儿童肺炎支原体感染的早期实验诊断探讨

和股骨头发育 [ 7 ]。因此对先天性髋关节发育不良作出早 期诊断、早期治疗 ,及时恢复正常的对合关系 ,对促进髋 关节的发育至关重要。外展操能刺激髋关节整体的发育 和生长 ,以期达到股骨头和髋臼的正常解剖关系。宽尿 布法能保持屈曲外展位 ,通过患儿下肢的自然活动 ,使脱 位的股骨头复位 ,同时也刺激了髋关节的发育 ,使髋臼不 断加深 ,形成正常髋关节的头臼同心包容。与对照组相 比 ,治疗组新生儿 DDH恢复明显加快 ( P < 0. 05) ,差异 有统计学意义。 髋关节外展操及宽尿布包裹法对出生 1个月内 DDH 筛查阳性患儿有明显的疗效 ,因此方法对新生儿无创伤 , 操作方便 ,不需住院 ,不会给家庭及社会增加经济负担 , 患儿和家长都容易接受 ,治疗并发症少 ,并能通过功能锻 炼增强家庭成员间的感情联系。此方法有一定的临床应 用价值。 4　参考文献 [ 1 ]彭旭 ,杨柳 ,陈光兴 ,等. 不同年龄段髋关节发育不良的治疗 [ J ]. 中 华关节外科杂志 , 2008, 2 (4) : 446 - 449. [ 2 ]吉士俊 ,潘士川 ,王承武. 小儿骨科学 [M ]. 济南 :山东科技出版社 , 2001: 142 - 160. [ 3 ]彭晓瑜. 先天性髋关节脱位新生儿期筛查的价值 [ J ]. 四川医学 , 2005, 26 (11) : 1247 - 1248. [ 4 ]陈博昌. 发育性髋关节异常的早期诊断和早期治疗 [ J ]. 中华小儿外 科 , 2005, 26 (11) : 603 - 605. [ 5 ]马志芳. 发育性髋发育不良诊治的再认识 [ J ]. 广西医学 , 2006, 28 (9) : 1328 - 1330. [ 6 ]吉士俊. 发育性髋脱位的新生儿筛查及预防 [ J ]. 继续医学教育 , 2006, 20 (18) : 89 - 91. [ 7 ]韩培江. 先天性髋关节脱位的早期诊断 [ J ]. 中医正骨 , 2009, 21 (2) : 54 - 55. (收稿日期 : 2010 - 05 - 21) 文章编号 : 1004 - 9231 (2010) 11 - 0588 - 02 ·临床交流 · 作者简介 :黄晓芳 (1981— ) ,女 ,医师 ,学士。 儿童肺炎支原体感染的早期实验诊断探讨 黄晓芳 , 吴琳 , 柴鸣雷 (浙江省杭州市中医院 , 浙江 杭州 310000) 　　肺炎支原体 (mycop lasma pneumoniae, MP)感染是导 致儿童呼吸道感染的常见病原 [ 1 ]。近年大量研究表明 , 儿童肺炎支原体感染率有逐年上升趋势 ,好发年龄提前 , 并可引起多系统损害。治疗上 ,β - 内酰胺类抗生素无 效 ,而大环内酯类抗生素疗效显著。故应用特异、敏感、 快速的检测手段进行早期诊断尤为重要。我们通过分别 检测呼吸道感染患儿血清 MP特异性抗体与痰 MP - DNA,及辅助检测血常规 ,血 C - 反应蛋白 ( C - reactive2 p rotein, CRP) ,探讨其在肺炎支原体感染早期实验诊断的 价值。 1　与方法 1. 1　一般资料 本组为 2007年 7月至 2009年 6月拟诊为肺炎在我 院住院的患儿共 263例 ,其中男 130例 ,女 133例。年龄 2个月～14岁 ,其中 < 1岁 16例 , 1～岁 66例 , 3～岁 86 例 , 6～岁 95例。 1. 2　方法 患儿于入院时应用抗生素前 ,用一次性导管口腔送 入 ,利用负压吸引的原理 ,吸取呼吸道声门以下部分分泌 物 1～3 mL,置于连接专用吸痰管的无菌储痰器中 ,立即 送检 ,采用实时荧光 PCR法测 MP - DNA,按操作严 格执行。于入院当天 (急性期即应用抗生素前 )及恢复期 (间隔 1周后 )分别采集非抗凝外周静脉血 2 mL。血清 抗体检测采用深圳博卡生物公司的 MP - IgG、IgM 试剂 盒 ( EL ISA法 ) ,按说明书操作。另于入院当天采 2 mL外 周静脉血进行血常规及血 CRP检测。 1. 3　统计学处理 组间阳性率差异采用卡方检验分析 , P < 0. 05表示 差异有统计学意义。 2　结果 263例患儿中 ,血清抗体 MP - IgM阳性 72例 ,其中 40例血清抗体 MP - IgM急性期阳性恢复期复查亦为阳 性 , 32例血清抗体 MP - IgM急性期阴性 ,恢复期复查后 阳性 ;痰 MP - DNA阳性标本 82例 ;联合检测 (急性期血 清抗体 MP - IgM联合痰 MP - DNA)阳性的标本为 91例 (表 1)。 血 MP - IgM阳性者中血白细胞计数 < 10 ×109 /L , CRP > 10 mg/L的占 33. 33% ;血 MP - IgM阴性者中血白 细胞计数 < 10 ×109 /L , CRP > 10 mg/L的占 12. 57%。两 者阳性率比较 ,χ2 = 15. 112, P < 0. 05,差异有统计学意义 (表 2)。 ·885· 上海预防医学杂志 Shanghai Journal of Preventive Medicine　　　　　　　　　　　　　 2010年第 22卷第 11期 　　2010, Vol. 22 No. 11 表 1　各检测结果比较 ( n = 263) 　　检测项目 阳性数 阳性率 ( % ) 血清 MP - IgM 72 27. 38 急性期血清 MP - IgM 40 15. 21 恢复期血清 MP - IgM 72 27. 38 痰 MP - DNA 82 31. 18 联合检测 91 34. 60 　①血清特异性抗体检测与痰 PCR法比较 ,χ2 = 0. 92, P > 0. 05,差异 无统计学意义 ; ②血特异性抗体检测法与联合检测比较 ,χ2 = 3. 209, P > 0. 05,差异无统计学意义 ; ③恢复期与急性期血特异性抗体检测比 较 ,χ2 = 11. 616, P < 0. 05,差异无统计学意义 ; ④痰 PCR法与联合检测 比较 ,χ2 = 0. 698, P > 0. 05,差异无统计学意义。 表 2　血常规及血 CRP检测结果 组别 例数 血白细胞计数 <10 ×10 9 /L, CRP >10 mg/L 例数 百分比 ( % ) MP - IgM阳性 72 24 33. 33 MP - IgM阴性 191 24 12. 57 3　讨论 近年来 ,MP已成为小儿肺炎的重要病原体 ,平均支 原体肺炎占住院肺炎的 10% ～20% ,流行期间可占 30% 以上。儿童 MP感染一般起病隐匿 ,临床症状以咳嗽、发 热为主 ,与一般呼吸道感染无差异 ,胸部 X线片也无特异 性 ,因此仅仅靠临床诊断较为困难。同时病程长、肺外并 发症多 ,使病情更加复杂 ,易造成漏诊、误诊 ,因此及早的 病原学检查 ,对早期诊断及临床用药有重要指导意义。 目前 , MP感染的实验室诊断方法主要有分离培养 法、冷凝集实验、MP - IgM检测法、痰 PCR检测法等。MP 的分离培养是一种特异性的诊断方法 ,但培养缓慢阳性 率低 ,不能快速诊断 ,应用于早期诊断受限。冷凝集试验 检测患者血液中冷凝集素 ( IgM ) ,虽然方法简单、易行 , 但其敏感性和特异性均较差 ,限制了其在临床的应用 ,只 可作为支原体感染的过筛实验 ,目前已极少采用。 MP - IgM检测法具有快速、特异、廉价等优点 ,已作 为我国 MP感染确诊标准之一。MP感染时 , IgM抗体可 在 1周后开始上升 ,国外资料显示 ,MP - IgM在 MP感染 7～10 d后出现 ;国内研究显示 ,MP - IgM在 MP感染 5～ 15 d后出现 ,平均 7. 6 d,抗体均随病程逐渐升高 , 3～5周 达高峰 ,持续 12～16周甚至更长的时间。在本研究中 , 急性期血清抗体 MP - IgM 阳性标本 40例 ,阳性率仅为 15. 21% , 1周后再次采血 ,有 32例患儿的 MP - IgM抗体 由阴转阳 ,阳性率增高至 27. 38% ,急性期、恢复期血清阳 性率比较 ,差异有统计学意义。由此可见 ,急性期血清抗 体检测可作为 MP感染的早期诊断标准之一 ,但存在显 著漏诊 ;恢复期血清抗体检测对于提高诊断率、减少漏诊 率有积极的意义。目前多家医院都采用血清学检测作为 临床诊断 MP感染的“金标准 ”[ 2 - 3 ]。结合本研究的临床 观察 ,MP - IgM阳性患儿症状体征符合 MP感染的典型 表现 ,应用β - 内酰胺类抗生素疗效不佳 ,换用大环内酯 类药物后疗效显著 ,也进一步说明血抗体检测诊断 MP 感染的价值 ,但对于早期诊断有限制。 聚合酶链反应 ( PCR)技术自 1985年问世以来 ,已广 泛应用于生物学的各个领域 ,该技术在 MP感染的诊断 中也得到很好应用。MP - PCR检测的实验时间短 ,特异 性与敏感性高 ,在各年龄组之间差异无统计学意义 ,不存 在交叉反应和放射性污染等特点是其他检测技术无法比 拟的。非 MP感染患者咽部极少带有该病原体 ,也为该 检测的准确性提供了保证 [ 4 ]。1995年出现的以标记特异 性荧光探针为特点的荧光定量 PCR技术 ,完全闭管式操 作 ,大大减少了扩增产物污染的机会 ,提高了检测特异 性 ,并可对扩增产物进行精确定量 [ 5 - 6 ]。在本次研究中 , 采用实时荧光 PCR法测痰 MP - DNA,阳性标本共 82例 , 阳性率为 31. 18% ,与血 MP - IgM检测法比较差异无统 计学意义。故痰 PCR法与血特异性抗体检测一样 ,可以 作为 MP感染的诊断指标 ,且对于早期诊断更有明显价 值。 另外 ,本组研究还发现 ,血白细胞计数 < 10 ×109 /L 且 CRP > 10 mg/L的标本在恢复期血 MP - IgM阳性及阴 性标本中的出现率差异有统计学意义 ,说明在肺炎患儿 中血白细胞不高而血 CRP升高的异常虽不能作为确诊 标准 ,但可作为 MP感染的早期指标之一 ,在 PCR检 测及血清抗体检测无法立即进行时 ,可为临床医师选药 提供参考 ,一定程度上指导诊断治疗。当然 ,肺炎支原体 感染所引起的症状并不典型 , PCR检测法和血清抗体检 测法均存在一定程度假阳性 ,分析结果时应结合临床表 现、流行病学资料综合考虑 ,做到早期诊断早期防治。 4　参考文献 [ 1 ]韩旭 ,辛德莉 ,李靖 ,等. 难治性肺炎支原体肺炎 5例 [ J ]. 实用儿科 临床杂志 , 2008, 23 (4) : 289 - 290. 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