用专用的点样器点样于玻板上，一般为圆点状或窄细的条带状，点样基线距底边10~15mm，接触点样时注意勿损伤薄层表面。点间距离可视斑点扩散情况以相邻斑点互不干扰为宜，一般不少于8mm。 (2)质量检查 A为500ml的短颈圆底烧瓶; B为水分测定管; C为直形冷凝管，外管长40cm。 使用前，全部仪器应清洁，并置烘箱中烘干。 ?水分检查 取供试品适量(约相当于含水量1~4ml)，精密称定，破碎成直径不超过3mm的颗粒，置A瓶中，加甲苯约200ml，必要时加入干燥、洁净的沸石或玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至B管的狭细部分。将A瓶置电 热套中缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2滴。待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的地方，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离(可加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察)。检读水量，并计算供试品中的含水量(%)。所含水分不得过15.0%。 ?重量差异检查 以一次服用量最高丸数为1份(丸重1.5g及1.5g以上的丸剂以1丸为1份;丸重0.015g以上的丸剂一次服用量最高丸数不足10丸的，以10丸为1份)取供试品10份，分别称定重量，再与标示总量(每丸标示重量×称取丸数)或标示重量相比较(无标示重量的丸剂，与平均重量比较)，按表1的规定，超出重量差异限度的不多于2份，并不得有1份超出限度1倍。 表1 表示总量或标示重量(或平均重量) 重量差异限度 0.05g及0.05g以下 ?12, 0.05g以上至0.1g ?11 0.1g以上至0.3 g ?10 0.3g以上至1.5g ?9 1.5g以上至3g ?8 3g以上至6g ?7 6g以上至9g ?6 9g以上 ?5 (3)含量测定 供试品溶液的制备:精密称取银翘解毒丸适量各3份研碎后，分别装入纸筒放入索氏提取装置，各加入95%乙醇100ml，加热回流提取至无色，过滤。取滤液于100ml容量瓶中，稀释至刻度，得到3份供试品溶液备用。 芦丁溶液额制备:精密称取芦丁对照品5.4mg，加入甲醇使其溶解，然后转移至25ml容量瓶中，定容，摇匀即得芦丁标准溶液(0.216mg/ml)。 标准曲线的制备:精密量取芦丁标准液0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，按顺序依次分别入5%NaNO2溶液0.4ml混匀，放置6min，加10%AlCl3溶液0.4ml摇匀，放置6min，再加入4%NaOH溶液4ml，并加蒸馏水稀释至刻度摇匀放置15min。以0.0ml配制的10ml作为空白，在510nm波长处 测定各标准溶液吸光度(A)值，然后以A值为纵坐标，标准溶液浓度C为横坐标绘制标准曲线，得到芦丁回归方程。 样品测定:取每组供试品溶液3.00ml5份，分别置于10ml容量瓶中，按“标准曲线的制备”方法配制样品，以相应的溶液为空白，在510nm波长处测定A值。代入回归方程中得实验结果。 四、实验结果 挥发油:0.2ml;稠膏的质量:243.25g;银翘解毒丸的规格:3g/丸。 (1)鉴别试验(见附页) (2)质量检查 ?水分检查 1 2 3 m /g m /g 11m/g 17.2141 17.1011 17.0018 1 m /g m /g 22m/g 20.3312 20.0023 19.9244 2 m /g m /g 33m/g 20.0110 19.8865 19.6463 3 编号1减少的重量=(20.3312-20.0110)/(20.3312-17.2141)×100%=10.3% 编号2减少的重量=(20.0023-19.8865)/(20.0023-17.1011)×100%=4.0% 编号3减少的重量=(19.9244-19.6463)/(19.9244-17.0018)×100%=9.5% 又因含水量不得超过12%，所以符合要求。 ?重量差异 20丸总重量为61.1552g，平均片重为3.0578g 编号 片重/g 重量差异/% 1 3.1507 1.57 2 2.9931 -2.12 3 3.0241 -1.10 4 3.1057 1.57 5 3.1019 1.44 6 3.0527 -0.17 7 2.9724 -2.79 8 3.0132 -1.46 9 3.0642 0.21 10 3.1020 1.45 11 3.0785 0.68 12 2.9876 -2.30 13 3.2157 5.16 14 2.8025 -8.35 15 3.3247 8.73 16 3.0845 0.87 17 2.9756 -2.69 18 3.0358 -0.72 19 3.0651 0.24 20 3.0152 -1.39 由上表可知，编号14和编号15超过了?8%，不符合要求。 ?溶解时限 编号 1 2 3 4 5 6 时间/min 31 16 4 15 21 28 (3)含量测定 芦丁的含量计算 在510nm吸收光下，芦丁的吸光度为0.616，代入标准方程得: 0.616=1.4357x-0.0157，解得浓度x= 0.44。 五、实验总结与讨论 1.总体上看，本次实验基本成功完成，小组成员相互合作，但由于我考研在即，所以参与到实验的时间比较少，非常感谢组员和老师的理解，谢谢大家～ 2.原料药煎煮过程时，我们小组一开始煎煮了一定时间后，由于电炉坏掉，而我们都没有发现，这既浪费了一定的时间，也存在着比较大的疏忽;而煎煮过程 提取到的挥发油也非常少，这也与我们一开始搭建的提取仪器失误有关，后来在老师的指导下改正。 3.制丸过程比较成功，看着做出来的丸子很有成就感，努力之后的成果。 4.丸剂的质量检查过程中，其中荆芥、薄荷脑鉴别和牛蒡子、甘草鉴别比较成功，能清楚看到色谱上的斑点，而连翘和制剂的鉴别却不怎么明显，可能与在制备对照液的时候出现错误。 5.通过这次实验，我们清楚地知道了银翘解毒丸的制备过程及其质量检测，同时也提高了自主查阅资料设计实验方案的能力，虽然整个实验过程不是完美，但最重要的是我们在这过程中学会了很多。