益元活血丹胶囊对大鼠急性脑缺血保护作用的实验研究

益元活血丹胶囊对大鼠急性脑缺血保护作用的实验研究 益元活血丹胶囊对大鼠急性脑缺血保护作 用的实验研究 铂朔燧脑 1998年l2月第4卷第6期中国实验方剂学杂志否\.31. 益元活血丹胶囊对大鼠急性脑缺血保护作用的实验研究 君玫李建击鲁万强(河南中医学院郑州450003)/一 州帽啦0oO4) . 益元活血丹是由何首乌,黄精,沙苑子, 三七等组成,具有补肾填精,益元活血功能. 临床上用于治疗老年人腔隙性梗塞收效显 着.为了探讨该方的机理进行了实验研究. 1材料与 1.1材料 1.1.1动物Wistar大鼠100只,体重 280g~320g雌雄各半,由同济医科大学实验 动物中心提供. 1.1.2药物益元活血丹胶囊由河南中医 学院第一附属医院提供,批号950610i每粒 含生药2g.盐酸氟桂嗪胶囊由河南浙川制药 厂提供,批号950515;伊文思蓝为Fluka进 口,上海化学试剂采购供应站提供,批号 991214;sOD,LPO试剂盒由南京建成生物 工程研究所提供. 1.1.3仪器RM一6000型多道生理 仪,日本光电;721型分光光度计,上海第三 分析仪器厂;电子天平,日本岛津;GBC一 904AA型原子吸收分光光度计,澳大利亚. 1.2方法 1.2.1脑缺血模型建立,实验动物均在最后 1次给药30min后,按方法Es]以盐酸氯氨酮 0.1g/kg腹腔注射麻醉,在颅骨矢状缝与冠 状缝交叉处左前,右后各装一皮层脑电极,牙 托粉固定,分离左右侧颈总动脉,穿线备用, 气管插管,暴露颅底骨,剪开,暴露基底动脉, 以5个0号细丝线结扎基底动脉,接通人口 呼吸机.结扎基底动脉5rain后,夹闭双侧颈 总动脉,10min后放开动脉夹,恢复供血,造 成全脑缺血再灌注损伤. 1.2.2实验分组100只分为2批实验,每 批5O只大鼠随机分为5组,雌雄各半,普通 饲养.(1)正常组1O只,分离双侧颈总动脉及 基底动脉但不结扎,(2)模型组1O只,造模, (1),(2)组每日灌服生理盐水0.4ml/100g (3)氟桂嗪组10只,造模同时用0.O17g/kg ? d氟桂嗪灌胃,(4),(5)益元活血丹大,小 剂量组各1O只,造模,用益元活血丹26g/kg ? d,,13g/kg?d灌胃,各组连续用药 14d.1批测EEG,SoD,LPO,组织学观察,1 批测EB. 1.2.3观察项目及检测指标实验动物用 药14d后,?分别观察EEG消失时间(以夹 闭双侧颈总动脉开始至EEG消失时间);出 现时间(以恢复血供3s内连续出现振幅> 10my,频率>4次/s的EEG时间)?再灌 注180min后,断头取脑,以视交叉处向前部 切取冠状脑片2mm厚,液氮保存.测SOD, LPO时先将脑组织在冰浴中碾磨,以冰冷生 理盐水配制为10脑匀浆,4000rpm离心 lOmln.取上清液,黄嘌呤氧化酶法测定脑组 织sOD含量,LPO以硫代巴比妥酸(TBA) 法测定脑组织中丙二醛(MDA)的含量.?其 余脑组织HE染色作组织学观察.?脑血管 通透性测定,第14d给药60rain后,正常组 于尾静脉注射伊文思蓝50mg/kg,造模动物 在结扎双倒颈总动脉10min经尾静脉注射 同样剂量的伊文思蓝.再灌注180mln后,迅 速取脑称重,分别浸泡于甲酰胺(4ml/个) 中,于45?温育72h,将脑组织色素全部提 出,721分光光度计620rim比色0查曲 线得脑组织EB含量,以此值表示血管通透 性的变化. 1.3统计学方法数据以i士表示,2组 ? 32?ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae 均数间差异采用t检验. 2结果 2.1EEG观察结果EEG消失时间模型 组明显短于氟桂嗪组;EEG出现时间益元活 血丹组和氟桂嗪组明显短于模型组.结果见 表1. 衰1盏元活血丹对脑缺血再灌流损伤皮层脑电圈的响 往:与模型组比较<0.05,P<O.01(襄同) 2.2脑组织SOD,LPO变化模型组与正 常组比较s0D含量显着降低,而LPO含量 明显增高;益元活血丹与模型组比较能明显 增高SOD含量并降低LPO含量.见表2 衰2盐元活血丹对脑缺血再;l流赫组织 SOD,LPO含量的响(i土) 注:与正常组比较P<O05,”P<0.01(下表同) 2.3益元活血丹组织形态学变化正常组 组织结构正常;模型组脑组织缺血区域见有 水肿,血管,神经细胞,神经胶质细胞周围间 隙增宽,神经胶质细胞明显增生,局部区域见 有出血灶;氟桂嗪组脑组织的血管,神经细 胞,神经胶质细胞周围间隙轻度增宽;益小剂 量组脑组织局部水肿,神经胶质细胞增生;益 大剂量组脑组织与氟桂嗪组略相仿,表明这 2组脑组织有明显改善. 2.4脑血管通透性变化模型组与正常组 比较EB含量显着增加,益元活血丹与模型 组比较能明显降低其含量.见表3. 衰3益元活血丹对脑组织伊文思兰含量的形响(i土) 3讨论 脑缺血致脑损伤是一个复杂的继发性病 理改变,本实验的脑缺血模型比较接近临床 上腔隙性梗塞的病理特征.EEG可反映出脑 缺血时脑电变化,从而观察脑损伤的存在和 程度.实验结果显示,该方有明显提高SOD 活性和降低LPO,EB含量作用,表明该方可 通过提高SOD抗自由基反应的酶活力,抑制 细胞膜脂质过氧化反应,并可通过降低血脑 屏障通透性,抑制细胞毒性脑水肿的发生,对 脑细胞起到保护作用,从而为该药临床治疗 腔隙性脑梗塞提供了可靠的科学依据 参考文献 1李建生.益元活血方治疗老年人腔隙性梗塞的 观察及其对血小板功能的影响.中国中医急症, 1995.4(5)i99,201 2李威.电针对大鼠垒脑缺血再灌流损伤的保护 作用.中国针灸,1996,16(11):21,22 3王岚棼.脑栓康对实验性大鼠脑缺血的保护作 用.中西医结合杂志,1990,10:46,47 (收稿:1997—1226 投稿须知 题目简明确切,最好不超过z0个字.题目下的作者单位应写全名,所 在省市地名及邮政编 码.论着须附摘要(12以内)和关键诃(5个以内),并将题目,全部作者,单位,摘要及关键词 译成英文(作者用汉语拼音名),中,英文内容,顺序一致,用16开白纸打印2份.摘要用词应精 练,结构要严谨,不分行,不进行自我评价.简报,经验报道类文稿无须中,英文摘要,关键词