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脑心通胶囊对冷水负重游泳模型小鼠的心、脑保护作用
高琦瑛,陈岫峰
高琦瑛,包头铁路医院药剂科,内蒙古自治区包头市 !"#!"!
陈岫峰 $ 内蒙古医学院第三附属医院药剂科,内蒙古自治区包头市
!"#!"!
高琦瑛,男,"%&" 年生,北京市人,汉族,"%’( 年内蒙古医学院毕业,学
士,副主任药师,主要从事药品管理的研究。
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电话:7 ’&8#9:8:::(9"9
中图分类号:!"#$ 文献标识码:% 文章编号:&’"& ( )*+’ ,+--# .++ ( #)$’ ( -$
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高琦瑛,陈岫峰 2 脑心通胶囊对冷水负重游泳模型小鼠的心、脑保护作用 L M N - 中
国临床康复,@AAB,D E @@ F:BHIJ K D
34456 / / 7772 89:;<=2 ;>? / +--#?: / -# ( ++8@ / #)$’2 5A=
摘要
目的:观察脑心通胶囊对冷水负重小鼠冷水中存活时间的影响,探讨其对
模型鼠脑及心脏保护作用的机制。
:"实验动物按分层随机法分为 W 组,即模型对照组、天保宁片
#! 3) X Y)组、脑心通胶囊 !5 # ) X Y)组、!5 ’ ) X Y)组、"5 & ) X Y)组,小鼠
’ U冷水负重游泳至死,测定存活时间。!实验动物按分层随机法分为
& 组,即正常对照组、模型对照组、天保宁片 #! 3) X Y)组、脑心通胶囊
!5 (: ) X Y)组、!5 ) X Y)组、"5 :’ ) X Y)组,小鼠 ’ U冷水负重游泳 W 3-/,
测定脑组织及心脏组织生化代谢的改变。
结果:"脑心通胶囊 !5 ’和 "5 & ) X Y)可以明显延长模型小鼠的存活时间$
分别是 T’#W5 !! [ "::5 :( V, T9#%5 (’ [ "("5 !# V F,与模型对照组
T&:!5 (’ [ 9W5 (WV F比较$ 差异有非常显著性意义 T & ] ^ &5 :!#$ ^ (5 #"#$
) _ !5 !" V。!与正常对照组相比,模型小鼠脑组织乳酸含量增加,M* !
8a ! 8IK@酶活力降低,一氧化氮合酶(Mbc)活力增加() _ !5 !W),一氧化
氮含量未见明显变化;心脏组织乳酸含量增加,M* ! 8a ! 8IK@酶活力和肌
酸激酶活力降低() _ !5 !W)。脑心通胶囊可以不同程度地逆转模型小鼠
脑组织及心脏组织上述生化指标的异常改变() _ !5 !")
结论:脑心通胶囊可延长冷水负重游泳模型动物的存活时间,改善脑
组织及心脏组织生化代谢可能是其发挥脑保护作用和心脏保护作用
的部分机制。
主题词:中药疗法;乳酸;M*T ! V aT ! V交换 IK@酶;一氧化氮;一氧化氮合
酶;肌酸激酶
9 引言
脑心通胶囊临床已广泛用于治疗脑卒中所致半身不遂、肢体
麻木、口眼歪斜、舌强语謇及胸痹所致胸闷、心悸、气短等。本研究
采用小鼠 ! "冷水负重游泳的方法,通过测定模型动物存活时间
以及游泳一定时间后脑组织及心脏组织生化代谢的改变,验证该
复方的脑保护和心脏保护作用,并阐明其部分作用机制。
: 材料和方法
设计:随机对照的实验研究。
地点和材料:#$%清洁级小鼠,雌雄兼用,体质量(&’ ( &)),由
北京维通利华实验动物技术有限公司提供,合格证号:*$+,(京)
&’’&-’’’.。饲养条件:温度 &/ ",湿度 0’1 2 3’1,自然光照,自
由饮水,普通饲料。
药品与试剂:受试药:脑心通胶囊,由黄芪、丹参、桃仁、红花、
乳香、地龙、全蝎等 43味中药组成,功能益气活血、化瘀通络。临
床人常用量 /5 ! ) 6 7,主要用于治疗脑卒中和胸痹证 8由咸阳步
长制药有限公司提供,批号 ’&’0&0 9。阳性对照药:天保宁片,临
床人常用量 &/’ :) 6 78浙江康恩贝制药股份有限公司产品,每片
含银杏叶精提物为 /’ :),其中银杏总黄酮苷 ;5 3 :),批号
’4’04! 9。化学试剂:蛋白定量(考马斯亮蓝法)、乳酸、<= ! -, !
->?@酶、一氧化氮、一氧化氮合酶(工程
研究所提供,批号分别为 &’’&4&&3B
&’’&4&&3B &’’&4&&3B &’’.’4’/B &’’.’4’/B &’’.’4’/。其他药品
及试剂均为市售分析纯。
仪器:CDE-$空气浴振荡器,哈尔滨市东明医疗仪器厂产
品;/’’%低温离心机,德国 CFG=FHI产品;J&&型分光光度计,上
海第三分析仪器厂产品;>KL-&&’型电子分析天平,日本 *MN-
:=7OH公司产品。
参与者:设计者:北京中医药大学中药学院中药药理系徐秋
萍教授;干预实施和评估者:第一、二作者。
干预
:脑心通胶囊对冷水负重游泳模型小鼠存活时间的
·中医康复研究·
中国临床康复 第 ! 卷 第 "" 期 +--#B-CB-) 出版
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! 脑心通胶囊对冷水负重游泳模型小鼠存活时间的影响 "!! ! " #
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表 $ 脑心通胶囊对冷水负重游泳模型小鼠脑组织生化代谢的影响
"!! ! " #
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影响:!分组及给药:在进行冷水负重游泳模型小鼠存活时间测
定时,实验动物按分层随机法分为 !组,即模型对照组、天保宁片
"# $% & ’%组、脑心通胶囊 #( " % & ’%组、#( ) % & ’%组、*( + % & ’%
组,分别相当于人常用剂量的 !,*# 和 ,# 倍。共计 )- 只小鼠,其
中模型组 *)只,天保宁片组 *-只,脑心通胶囊小剂量和中剂量
组各 *. 只,大剂量组 *) 只。动物先连续灌胃给药 / 0,一日剂量
分两次给予,每次给药容积为 *# $1 & ’%。第 "天 * 次给药全日
量 +# $23后造模。模型对照组灌服等容积的 ! % & 1羧甲基纤维
素纳(454678)溶液。实验过程中动物均无死亡。"造模方法及
模型小鼠存活时间测定:小鼠尾尖部约 ,( ! 9$处系一 *#:体
质量的橡皮泥球,放入()( # ; #( !)<冷水中游泳至溺水死亡
(室温保持 ," <)。记录小鼠由放入冷水起至溺水死亡的一段
时间作为存活时间。
脑心通胶囊对冷水负重游泳模型小鼠脑组织及心脏组织生化
代谢的影响:!分组及给药:实验动物按分层随机法分为 +组,即
正常对照组、模型对照组、天保宁片 "# $% & ’%组、脑心通胶囊
#( /, % & ’%组、#( +" % & ’%组、*( ,) % & ’%组,分别相当于人用剂量
的 ",)和 *+倍。共计 )#只小鼠,其中模型组和正常组均为 *,只,
天保宁片组和脑心通胶囊 / 个剂量组均为 *" 只。给药方法同
上。正常对照组和模型对照组灌服等容积的 ! % & 1 454678溶
液。实验过程中动物均无死亡。"造模方法:同上。正常对照组
不予冷水游泳。
生化指标测定:将模型小鼠自冷水中取出后,迅速置于 " <
冰盘上取脑(去除嗅球、小脑及下位脑干)和心脏,加 - 倍生理
盐水制备成 *## % & 1匀浆备用,以测定脑组织乳酸含量、78 !
6= ! 6>?@酶活力、一氧化氮含量和 7AB活力;心脏组织乳酸含
量、78 ! 6= ! 6>?@酶活力和肌酸激酶活力。测定均按照试剂盒说
明进行。
主要结局观察指标:各组小鼠游泳死亡时间;脑组织乳酸
含量、78 !一氧化氮含量和 7AB活力;心脏组织乳酸含量、78 !
6= ! 6>?@酶活力和肌酸激酶活力。
统计学分析:数据以 !! ! "表示,采用 B@BB *#( # CDE F230DFG
统计软件包,由第一作者进行组间比较 #检验。
! 结果
,( * 脑心通胶囊对模型小鼠存活时间的影响 脑心通胶囊
#( ) % & ’%,*( + % & ’%可以明显延长模型小鼠的存活时间( $ H
#( #*),而脑心通胶囊 #( " % & ’%对模型小鼠的存活时间无明显
影响( $ I #( #!)。结果见表 *。
,( , 脑心通胶囊对模型小鼠脑组织及心脏组织生化指标的影
响 与正常对照组相比,模型小鼠脑组织乳酸含量明显增加,
78 ! 6= ! 6>?@酶活力明显降低,7AB活力增加( $ H #( #!),一氧
化氮含量未见明显改变;心脏组织乳酸含量明显增加,78 ! 6= !
6>?@酶活力和肌酸激酶活力明显降低($ H #( #!)。脑心通胶囊
/ 个剂量可以不同程度地逆转模型小鼠脑组织及心脏组织上述
生化指标的异常改变( $ H #( #!,$ H #( #*)。结果见表 ,,/。
" 讨论
本研究借冷水负重游泳小鼠模型探讨了脑心通胶囊益气活
血、化瘀通络作用,并通过测定模型小鼠脑组织及心肌组织生化
指标的变化,阐明了该复方的部分作用机制。
模型动物受到缺氧、寒冷刺激后,机体组织 78 ! 6= ! 6>?@酶
活力下降,细胞膜功能异常 " # $,导致离子转运受抑,从而诱发一
系列病理生理反应。实验中还发现,模型小鼠脑和心肌组织乳
酸含量增加。脑心通胶囊可以明显增强模型小鼠脑和心肌组织
的钠泵活性,使其在物质转运、能量转换以及信息传递等方面所
起的作用得以发挥,并可抑制乳酸过多产生。故认为脑心通胶
囊的抗酸中毒作用可能与其改善能量代谢有关。
各种强度的运动均使血清中肌酸激酶活性增加,这可能与
肌细胞膜出现暂时通透性变化或损伤,导致酶类物质向细胞外
释放,以及运动时剧烈振荡,细胞内代谢产物的积累所致渗透压
增高,肌糖原耗竭致细胞内供能相对不足,导致细胞膜的结构产
生变化等有关 "% $。本实验中负重运动造成小鼠心肌细胞损伤,肌
酸激酶渗漏,导致肌酸激酶活力降低。脑心通胶囊可以回升模型
小鼠已降低的肌酸激酶活力,提示该复方有助于维持细胞膜结
构的完整性,减少肌酸激酶等关键酶的丢失。
一氧化氮由前体 1 J精氨酸(168E%)在 7AB 催化下生成,
其生理和病理作用的发挥有赖于 7AB 活性,而 7AB 活性具有
十分复杂的生物调控机制 " & ’ ( $。本实验研究表明,模型小鼠脑
组织 7AB 活力增加。这可能由于 168E% 由细胞外进入细胞内
属于主动转运 " ) $,需要消耗钠泵活动形成的势能储备,但此时
模型小鼠能量匮乏,使进入细胞内的 168E% 减少,7AB 活力反
馈性增高。脑心通胶囊可以明显逆转这种改变。但在本实验
条件下,未观察到各组间模型小鼠脑组织一氧化氮含量的差
异,分析认为与一氧化氮化学性质不稳定,## * % 短,不易直接
测定有关。
表 % 脑心通胶囊对冷水负重游泳模型小鼠心脏组织生化代谢的影响
"!! ! " #
与模型对照组相比,! ! ! #$ &00( #$ ,’)# " - &$ &.," ! ! " #$ &,. + " #$ /’/( " -
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脑心通胶囊组
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56 $ 78 $ 79:;酶
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!"#$ !""# $%&$ ’ ()*% +# *$ ’ $,&- . / !!!" #$%&’(" &)* 中国临床康复 *--, 年 0 月 ( 日 第 0 卷 第 ** 期
现代药理研究表明:脑心通处方中,黄芪升高外周血细胞,
增强造血系统功能 ! " #,抑制血小板聚集;丹参、桃仁、红花扩血
管,抑制血栓形成,改善微循环;地龙抗血栓形成。诸药协同使
用,补气活血,药少力专,共收益气活血,化瘀通络,标本兼治之
功。从实验结果来看,药物的量效关系虽然不是很好,但是仍然
可以证实该药具有减少乳酸堆积,增加钠泵活性,抑制 !"#活
性增加,增强肌酸激酶活力的作用,这可能是其治疗脑卒中,延
长存活时间的重要机制。
结论:本研究采用小鼠 $ %冷水负重游泳的方法,发现脑心
通胶囊可以延长模型小鼠的存活时间,抑制模型小鼠脑组织乳
酸含量增加,!& $ ’( $ ’)*+酶活力降低,!"#活力增加,心脏组
织乳酸含量增加,!& $ ’( $ ’)*+酶活力和肌酸激酶活力降低,部
分阐明了该复方发挥心、脑保护作用的机制。
! 参考文献
听觉脑干诱发电位在偏头痛中的评估
价值
娄 平, 李雪梅 !驻马店市第一人民医院神经内科,河南省驻马店市
"#$%%% &
摘要! 对 "#$例偏头痛临床发作期患者同时进行听觉脑干诱发
电位(%&’()*+,- ’./(+0&1 ,203,/ 40+,)+(’56 789:)及经颅多普勒
(+&’)*;&’)(’5 <0445,&6 =><)检查,并与 ?@@ 例无偏头痛症状的健
康人对照。结果表明,偏头痛患者发作期 789:异常 "?A 例,异
常率 BCD $E;=><异常 "?$例,异常率 B#D ?E,两者异常率相
似。789:与 =><在偏头痛的检测中都有良好的敏感性,对偏头
痛 789:可作为一种重要的检测手段应用于临床。
主题词:偏头痛;诱发电位,听觉,脑干;超声检查,多普勒,经颅
! 对象和方法
"D " 对象 ?@@@ F @C G ?@@C F "@驻马店市第一人民医院神经内
科门诊按国际头痛学会制定的
!" #。选取偏头痛患者 "#$例。
男 ##例,女 "@?例,年龄 "$ H I?岁,平均年龄(CID " J "ID ")岁;
病程 "D ? H "$D @年,发作频率平均 AD ?次 G年,再发 ?@ -() H " /
不等。所有病例都先后经 >=检查排除颅内占位病变,排除高血
压、糖尿病病史。其中有典型偏头痛发作者 "?#例,普通型偏头痛
A?例,有精神紧张、心理因素、睡眠不足、被动吸烟、饮酒、月经周
期等诱发因素者 "@#例,无明显诱因者 #?例。#$例有头痛症家族
史。按发作时头痛的程度和对日常生活、工作的影响分为 !$ #:!级
(轻度头痛):发作时头痛较轻微,不影响日常生活和工作;"级(中
度头痛):发作时头痛较重,影响日常生活和工作;#级(重度头
痛):发作时头痛严重,不能坚持日常生活和工作,甚至被迫卧
床。"#$例中,轻度头痛 "?例,中度头痛 K"例,重度头痛 #I例。
另选本院 ?@@@ F @A G "@体检 ?@@例 "$ H I@岁的无症状的健康人
为正常组。正常组与偏头痛组年龄、性别间无统计学差异。
"D ? 方法 被检者均于检测前 C /末服用扩血管药、解热镇痛
剂、潘生丁等药物,于发作期同时行经颅多普勒(+&’)*;&’)(’5
<0445,&6 =><)及听觉脑干诱发电位(%&’()*+,- ’./(+0&1 ,203,/
40+,)+(’56 789:)检测,分别测双侧大脑前动脉、大脑中动脉、大
脑后动脉、基底动脉及椎动脉,观察平均血流速度、脉动指数;
在安静闭目状态下测 789:,分别记录!,",#,$和%波绝对
潜伏时间、!,#,!,%,#,%波峰间期、% G!波幅比、# H% G
!H#峰间期比值及波形分化。统计学方法:计数资料用例数和
百分数表示,配对 !!检验。
" 结果
?D " 偏头痛发作期和正常组 =><比较 以平均血流速度异常
为主,其中以大脑中动脉、大脑后动脉、基底动脉、左侧椎动脉和
右侧椎动脉为显著。偏头痛发作期大脑前动脉异常 "?例,大脑
中动脉异常 K$例,大脑后动脉异常 AK例,基底动脉异常 A?例,
左侧椎动脉异常 I?例,右侧椎动脉异常 I$例,其中大脑中动脉
伴基底动脉异常 "I例,大脑中动脉伴左侧椎动脉异常 "$例,大
脑中动脉伴右侧椎动脉异常 "K例。脉动指数异常 "#例。
?D ? 偏头痛发作期和正常组 789:比较 偏头痛患者发作期#,
%波绝对潜伏时间及# H%波峰间期及# H% G!H#峰间期比
值明显异常,其中偏头痛发作期各波绝对潜伏时延长及波形分化
不良例数分别为!波 #例,#波 $B例,%波 "@?例及各波峰间期
延长例数!H#波 #例,!H%波 ?A例,# H%波 #$例,# H% G
!H#峰间期比值 L "者 K#例。
?D C 偏头痛发作期 =><和 789:异常率比较 "#$例中 =><异
常 "?$例,异常率 B#D ?E;789:异常 "?A例,异常率 BCD $E,两
种检测结果比较差异无显著性意义( !$ M ?D ?I6 ! L @D @I)。
# 讨论
目前多认为偏头痛是一种脑功能失调,其所有症状都是脑
功能相关改变的结果。神经递质学说认为,I F羟色胺、去甲肾
及多巴胺等与偏头痛发作有关,I F羟色胺 " 受体广泛分布于
脑,特别是颅内血管及脑干的中缝背核及大核。本文结果显示,
偏头痛发作期无临床症状,发作期 =><显示 B#D ?E的患者有血
流速度的增加或降低,符合 "K$$ 年国际头痛协会制定的诊断标
准 ! " #。789:的波形起源:N波,产生于与耳蜗紧密相连的一段听
神经纤维的动作电位或为与毛细胞相连接的听神经树突的突触
后电位;NN波产生于脑干耳蜗核;NNN波 产生与内侧上橄榄神经
核;NO产生与外侧丘系腹核;O波产生于外侧丘系上方或下丘
! % #。脑干听觉通路的血液供应主要是小脑前下动脉。本试验结果
NNN H O波峰间期延迟 #$ 例,NNN H O G N H NNN峰间期比 L " 有 K#
例,说明听觉通路在脑干部主要是桥脑部传导减慢,其原因可能
是由于反复出现的“偏头痛启动点”神经介质异常及继发性颅内
血管,尤其是脑干血管异常变化,导致脑干听觉通路神经纤维不
同程度的髓鞘脱失有关,有待于进一步研究证实。
$ 参考文献
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