益元活血丹胶囊对大鼠急性脑缺血保护作用的实验研究
益元活血丹胶囊对大鼠急性脑缺血保护作
用的实验研究
铂朔燧脑
1998年l2月第4卷第6期中国实验方剂学杂志否\.31.
益元活血丹胶囊对大鼠急性脑缺血保护作用的实验研究
君玫李建击鲁万强(河南中医学院郑州450003)/一
州帽啦0oO4)
.
益元活血丹是由何首乌,黄精,沙苑子,
三七等组成,具有补肾填精,益元活血功能.
临床上用于治疗老年人腔隙性梗塞收效显
着.为了探讨该方的机理进行了实验研究.
1材料与
1.1材料
1.1.1动物Wistar大鼠100只,体重
280g~320g雌雄各半,由同济医科大学实验
动物中心提供.
1.1.2药物益元活血丹胶囊由河南中医
学院第一附属医院提供,批号950610i每粒
含生药2g.盐酸氟桂嗪胶囊由河南浙川制药
厂提供,批号950515;伊文思蓝为Fluka进
口,上海化学试剂采购供应站提供,批号
991214;sOD,LPO试剂盒由南京建成生物
工程研究所提供.
1.1.3仪器RM一6000型多道生理
仪,日本光电;721型分光光度计,上海第三
分析仪器厂;电子天平,日本岛津;GBC一
904AA型原子吸收分光光度计,澳大利亚.
1.2方法
1.2.1脑缺血模型建立,实验动物均在最后
1次给药30min后,按方法Es]以盐酸氯氨酮
0.1g/kg腹腔注射麻醉,在颅骨矢状缝与冠
状缝交叉处左前,右后各装一皮层脑电极,牙
托粉固定,分离左右侧颈总动脉,穿线备用,
气管插管,暴露颅底骨,剪开,暴露基底动脉,
以5个0号细丝线结扎基底动脉,接通人口
呼吸机.结扎基底动脉5rain后,夹闭双侧颈
总动脉,10min后放开动脉夹,恢复供血,造
成全脑缺血再灌注损伤.
1.2.2实验分组100只分为2批实验,每
批5O只大鼠随机分为5组,雌雄各半,普通
饲养.(1)正常组1O只,分离双侧颈总动脉及
基底动脉但不结扎,(2)模型组1O只,造模,
(1),(2)组每日灌服生理盐水0.4ml/100g
(3)氟桂嗪组10只,造模同时用0.O17g/kg
?
d氟桂嗪灌胃,(4),(5)益元活血丹大,小
剂量组各1O只,造模,用益元活血丹26g/kg
?
d,,13g/kg?d灌胃,各组连续用药
14d.1批测EEG,SoD,LPO,组织学观察,1
批测EB.
1.2.3观察项目及检测指标实验动物用
药14d后,?分别观察EEG消失时间(以夹
闭双侧颈总动脉开始至EEG消失时间);出
现时间(以恢复血供3s内连续出现振幅>
10my,频率>4次/s的EEG时间)?再灌
注180min后,断头取脑,以视交叉处向前部
切取冠状脑片2mm厚,液氮保存.测SOD,
LPO时先将脑组织在冰浴中碾磨,以冰冷生
理盐水配制为10脑匀浆,4000rpm离心
lOmln.取上清液,黄嘌呤氧化酶法测定脑组
织sOD含量,LPO以硫代巴比妥酸(TBA)
法测定脑组织中丙二醛(MDA)的含量.?其
余脑组织HE染色作组织学观察.?脑血管
通透性测定,第14d给药60rain后,正常组
于尾静脉注射伊文思蓝50mg/kg,造模动物
在结扎双倒颈总动脉10min经尾静脉注射
同样剂量的伊文思蓝.再灌注180mln后,迅
速取脑称重,分别浸泡于甲酰胺(4ml/个)
中,于45?温育72h,将脑组织色素全部提
出,721分光光度计620rim比色0查
曲
线得脑组织EB含量,以此值表示血管通透
性的变化.
1.3统计学方法数据以i士表示,2组
?
32?ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae
均数间差异采用t检验.
2结果
2.1EEG观察结果EEG消失时间模型
组明显短于氟桂嗪组;EEG出现时间益元活
血丹组和氟桂嗪组明显短于模型组.结果见
表1.
衰1盏元活血丹对脑缺血再灌流损伤皮层脑电圈的响
往:与模型组比较<0.05,P<O.01(襄同)
2.2脑组织SOD,LPO变化模型组与正
常组比较s0D含量显着降低,而LPO含量
明显增高;益元活血丹与模型组比较能明显
增高SOD含量并降低LPO含量.见表2
衰2盐元活血丹对脑缺血再;l流赫组织
SOD,LPO含量的响(i土)
注:与正常组比较P<O05,”P<0.01(下表同)
2.3益元活血丹组织形态学变化正常组
组织结构正常;模型组脑组织缺血区域见有
水肿,血管,神经细胞,神经胶质细胞周围间
隙增宽,神经胶质细胞明显增生,局部区域见
有出血灶;氟桂嗪组脑组织的血管,神经细
胞,神经胶质细胞周围间隙轻度增宽;益小剂
量组脑组织局部水肿,神经胶质细胞增生;益
大剂量组脑组织与氟桂嗪组略相仿,表明这
2组脑组织有明显改善.
2.4脑血管通透性变化模型组与正常组
比较EB含量显着增加,益元活血丹与模型
组比较能明显降低其含量.见表3.
衰3益元活血丹对脑组织伊文思兰含量的形响(i土)
3讨论
脑缺血致脑损伤是一个复杂的继发性病
理改变,本实验的脑缺血模型比较接近临床
上腔隙性梗塞的病理特征.EEG可反映出脑
缺血时脑电变化,从而观察脑损伤的存在和
程度.实验结果显示,该方有明显提高SOD
活性和降低LPO,EB含量作用,表明该方可
通过提高SOD抗自由基反应的酶活力,抑制
细胞膜脂质过氧化反应,并可通过降低血脑
屏障通透性,抑制细胞毒性脑水肿的发生,对
脑细胞起到保护作用,从而为该药临床治疗
腔隙性脑梗塞提供了可靠的科学依据
参考文献
1李建生.益元活血方治疗老年人腔隙性梗塞的
观察及其对血小板功能的影响.中国中医急症,
1995.4(5)i99,201
2李威.电针对大鼠垒脑缺血再灌流损伤的保护
作用.中国针灸,1996,16(11):21,22
3王岚棼.脑栓康对实验性大鼠脑缺血的保护作
用.中西医结合杂志,1990,10:46,47
(收稿:1997—1226
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