动态比浊法定量检测复方氨基酸注射液中的细菌内毒素

· 58· 滨州医学院学报2006年?旦箜垫堂箜 塑 旦丛 』 ： 呈 №： 动态比浊法定量复方氨基酸注射液中的细菌内毒素 宋 威 贺德勇 胜利石油管理局中心医院药剂科 东营市 257034 【关键词】 复方氨基酸注射液；动态比浊法；细菌内毒素；干扰试验；鲎试剂 【中图分类号】 R576 【文献标识码】 B 【文章编号】 1001-9510[2006)01-0058-02 1 材料与方法 1．1 材料与试剂 细菌内毒素检查用水(BET水) (批号030510．规格 10 ml／支，厦门鲎试剂厂)；鲎试 剂(动态浊度法鲎试仪专用，批号030725，规格0．15 ml／支。厦门鲎试剂厂)；细菌内毒素工作品(批号 030610．规格10 EU／支，厦门鲎试剂厂)；复方氨基 酸注射 液 (3AA)批 号 200304012，200304121， 200305093，200305161，200306222，规格 250 ml／瓶， 湖北峰江)；BET-32型细菌内毒素测定仪(天津大学 无线电厂)；ZH-2自动漩涡混合器(天津药典仪 器厂)；实验所用玻璃器皿经铬酸洗液处理后，再经 250~C干烤 lh以上，除去外源性内毒素。 1．2 方法与结果 1．2．1 实验条件：检测温度为37℃；检测波长为 660 am；最长检测时间为8400 g。 1．2．2 细菌内毒素限值(L)的确定⋯：按公式 L= K／M。K为静脉注射给药的细菌内毒素阈剂量=5．0 EU·ml一。M为病人每千克体重每小时最大给药剂 量。本文采用家兔热原剂量 M=10 ml·kg～· h～，则复方氨基酸注射液(3AA)细菌内毒素限值 (L)为0．5 EU·ml～。 1．2．3 标准曲线制备及可靠性：取细菌内毒素工作 品1支加 BET水 1．0 ml。用封口膜封口，置漩涡混 合器上混合 15 min。进行 l0倍稀释，然后2倍稀释， 且各步置漩涡混合器上混合30 S，使其最终内毒素 浓 度 为 1．0，0．5，0．25，0．125，0．0625，0．0312。 0．0156 EU·ml一稀释系列。各取 0．15 m1分别加到 预先加有0．15 ml鲎试剂的反应管内，混合均匀，插 入浊度仪进行检测。每一浓度平行3管。同时用 BET水做2管阴性对照(NC)，结果见l。 表 1 标准曲线的可靠性 内毒索浓度(EU／m1)平均反应时问(T／S) RSD(％) 将全部数据进行线性回归分析，回归方程：lsT = 3．0271—0．298021 lgC，r=一0．9950，最低浓度 = 0．0156 EU·ml～，且阴性对照管在检测时间外，故 标准曲线成立。 1．2．4 供试品溶液配制及干扰试验：①供试品最大有 效稀释倍数(1VlVD)计算：按公式lVlVD=L×C／k，L为 复方氨基酸注射液(3AA)的内毒素限值0．5 EU- l11l～。 为标准曲线最低浓度0．0156 EU·ml～，c为供 试液浓度。当L以EU·ml 表示时，c为1．0 ml· mL 得样品试验时最大有效稀释倍数(MVD)为32 倍。②干扰预试验：将3批复方氨基酸注射液(3AA) 用BET水稀释为2,4、6、8倍溶液，每个浓度分别取 o．15 rnl加o_l5 rnl鲎试剂作为样品检查(Et)；同时另 取5管，进行同样倍数稀释，并在各浓度溶液中强化 o．125 EU-ml 的内毒素作为样品阳性对照液(Es)， 分别取上述各液Q 15 加入预先加有 15 鲎试剂 的反应管内进行检测，每个浓度重复3管。并设阴性对 照，分别测定各浓度样品液及阳性样品的内毒素含量 Et和Es，按下式计算回收率(R)。R=(Es—Et)／0．125 ×100％。结果见表2。 表 2 供试品干扰预实验 注：批号200304012的回归方程为1 =3．06649一n 36061 lgc，r=-0．9895 批号200304121的回归方程为1gT=3．06675—0．35911 lgc，r=-0．9937 批号200305093的回归方程为1gT=3．06624一n 36121 l ，r= 一0．9910 维普资讯 http://www.cqvip.com 滨州医学院学报 2006年2月第 29卷第 l期 BMC Journal，Feb．2006，Vo1．29。No．1 根据中国药典2000年版规定，如果内毒素的回 收率在50％ 一200％之间时，则供试品在该试验条 件下不存在干扰因素。表2结果表明。3批供试品 在各倍稀释时均无干扰作用，4倍时回收率较好，可 作为定量检测的浓度。 1．2．5 供试品干扰试验与家兔法检查：取5批复方 氨基酸注射液用BET水稀释4倍。并制备样品阳性 对照，每个浓度重复3管，并做阴性对照，放人检测 仪检测，同时进行家兔法检查，结果阴性对照阴性， 其他数据见表3。 表 3 干扰试验 堂曼 呈 堕登堡墼坠 兰 兰! 兰 堕 一 墅 塞 鲨竺奎 200304012 4 <检测限 0．1172 93．8 合格 200304121 4 <检测限 0．1153 92．2 合格 200305093 4 <检测限 0．1145 91．6 合格 200305161 4 <检测限 0．1160 92．8 合格 200306222 4 <检测限 0．1199 96．0 合格 注：标准曲线为：lgT=3．02721—0．29802 lgC，r=一0．9903 · 59· 2 讨论 实验结果表明，各倍稀释液对鲎试剂不存在干 扰作用。4倍可以得到很好的回收率，且动态浊度法 进行细菌内毒素定量检测，使用计算机全过程监控， 样品反映情况能在显示屏上直观地反映出来，与传 统的家兔法相比．避免了动物个体差异及人为判断 误差所造成的假阳性或假阴性结果，具有灵敏、简 便、结果准确等优点，其检测结果与家兔热原检查结 果一致。因此，用动态浊度法检测复方氨基酸注射 液(3AA)中细菌内毒素含量是可行的。 参 考 文 献 1．夏振民．药品细菌内毒素检查的限值[J]．药物分析杂志，1995，15 (3)：54 2．中国药典．二部[S]．2000(附录)．204 (收稿日期：2005-02-01) 介入治疗并发症分析 赵怀才 邹平县人民医院放射科 256200 【关键词】 介入治疗；并发症；动脉灌注；栓塞 【中图分类号】 R815 【文献标识码】 B 【文章编号】 1001-9510(2006)01-0059-02 随着介人治疗技术的不断完善、发展以及在临 床上的广泛应用．因各种因素所引起的并发症也相 应增多。本文收集自2001年2月至2004年2月间 489例共696次采用Seldinger法穿刺股动脉插管行 血管介人治疗所发生的28例并发症做回顾性分析。 1 临床资料 本组489例患者年龄 l6 86岁，男276例，女 213例．经股动脉Seldinger法穿刺插管介入治疗696 次。其中头颈部53次，胸部249次，腹部368次，四 肢26次，共发生并发症28例。其中永久性截瘫 1 例，食管穿通性溃疡 1例，大面积胃粘膜损伤2例， 膀胱输尿管损伤1例．一过性神经系统功能障碍2 例，脾脓肿 1例，动脉内膜损伤3例，造影剂过敏2 例，皮肤损伤2例，导管打结1例，穿刺部位血肿l2 例。除1例永久性截瘫外，其余经临床积极治疗痊 愈。使用设备为GE9800 800mA遥控 x光机，美国 COOK公司和日本泰日茂公司生产的介人器材。 2 结果 2．1 与动脉灌注化疗药物有关的并发症 对395 例术中进行了613次动脉灌注化疗药物，除灌注的 化疗药物毒性反应引起的一般性副作用外，1例肺 癌灌注术后一周出现食管穿通性溃疡，l例出现神 经系统功能障碍。分析考虑皆因有一支食管动脉和 脊髓动脉与支气管动脉共干，经支气管动脉灌注化 疗药物时，未完全避开相应食管支、脊髓支，使高浓 度的化疗药物损伤相应段食管壁和脊髓，后经临床 积极治疗皆痊愈。 2．2 与栓塞有关的并发症 对265例作了358次 选择性动脉栓塞，其中颈外动脉 l9次，支气管动脉 82次．肝动脉 136次，。肾动脉29次，脾动脉9次，髂 维普资讯 http://www.cqvip.com