HPLC法测定橘红痰咳颗粒中柚皮苷的含量【机构】 遂宁市第一人民医院，成都志远广和医药研究院

四川医学 2011 年 6 月第 32 卷(第 6 期) Sichuan Medical Journal，2011，Vol． 32，No． 6 论著 HPLC法测定橘红痰咳颗粒中柚皮苷的含量 李小华1，刘 洁2 (1．遂宁市第一人民医院，四川 遂宁 629000;2．成都志远广和医药研究院，四川 成都 611731) 【摘要】 目的 建立橘红痰咳颗粒中柚皮苷的 HPLC含量测定方法。方法 Shim-pack ODS(250mm ×4. 6mm，5μm) 分析柱，流动相为甲醇-醋酸-水(35∶ 4∶ 61) ，流速 1. 0ml /min，检测波长 283nm。结果 在 64 ～ 640ng范围内浓度与色谱 峰面积呈线性关系，r = 0. 9998 平均加样回收率 100. 7%，RSD = 1. 76%(n = 9)。结论 方法简便、快速，精密度和稳定性 良好，适合于橘红痰咳颗粒生产的质量控制。 【关键词】 柚皮苷;橘红痰咳颗粒;高效液相色谱法 【中图分类号】 R 286. 0 【文献标识码】 A 【文章编号】 1004-0501(2011)06-0933-02 Determination of naringin in juhong tanke granule by HPLC． LI Xiao-hua1，LIU Jie2. 1． First People's Hospital of Suin- ing，Suining，Sichuan 629000;2． Chengdu Zhiyuan Aquarions Medical Research Co;Ltd，Chengdu ，Sichuan 611731，China 【Abstract】 Objective To establish an HPLC method for naringin in Juhong Tanke Granule． Methods Shim-pack ODS (250mm ×4. 6mm，5μm)column was used as analytical column，the methanol-acetic acid-water (35∶ 4∶ 61)was used as mo- bile phase at the flow rate 1. 0ml /min，and detective wavelength was set at 283nm． Results The standard curve was linear in the range 64 ～ 640ng (r = 0. 9998) ，The average recovery was 100. 7%，RSD = 1. 76% (n = 9)． Conclusion The HPLC method was convenient、selective and accurate，it could be used for quality control for juhong tanke granule． 【Key words】 naringin;juhong tanke granule;HPLC 橘红痰咳颗粒系中华人民共和国《卫生部药品标 准》(中药成方制剂第十四册)收载的品种。它由化橘 红、百部、苦杏仁等 8 味中药组成。具有理气祛痰，润 肺止咳之功效。临床上用于感冒、支气管炎、咽喉炎引 起的痰多咳嗽，气喘等症。化橘红为方中君药，柚皮苷 为其主要成分之一。目前该制剂质量中尚无含量 测定项目。因制剂成分较多，干扰较大，本实验建立了 高效液相色谱法测定橘红痰咳颗粒中柚皮苷的含量， 该法操作简便，结果准确。适合该药生产的质量控制。 1 材料与方法 1. 1 仪器:高效液相色谱仪(日本岛津公司) :LC- 10AT输液单元、SPD-M10Avp紫外可见双波长检测器、 CTO-10Asvp柱温箱、CLASS-VPLC色谱工作站，AB204- N电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海公司)超声 波清洗器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。 1. 2 试药:柚皮苷对照品(中国药品生物制品检定 所) ，甲醇(分析醇、色谱醇) ，橘红痰咳颗粒供试品(四 川志远嘉宝药业有限责任公司)。 1. 3 色谱条件:Shim-pack ODS(250mm × 4. 6mm， 5μm)分析柱，柱温 30℃;流动相为甲醇-醋酸-水(35∶ 4∶ 61) ;流速 1. 0ml /min;检测波长 283nm，进样 10μl。 1. 4 对照品溶液、供试品溶液及空白对照液的制备: 精密称取在 110℃干燥至恒重的柚皮苷对照品适量，加 甲醇制成每 1ml 含 30μg 的溶液;再取供试品适量，研 细，取细粉约 0. 25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加甲醇 25ml，密塞，称定重量，超声处理 20min，取出， 放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤 过，取续滤液，用微孔滤膜 0. 45μm 滤过，作为供试品 溶液;另取处方中除化橘红以外的其余药材，按工 艺提取制备，并按供试液制备方法制成空白对照液。 1. 5 测定方法［1，2］:称取在 110℃已干燥至恒重的柚 皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解制成每 1ml 含 柚皮苷 0. 128mg的溶液，分别用甲醇稀释成不同浓度 ［5］ Ribal MJ，Mengual L，Marín M，et al． Molecular staging of bladder cancer with RT-PCR assay for CK20 in peripheral blood，bone marrow and lymph nodes:comparison with standard histological staging［J］． Anticancer Res，2006，26(1A) :411 ～ 419 ［6］ Pu XY，Wang ZP，Chen YR，et al． Clinical value of combined detec- tion with urinary bladder cancer antigen，hyaluronic Acid and cytoker- atin 20 in diagnosis of bladder cancer［J］． Ai Zheng，2008，27(9) : 970 ～ 973 (收稿日期:2010-10-28) ·339· 书书书 四川医学 2011 年 6 月第 32 卷(第 6 期) Sichuan Medical Journal，2011，Vol． 32，No． 6 的测定溶液，取 6 个点分别测定，以柚皮苷进样量 (μg)为横坐标 X，峰面积积分值为纵坐标 Y，得回归方 程。精密吸取对照品溶液 10μl，重复进样 6 次，测定峰 面积。重复性试验，取同一批供试样品，按供试品溶液 制备方法操作并测定，其含量的 RSD =1. 09%(n = 5)。 取已知柚皮苷含量的供试样品 9 份，精密称定，分为 3 组，每组分别加入柚皮苷对照品一定量，按前述方法处 理并测定计算加样回收率。稳定性试验，取同一供试 品溶液，分别在不同时间测定。 2 结 果 2. 1 按以上色谱条件测定，柚皮苷与其他组分均能良 好分离，见图 1。 A B C A．柚皮苷 B．供试品 C．空白对照 图 1 样品 HPLC图 2. 2 线性关系:以柚皮苷进样量(μg)为横坐标 X，峰 面积积分值为纵坐标 Y，得回归方程 Y = 1748. 8X + 25. 9，r = 0. 9998，表明柚皮苷在 64 ～ 640ng时与色谱峰 面积有良好的线性关系。 2. 3 精密度试验:RSD =0. 82%。 2. 4 重复性和加样回收率:见表 1。 2. 5 稳定性试验:供试品溶液在 8h内稳定。 2. 6 样品测定:取 10 批橘红痰咳颗粒样品，按前述方 法处理并测定，每批测定 2 次，结果见表 2。 3 讨 论 3. 1 试验中曾对供试样品处理方法采用超声振荡法 进行提取，方法简便，测得的柚皮苷含量结果较稳定; 曾考察不同提取时间(10、20、30min)对柚皮苷含量的 影响，发现超声处理 20min 和 30min 的提取条件测得 的柚皮苷含量最高，且结果近似，因此在制备供试品溶 液时采用甲醇超声处理 20min的方法进行提取。 3. 2 本法测定橘红痰咳颗粒中柚皮苷含量简便、准 确、重复性好，可作为该制剂的含量测定方法。试验中 测定 10 批 20 个样品的柚皮苷含量，考虑到大生产中 便于控制质量，含量限度初步以每袋含柚皮苷不得少 于 18. 0mg为宜。 参考文献: ［1］ 中华人民共和国药典委员会． 中国药典［S］． 北京:化学工业出版 社，2005，51 ［2］ 王统康，王振中． RP-HPLC 法测定橘红痰咳液中柚皮苷的含量 ［J］．中国药品标准，2001，2(1) :33 (收稿日期:2011-02-11) ·439·